Vliv emolientního krému obsahujícího mléčný bioaktivní peptid na klinické příznaky, pruritus a bakteriální kolonizaci lehkých atopických dermatitidních lézí u dětské populace (AD-GMP-SCORAD)

Atopická dermatitida je chronické a recidivující kožní onemocnění charakterizované intenzivním svěděním, suchou pokožkou, zánětem a v některých případech ekzémem. Ačkoli se může vyskytnout v jakémkoli věku, je častější v dětství, s celosvětovou prevalencí odhadovanou mezi 5 % a 20 % u dětí a přibližně 7,3 % u dospělých. Její dopad na kvalitu života se pohybuje od mírného nepohodlí až po významné poruchy spánku a omezení v každodenních činnostech.

Patogeneze atopické dermatitidy je spojena se strukturálním a funkčním poškozením epidermis, což vede k zánětu, dysregulaci T pomocných buněk (Th1/Th2), zvýšené produkci imunoglobulinu E a hyperaktivitě žírných buněk, což vše zhoršuje bariérové abnormality. Nejčastější bariérová vada je snížená produkce filagrinu nebo jiných proteinů stratum corneum, což přispívá k xeróze a zvýšené náchylnosti k infekcím. Kromě toho snížená produkce antimikrobiálních peptidů usnadňuje bakteriální kolonizaci.

Současná léčba atopické dermatitidy závisí na emolienciích, lokálních kortikosteroidech a lokálních nebo systémových inhibitorech kalcineurinu, v závislosti na závažnosti a perzistenci onemocnění. Nicméně dlouhodobé užívání těchto léků může vést k nežádoucím účinkům, jako je pálení, hypertrichóza, teleangiektázie, atrofie kůže, akné, folikulitida, kontaktní dermatitida, nefrotoxicita, hepatotoxicita, záchvaty a nádory. Proto je potřeba alternativních léčebných postupů, které mohou snížit množství a dobu užívání léků a podpořit uzdravení pacienta.

Glykomakropeptid je peptid o 64 aminokyselinách odvozený z bovinního kaseinu během výroby sýra chymosinem nebo během trávení mléka pepsinem. Je vysoce glykosylovaný, hlavně na zbytcích serinu a threoninu, s tetrasacharidy obsahujícími kyselinu sialovou jako klíčovou složku jeho bioaktivity. Klinické studie prokázaly bezpečnost orálního glykomakropeptidu u lidí a bylo popsáno několik biologických aktivit, včetně protizánětlivých a antialergických účinků v preklinických modelech astmatu, kopřivky, potravinové alergie a atopické dermatitidy.

Co se týče kůže, glykomakropeptid prokázal příznivé účinky na keratinocyty, chrání je před apoptózou, zánětem a oxidačním stresem, zatímco podporuje jejich migraci a proliferaci, procesy, které podporují opravu kůže v atopických podmínkách. Glykomakropeptid také inhibuje aktivaci žírných buněk a makrofágů, klíčových imunitních buněk hojných v lézích atopické dermatitidy, které přispívají k chronickému zánětu.

Atopická dermatitida je spojena s kožní dysbiózou, charakterizovanou sníženou bakteriální diverzitou a přemnožením Staphylococcus aureus. In vitro studie z naší laboratoře ukazují, že glykomakropeptid nepodporuje růst S. aureus ani Staphylococcus epidermidis. Místo toho inhibuje adhezi S. aureus k lidským keratinocytům a naopak zvyšuje adhezi S. epidermidis, komenzálního druhu, který přispívá k homeostáze kůže. Dále glykomakropeptid snižuje schopnost S. aureus tvořit biofilmy, klíčový mechanismus perzistence.

Tyto zjištění podporují potenciál glykomakropeptidu jako topického terapeutického kandidáta pro atopickou dermatitidu, který působí prostřednictvím modulace zánětu, opravy kůže a modulace mikrobiomu.

Toto je randomizovaná, paralelní, dvojitě zaslepená klinická studie. Primárním cílem je vyhodnotit ochranný účinek topického glykomakropeptidu na klinické příznaky a symptomy atopické dermatitidy u dětí.

Sekundární cíle jsou:

1. Zjistit, zda je topický glykomakropeptid bezpečný a dobře snášený u dětí s atopickou dermatitidou.
2. Zjistit, zda je topický glykomakropeptid spojen se změnami v závažnosti lézí atopické dermatitidy a rozsahu ekzému na základě indexu SCORAD.
3. Zjistit, zda topický glykomakropeptid snižuje svědění spojené s ekzémem a zlepšuje délku spánku.
4. Zjistit, zda je topický glykomakropeptid spojen se sníženou kolonizací S. aureus na kůži.

Hlavní otázky, na které tato studie usiluje odpovědět, jsou:

• Snižuje glykomakropeptid příznaky a symptomy související s atopickou dermatitidou v pediatrické populaci?
• Mění glykomakropeptid kolonizaci druhů Staphylococcus v lézích atopické dermatitidy v pediatrické populaci? Studie populace. Děti ve věku 2 až 12 let s diagnózou atopické dermatitidy potvrzenou kritérii Hanifina a Rajky a klasifikovanou jako mírnou podle indexu SCORAD (<25 bodů). Účastníci budou vyloučeni, pokud budou mimo věkové rozmezí, budou mít skóre SCORAD >25, budou mít současné dermatózy, anamnézu přecitlivělosti nebo anafylaxe na jakékoli složky léčby, neschopnost účastnit se kontrolních návštěv nebo dodržovat léčebný plán, nebo jakýkoli klinický stav považovaný vyšetřovatelem za nevhodný.

Budou implementovány postupy ověřování dat, aby byla zajištěna přesnost a konzistence. Databáze bude obsahovat předdefinovaná pravidla pro rozsahy a kontroly logické konzistence (například věk 2-12 let, SCORAD <25 při zařazení). Data, která spadají mimo očekávaný rozsah nebo jsou nekonzistentní s jinými poli, budou označena k přezkoumání a případně opravena nebo zrušena.

Strategie náboru. Nábor bude proveden ve spolupráci s místními pediatrickými, alergologickými a imunologickými a dermatologickými lékařskými asociacemi. Dále budou provedeny screeningové kampaně na základních školách k identifikaci potenciálních účastníků, následované diskusemi o souhlasu zákonných zástupců.

Velikost vzorku a intervence. Celkem 20 způsobilých účastníků bude náhodně rozděleno do dvou skupin:

1. Emolientní krém s glykomakropeptidem.
2. Emolientní krém bez glykomakropeptidu (kontrola). Obě formulace budou aplikovány topicky na léze atopické dermatitidy dvakrát denně po dobu 4 týdnů. Účastníci se budou účastnit týdenních kontrolních návštěv pro klinické vyhodnocení a hodnocení SCORAD. Při první návštěvě bude proveden prick test k vyloučení přecitlivělosti na složky krému. Kromě toho budou na začátku a na konci studie odebrány vzorky kůže metodou strippingu ke kvantifikaci kolonizace druhy Staphylococcus.

Datový slovník pro studijní proměnné:

Nezávislé proměnné studie zahrnují:

• Pohlaví: Definováno jako morfologické rozdíly mezi mužem a ženou. Bude získáno z klinické dokumentace a klasifikováno jako mužské nebo ženské.
• Věk: Definován jako časové období mezi narozením a účastí ve studii. Bude získáno z klinické dokumentace a vyjádřeno v celých letech, s očekávaným rozsahem 2 až 12 let.

Závislé proměnné studie zahrnují:

• Diagnóza atopické dermatitidy: Definována jako přítomnost chronického a recidivujícího kožního onemocnění, potvrzená splněním alespoň tří hlavních a tří vedlejších kritérií Hanifina a Rajky. Klasifikováno jako přítomné nebo nepřítomné.
• Závažnost atopické dermatitidy: Definována jako objektivní a subjektivní klinické charakteristiky onemocnění, měřené pomocí indexu SCORAD. Závažnost bude kategorizována jako mírná (<25), střední (25-50) nebo těžká (>50).
• Exacerbace: Definována jako zvýšení nebo recidiva příznaků po období bez příznaků, také měřeno indexem SCORAD, a klasifikována jako mírná, střední nebo těžká podle stejných hraničních hodnot.
• Období remise: Definováno jako doba trvání absence příznaků atopické dermatitidy. Bude měřeno ve dnech na základě klinických hodnocení.
• Období exacerbace: Definováno jako doba trvání exacerbace příznaků. Bude měřeno ve dnech na základě klinických hodnocení.
• Kolonizace S. aureus: Definována jako přítomnost a množství této oportunní grampozitivní bakterie v lézích atopické dermatitidy. Bude měřena pomocí vzorků kůže odebraných strippingem analyzovaných kultivací nebo PCR, vyjádřeno jako kopie genu femA S. aureus na ng celkové DNA.
• Poměr S. aureus k S. epidermidis: Definován jako vztah mezi patogenním druhem a komenzálním druhem kožního mikrobiomu. Bude měřen pomocí vzorků kůže odebraných strippingem analyzovaných kultivací nebo PCR, vyjádřeno jako poměr kopií DNA genu femA (S. aureus/S. epidermidis).
• Prick test: Definován jako kožní test, který vystavuje žírné buňky alergenům k detekci senzibilizace. Bude zaznamenán jako pozitivní, když je pozorována pupen ≥3 mm větší než negativní kontrola, a negativní jinak.

Sběr dat. Bude implementován plán zajištění kvality, aby byla zajištěna přesnost a úplnost shromážděných dat. Pediatrický alergolog a hlavní vyšetřovatel budou dohlížet na dodržování protokolu u každého účastníka ve všech klinických hodnoceních a laboratorní postupy budou prováděny podle standardizovaných protokolů.

Všechna chybějící, nedostupná nebo neinterpretovatelná data budou zaznamenána jako "chybějící". Nekonzistence dat nebo výsledky mimo rozsah budou také považovány za chybějící. Primární analýza použije dostupná data bez imputace. Data budou analyzována pomocí softwaru Prism GraphPad s použitím vhodných statistických metod podle proměnných zájmu.

Všechny studijní záznamy budou k dispozici k přezkoumání etickou komisí nebo externími auditory, pokud to bude vyžadováno.

Analýza dat. Statistická analýza bude zahrnovat deskriptivní statistiku k shrnutí základních charakteristik účastníků, včetně průměrů, směrodatných odchylek, frekvencí a procent, jak je vhodné. Srovnání mezi studijními skupinami bude provedeno pomocí Chi-square testů. Spojité proměnné, včetně skóre indexu SCORAD, bakteriální kolonizace (zatížení S. aureus a poměr S. aureus/S. epidermidis) a klinických výsledků, jako je doba trvání období remise a exacerbace, budou porovnány mezi skupinami pomocí Studentových t testů. Statistická významnost bude stanovena na p < 0,05 a analýzy budou provedeny pomocí softwaru Prism GraphPad.

Závěrečná zpráva a šíření. Na základě výsledků bude připravena závěrečná zpráva studie a bude sepsán vědecký rukopis pro případnou publikaci.