Влияние эмолентного крема, содержащего биоактивный пептид молока, на клинические признаки, зуд и бактериальную колонизацию легких поражений кожи при атопическом дерматите у педиатрической популяции (AD-GMP-SCORAD)

Атопический дерматит — это хроническое и рецидивирующее заболевание кожи, характеризующееся интенсивным зудом, сухостью кожи, воспалением и, в некоторых случаях, экземой. Хотя он может возникнуть в любом возрасте, он чаще встречается в детстве, с глобальной распространённостью, оцениваемой между 5% и 20% у детей и примерно 7,3% у взрослых. Его влияние на качество жизни варьируется от лёгкого дискомфорта до значительных нарушений сна и ограничений в повседневной деятельности.

Патогенез атопического дерматита связан со структурным и функциональным нарушением эпидермиса, приводящим к воспалению, дисрегуляции T-хелперных клеток (Th1/Th2), увеличению продукции иммуноглобулина E и гиперреактивности тучных клеток, всё это усугубляет барьерные аномалии. Наиболее распространённый дефект барьера — снижение продукции филаггрина или других белков рогового слоя, способствующее ксерозу и повышенной восприимчивости к инфекциям. Кроме того, сниженная продукция антимикробных пептидов облегчает бактериальную колонизацию.

Текущее лечение атопического дерматита основано на эмоллиентах, топических кортикостероидах и топических или системных ингибиторах кальциневрина, в зависимости от тяжести и персистенции заболевания. Однако длительное применение этих препаратов может привести к побочным эффектам, таким как жжение, гипертрихоз, телеангиэктазии, атрофия кожи, акне, фолликулит, контактный дерматит, нефротоксичность, гепатотоксичность, судороги и новообразования. Поэтому необходимы альтернативные методы лечения, которые могут сократить количество и время приёма препаратов и способствовать выздоровлению пациента.

Гликомакропептид — это 64-аминокислотный пептид, полученный из бычьего казеина во время производства сыра химозином или во время переваривания молока пепсином. Он высоко гликозилирован, в основном по остаткам серина и треонина, с тетрасахаридами, содержащими сиаловую кислоту в качестве ключевого компонента его биоактивности. Клинические исследования продемонстрировали безопасность перорального гликомакропептида у людей, и описаны множественные биологические активности, включая противовоспалительные и противоаллергические эффекты в доклинических моделях астмы, крапивницы, пищевой аллергии и атопического дерматита.

Что касается кожи, гликомакропептид показал благоприятные эффекты на кератиноциты, защищая их от апоптоза, воспаления и окислительного стресса, одновременно способствуя их миграции и пролиферации — процессам, поддерживающим восстановление кожи при атопических состояниях. Гликомакропептид также ингибирует активацию тучных клеток и макрофагов, ключевых иммунных клеток, обильно присутствующих в очагах атопического дерматита и способствующих хроническому воспалению.

Атопический дерматит связан с дисбиозом кожи, характеризующимся снижением бактериального разнообразия и чрезмерным ростом Staphylococcus aureus. Исследования in vitro из нашей лаборатории демонстрируют, что гликомакропептид не способствует росту S. aureus или Staphylococcus epidermidis. Вместо этого он ингибирует адгезию S. aureus к человеческим кератиноцитам и, напротив, усиливает адгезию S. epidermidis, комменсального вида, способствующего гомеостазу кожи. Кроме того, гликомакропептид снижает способность S. aureus образовывать биоплёнки, ключевой механизм персистенции.

Эти данные подтверждают потенциал гликомакропептида в качестве топического терапевтического кандидата для атопического дерматита, действующего через модуляцию воспаления, восстановление кожи и модуляцию микробиоты.

Это рандомизированное, параллельное, двойное слепое клиническое исследование. Основная цель — оценить защитный эффект топического гликомакропептида на клинические признаки и симптомы атопического дерматита у детей.

Вторичные цели:

1. Определить, является ли топический гликомакропептид безопасным и хорошо переносимым у детей с атопическим дерматитом.
2. Определить, связан ли топический гликомакропептид с изменениями в тяжести поражений атопического дерматита и распространённости экземы, на основе индекса SCORAD.
3. Определить, уменьшает ли топический гликомакропептид зуд, связанный с экземой, и улучшает ли продолжительность сна.
4. Определить, связан ли топический гликомакропептид со снижением колонизации S. aureus на коже.

Основные вопросы, на которые направлено данное исследование:

• Уменьшает ли гликомакропептид признаки и симптомы, связанные с атопическим дерматитом, в педиатрической популяции?
• Изменяет ли гликомакропептид колонизацию видами Staphylococcus в очагах атопического дерматита в педиатрической популяции? Исследуемая популяция. Дети в возрасте от 2 до 12 лет с диагнозом атопического дерматита, подтверждённым критериями Ханифина и Райки, и классифицированные как лёгкие согласно индексу SCORAD (<25 баллов). Участники будут исключены, если они выходят за пределы возрастного диапазона, имеют оценку SCORAD >25, сопутствующие дерматозы, историю гиперчувствительности или анафилаксии к любым компонентам лечения, неспособность посещать контрольные визиты или соблюдать график лечения, или любое клиническое состояние, признанное исследователем неподходящим.

Будут внедрены процедуры проверки данных для обеспечения точности и согласованности. База данных будет включать предопределённые правила для диапазонов и проверок логической согласованности (например, возраст 2-12 лет, SCORAD <25 при включении). Данные, выходящие за пределы ожидаемого диапазона или несовместимые с другими полями, будут помечены для проверки и исправлены или аннулированы, в зависимости от случая.

Стратегия набора. Набор будет осуществляться через сотрудничество с местными педиатрическими, аллергологическими, иммунологическими и дерматологическими медицинскими ассоциациями. Кроме того, будут проведены скрининговые кампании в начальных школах для выявления потенциальных участников, с последующими обсуждениями согласия опекунов.

Объём выборки и вмешательства. Всего 20 подходящих участников будут случайным образом распределены в две группы:

1. Эмоллиентный крем с гликомакропептидом.
2. Эмоллиентный крем без гликомакропептида (контроль). Обе формы будут применяться топически на очаги атопического дерматита дважды в день в течение 4 недель. Участники будут посещать еженедельные контрольные визиты для клинической оценки и оценки SCORAD. На первом визите будет проведён прик-тест для исключения гиперчувствительности к компонентам крема. Кроме того, образцы кожи будут получены методом соскоба на исходном уровне и на финальном визите для количественного определения колонизации видами Staphylococcus.

Словарь данных для переменных исследования:

Независимые переменные исследования включают:

• Пол: Определяется как морфологические различия между мужским и женским. Будет получен из клинической записи и классифицирован как мужской или женский.
• Возраст: Определяется как временной период между рождением и участием в исследовании. Будет получен из клинической записи и выражен в полных годах, с ожидаемым диапазоном от 2 до 12 лет.

Зависимые переменные исследования включают:

• Диагноз атопического дерматита: Определяется как наличие хронического и рецидивирующего заболевания кожи, подтверждённое выполнением как минимум трёх основных и трёх второстепенных критериев Ханифина и Райки. Классифицируется как присутствующий или отсутствующий.
• Тяжесть атопического дерматита: Определяется как объективные и субъективные клинические характеристики заболевания, измеряемые с помощью индекса SCORAD. Тяжесть будет классифицирована как лёгкая (<25), умеренная (25-50) или тяжёлая (>50).
• Обострение: Определяется как увеличение или рецидив симптомов после периода без симптомов, также измеряемое индексом SCORAD и классифицируемое как лёгкое, умеренное или тяжёлое согласно тем же точкам отсечения.
• Период ремиссии: Определяется как продолжительность отсутствия симптомов атопического дерматита. Будет измеряться в днях на основе клинических оценок.
• Период обострения: Определяется как продолжительность обострения симптомов. Будет измеряться в днях на основе клинических оценок.
• Колонизация S. aureus: Определяется как присутствие и количество этой оппортунистической грамположительной бактерии в очагах атопического дерматита. Будет измеряться через образцы соскоба кожи, анализируемые культурой или ПЦР, выражено как копии гена femA S. aureus на нг общей ДНК.
• Соотношение S. aureus к S. epidermidis: Определяется как отношение патогенного вида к комменсальному виду кожной микробиоты. Будет измеряться через образцы соскоба кожи, анализируемые культурой или ПЦР, выражено как соотношение копий гена ДНК femA (S. aureus/S. epidermidis).
• Прик-тест: Определяется как кожный тест, подвергающий тучные клетки воздействию аллергенов для обнаружения сенсибилизации. Будет записан как положительный, когда наблюдается волдырь ≥3 мм больше, чем отрицательный контроль, и отрицательный в противном случае.

Сбор данных. Будет внедрён план обеспечения качества для обеспечения точности и полноты собранных данных. Педиатр-аллерголог и главный исследователь будут контролировать соблюдение протокола у каждого участника во всех клинических оценках, а лабораторные процедуры будут выполняться в соответствии со стандартизированными протоколами.

Все отсутствующие, недоступные или неинтерпретируемые данные будут записаны как "отсутствующие". Несоответствия данных или результаты вне диапазона также будут считаться отсутствующими. Первичный анализ будет использовать доступные данные без импутации. Данные будут анализироваться с использованием программного обеспечения Prism GraphPad, применяя соответствующие статистические методы в соответствии с интересующими переменными.

Все записи исследования будут доступны для проверки этическим комитетом или внешними аудиторами, если потребуется.

Анализ данных. Статистический анализ будет включать описательную статистику для обобщения исходных характеристик участников, включая средние значения, стандартные отклонения, частоты и проценты, по мере необходимости. Сравнения между группами исследования будут выполнены с использованием критериев хи-квадрат. Непрерывные переменные, включая баллы индекса SCORAD, бактериальную колонизацию (нагрузку S. aureus и соотношение S. aureus/S. epidermidis) и клинические исходы, такие как продолжительность периодов ремиссии и обострения, будут сравниваться между группами с использованием t-тестов Стьюдента. Статистическая значимость будет установлена на уровне p < 0,05, и анализы будут проведены с использованием программного обеспечения Prism GraphPad.

Заключительный отчёт и распространение. На основе результатов будет подготовлен заключительный отчёт исследования и составлена научная рукопись для потенциальной публикации.