Emolienssivoiteen vaikutus, joka sisältää maitoperäistä bioaktiivista peptidia, lasten atooppisen ihottuman lievien ihovaurioiden kliinisiin oireisiin, kutinaan ja bakteeripesäkkeisiin (AD-GMP-SCORAD)

Atopinen dermatitti on krooninen ja toistuva ihosairaus, jolle on ominaista voimakas kutina, kuiva iho, tulehdus ja joissakin tapauksissa ekseema. Vaikka se voi esiintyä millä tahansa iällä, se on yleisempää lapsuudessa, ja sen maailmanlaajuiseksi esiintyvyydeksi arvioidaan 5–20 % lapsilla ja noin 7,3 % aikuisilla. Sen vaikutus elämänlaatuun vaihtelee lievästä epämukavuudesta merkittäviin unihäiriöihin ja päivittäisten toimintojen rajoituksiin.

Atopisen dermatitin patogeneesi liittyy ihon yläkerroksen rakenteelliseen ja toiminnalliseen heikentymiseen, mikä johtaa tulehdukseen, T-auttajasolujen (Th1/Th2) säädön häiriöihin, immunoglobuliini E:n lisääntyneeseen tuotantoon ja mastosolujen yliaktiivisuuteen, jotka kaikki pahentavat estehäiriöitä. Yleisin estehäiriö on filagriinin tai muiden sarveiskerroksen proteiinien vähentynyt tuotanto, mikä edesauttaa kuivuutta ja lisääntynyttä alttiutta infektioille. Lisäksi antimikrobisten peptidien vähentynyt tuotanto helpottaa bakteerien kasvua.

Atopisen dermatitin nykyinen hoito perustuu emollienteihin, paikallisiin kortikosteroideihin ja paikallisiin tai systemaattisiin kalsineuriinin estäjiin riippuen sairauden vakavuudesta ja pysyvyydestä. Kuitenkin näiden lääkkeiden pitkäaikainen käyttö voi aiheuttaa haittavaikutuksia, kuten poltetta, liikakarvoitusta, teleangiektasioita, ihon atrofiaa, aknea, follikuliittia, kontaktidermatittiä, nefrotoksisuutta, hepatotoksisuutta, kouristuksia ja kasvaimia. Siksi tarvitaan vaihtoehtoisia hoitomuotoja, jotka voivat vähentää lääkkeiden määrää ja käyttöaikaa sekä edistää potilaan toipumista.

Glykomakropeptidi on 64-aminohappopeptidi, joka johdetaan lehmän kaseiinista juustonvalmistuksen aikana kymosiinin tai maidon sulatuksen aikana pepsiiinin avulla. Se on erittäin glykosyloitu, pääasiassa seriini- ja treoniinijäämien kohdalla, ja tetrasakkaridit, jotka sisältävät sialihappoa, ovat keskeinen osa sen bioaktiivisuutta. Kliiniset tutkimukset ovat osoittaneet suun kautta annetun glykomakropeptidin turvallisuuden ihmisillä, ja useita biologisia vaikutuksia on kuvattu, mukaan lukien tulehdusta ja allergiaa estävät vaikutukset astman, nokkosihottuman, ruoka-allergian ja atopisen dermatitin esikliinisissä malleissa.

Ihon suhteen glykomakropeptidilla on osoitettu hyödyllisiä vaikutuksia keratino syyteihin, suojaten niitä apoptoosilta, tulehdukselta ja hapettumisstressiltä, samalla edistäen niiden siirtymistä ja lisääntymistä – prosesseja, jotka tukevat ihon korjautumista atopisissa olosuhteissa. Glykomakropeptidi estää myös mastosolu- ja makrofäägiaktivaatiota, keskeisiä immuunisoluja, joita on runsaasti atopisen dermatitin leesioissa ja jotka edesauttavat kroonista tulehdusta.

Atopinen dermatitti liittyy ihon dysbioosiin, jolle on ominaista bakteerien monimuotoisuuden väheneminen ja Staphylococcus aureus -bakteerin liikakasvu. In vitro -tutkimukset laboratoriostamme osoittavat, että glykomakropeptidi ei edistä S. aureusin tai Staphylococcus epidermidisin kasvua. Sen sijaan se estää S. aureusin kiinnittymistä ihmisen keratino syytteihin ja päinvastoin lisää S. epidermidisin kiinnittymistä, kommensaalista lajia, joka edistää ihon homeostaasia. Lisäksi glykomakropeptidi vähentää S. aureusin kykyä muodostaa biofilmejä, keskeistä pysyvyysmekanismia.

Nämä havainnot tukevat glykomakropeptidin mahdollisuutta paikalliseksi terapeuttiseksi kandidaatiksi atopiselle dermatitille, toimien tulehduksen, ihon korjautumisen ja mikrobiston säädön kautta.

Tämä on satunnaistettu, rinnakkais, kaksoissokkoteksti. Ensisijainen tavoite on arvioida paikallisen glykomakropeptidin suojavaikutusta atopisen dermatitin kliinisiin merkkeihin ja oireisiin lapsilla.

Toissijaiset tavoitteet ovat:

1. Selvittää, onko paikallinen glykomakropeptidi turvallinen ja hyvin siedetty lapsilla, joilla on atopinen dermatitti.
2. Selvittää, liittyykö paikallinen glykomakropeptidi muutoksiin atopisen dermatitin leesioiden vakavuudessa ja ekseeman laajuudessa SCORAD-indeksin perusteella.
3. Selvittää, vähentääkö paikallinen glykomakropeptidi ekseemaan liittyvää kutinaa ja parantaa unen kestoa.
4. Selvittää, liittyykö paikallinen glykomakropeptidi vähentyneeseen S. aureus -kolonisaatioon iholla.

Pääkysymykset, joihin tämä tutkimus pyrkii vastaamaan, ovat:

• Vähentääkö glykomakropeptidi lasten väestössä atopiseen dermatittiin liittyviä merkkejä ja oireita?
• Muuttaako glykomakropeptidi Staphylococcus-lajien kolonisaatiota atopisen dermatitin leesioissa lasten väestössä? Tutkimusväestö. 2–12-vuotiaat lapset, joilla on atopisen dermatitin diagnoosi, vahvistettu Hanifinin ja Rajkan kriteereillä ja luokiteltu lieväksi SCORAD-indeksin mukaan (<25 pistettä). Osallistujat jätetään pois, jos he ovat ikäalueen ulkopuolella, heillä on SCORAD-pisteet >25, heillä on samanaikaisia dermatoseja, historiaa yliherkkyydestä tai anafylaksista mihin tahansa hoitokomponentteihin, kyvyttömyys osallistua seurantakäynteihin tai noudattaa hoitoaikataulua tai mikä tahansa kliininen tila, jonka tutkija pitää sopimattomana.

Tietojen vahvistusmenettelyt toteutetaan tarkkuuden ja yhtenäisyyden varmistamiseksi. Tietokanta sisältää ennalta määritellyt säännöt alueille ja loogisille yhtenäisyystarkistuksille (esimerkiksi ikä 2–12 vuotta, SCORAD <25 sisällyttämisen yhteydessä). Tiedot, jotka ovat odotetun alueen ulkopuolella tai eivät ole yhdenmukaisia muiden kenttien kanssa, merkitään tarkistettaviksi ja korjataan tai peruutetaan tarvittaessa.

Rekrytointistrategia. Rekrytointi toteutetaan yhteistyössä paikallisten lastenlääketieteen, allergia- ja immunologian sekä dermatologian lääketieteellisten yhdistysten kanssa. Lisäksi seulontakampanjoita toteutetaan peruskouluissa mahdollisten osallistujien tunnistamiseksi, minkä jälkeen huoltajien suostumus keskustellaan.

Otoskoko ja interventiot. Yhteensä 20 kelvollista osallistujaa satunnaistetaan kahteen ryhmään:

1. Emollienttivoide glykomakropeptidilla.
2. Emollienttivoide ilman glykomakropeptidia (kontrolli). Molempia muotoja levitetään paikallisesti atopisen dermatitin leesioihin kahdesti päivässä 4 viikon ajan. Osallistujat osallistuvat viikoittaisiin seurantakäynteihin kliiniseen arviointiin ja SCORAD-arviointiin. Ensimmäisellä käynnillä suoritetaan pistotesti herkkyyden poissulkemiseksi voidekomponenteille. Lisäksi ihonäytteitä otetaan irtovetomenetelmällä alussa ja lopullisella käynnillä Staphylococcus-lajien kolonisaation määritystä varten.

Tutkimusmuuttujien tietosanakirja:

Tutkimuksen riippumattomat muuttujat sisältävät:

• Sukupuoli: Määritellään morfologisina eroina miehen ja naisen välillä. Se saadaan kliinisestä tiedosta ja luokitellaan mieheksi tai naiseksi.
• Ikä: Määritellään ajanjaksona syntymän ja tutkimukseen osallistumisen välillä. Se saadaan kliinisestä tiedosta ja ilmaistaan täysinä vuosina, odotetulla alueella 2–12 vuotta.

Tutkimuksen riippuvat muuttujat sisältävät:

• Atopisen dermatitin diagnoosi: Määritellään kroonisen ja toistuvan ihosairauden läsnäolona, vahvistettuna täyttämällä vähintään kolme pääkriteeriä ja kolme sivukriteeriä Hanifinin ja Rajkan kriteereistä. Luokitellaan läsnä olevaksi tai puuttuvaksi.
• Atopisen dermatitin vakavuus: Määritellään sairauden objektiivisina ja subjektiivisina kliinisinä ominaisuuksina, mitattuna SCORAD-indeksillä. Vakavuus luokitellaan lieväksi (<25), kohtalaiseksi (25–50) tai vaikeaksi (>50).
• Paheneminen: Määritellään oireiden lisääntymisenä tai toistumisena oireettoman jakson jälkeen, mitattuna myös SCORAD-indeksillä, ja luokitellaan lieväksi, kohtalaiseksi tai vaikeaksi samoilla raja-arvoilla.
• Remissiojakso: Määritellään atopisen dermatitin oireiden puuttumisen kestona. Sitä mitataan päivinä kliinisten arviointien perusteella.
• Pahenemisjakso: Määritellään oireiden pahenemisen kestona. Sitä mitataan päivinä kliinisten arviointien perusteella.
• S. aureus -kolonisaatio: Määritellään tämän opportunistisen grampositiivisen bakteerin läsnäolona ja määränä atopisen dermatitin leesioissa. Sitä mitataan ihon irtovetonäytteistä kulttuurin tai PCR:n avulla analysoituna, ilmaistuna S. aureus femA-geenin kopioina per ng kokonais-DNA:ta.
• Suhde S. aureus:sta S. epidermidikseen: Määritellään suhteena patogeenisen lajin ja ihon mikrobiston kommensaalisen lajin välillä. Sitä mitataan ihon irtovetonäytteistä kulttuurin tai PCR:n avulla analysoituna, ilmaistuna DNA femA-geenikopioiden suhteena (S. aureus/S. epidermidis).
• Pistotesti: Määritellään ihotestinä, joka altistaa mastosolut allergeeneille herkkyyden havaitsemiseksi. Se merkitään positiiviseksi, kun havaitaan 3 mm tai suurempi nousu negatiiviseen kontrolliin verrattuna, ja negatiiviseksi muuten.

Tietojen keruu. Laadunvarmistussuunnitelma toteutetaan kerättyjen tietojen tarkkuuden ja täydellisyyden varmistamiseksi. Lastenallergologi ja päätutkija valvovat protokollan noudattamista jokaisella osallistujalla kaikissa kliinisissä arvioinneissa, ja laboratoriomenettelyt suoritetaan standardoitujen protokollien mukaan.

Kaikki puuttuvat, saatavissa olemattomat tai tulkitsemattomat tiedot merkitään "puuttuviksi". Tietojen epäjohdonmukaisuudet tai odotetun alueen ulkopuoliset tulokset käsitellään myös puuttuvina. Ensisijainen analyysi käyttää saatavilla olevia tietoja ilman imputaatiota. Tietoja analysoidaan Prism GraphPad -ohjelmistolla soveltaen sopivia tilastollisia menetelmiä kiinnostuksen kohteena olevien muuttujien mukaan.

Kaikki tutkimustiedot ovat saatavilla eettisen toimikunnan tai ulkoisten tarkastajien tarkastettaviksi tarvittaessa.

Tietojen analysointi. Tilastollinen analyysi sisältää kuvailevan tilastotieteen osallistujien perusominaisuuksien yhteenvetoa, mukaan lukien keskiarvot, keskihajonnat, frekvenssit ja prosenttiosuudet tarpeen mukaan. Tutkimusryhmien välisiä vertailuja suoritetaan käyttäen khiin neliö -testejä. Jatkuvat muuttujat, mukaan lukien SCORAD-indeksin pisteet, bakteerikolonisaatio (S. aureus -kuorma ja S. aureus/S. epidermidis -suhde) ja kliiniset lopputulokset, kuten remissio- ja pahenemisjaksojen kesto, verrataan ryhmien välillä käyttäen Studentin t-testejä. Tilastollinen merkitsevyys asetetaan p < 0,05, ja analyysit suoritetaan Prism GraphPad -ohjelmistolla.

Loppuraportti ja levittäminen. Tulosten perusteella laaditaan lopullinen tutkimusraportti ja luonnostellaan tieteellinen käsikirjoitus mahdollista julkaisua varten.