生物学的、遺伝的、および体質的要因と非侵襲的モニタリングによる個人のがんリスク評価に関する研究 (PRO-ACTIVE)

この観察研究は、後ろ向き部分と前向き部分から構成されています。

後ろ向き部分では、2000年から2015年の間に手術を受けた乳腫瘍患者400名を選定します。その内訳は、遺伝性乳腫瘍患者200名と非遺伝性乳腫瘍患者200名で、以下の臨床的、形態学的、分子学的クラス特性（ルミナルAおよびB、トリプルネガティブ）を有し、ステージングが可能な症例です。

腫瘍組織は免疫細胞化学的検査に供され、以下のパラメータを研究します：血管新生（CD31）、線維芽細胞（CD34およびビメンチン）、マクロファージ（CD68）および腫瘍関連マクロファージ（M1: CD11c; M2: CD163）；形質細胞（CD138）、Tリンパ球（CD8）；肥満細胞（CD117）。

得られたデータは、予後および遺伝性乳癌発症リスクと相関解析されます。

一方、前向き部分では、最初にWP1でスクリーニングされる異なる患者コホートの登録を計画しています。

がん遺伝カウンセリングの文脈で生殖細胞系列遺伝子検査の候補となる、乳癌（N=200）、卵巣癌（N=200）、大腸癌（N=200）で知られる患者600名を評価します。患者は手術前に選定され、研究への参加に同意した場合、がん遺伝カウンセリングの文脈でインフォームド・コンセントに署名します。

選定された患者は、核酸（DNAおよびRNA）抽出のための採血（EDTA管に5 ml）を受けます。

生殖細胞系列遺伝子検査の結果に基づき、患者は3つのコホートに分類されます：

• コホート2A、遺伝性を有する対象（発端者）：検査対象600名（病理ごとに20名）のうち、約10%（N=60）の発端者の同定を見込んでいます。
• コホート2B、遺伝カウンセリングにより遺伝性腫瘍症候群の保因者リスクがあると特定されたが、遺伝子検査で証明されていない対象：各腫瘍タイプ20名ずつ、計60名の集団で、年齢と表現型の臨床特性がコホート2Aと類似しています。
• コホート2C、診断的遺伝子解析で陰性結果であった患者（N=150）のさらなるサブグループ（各腫瘍タイプ50名）。コホート2Cで選定された患者では、ルーチンの診断調査で見逃された原因遺伝子変異を同定するため、DNA/RNAが解析されます。

さらに、別の患者コホート、コホート3が選定されます。これは根治的手術治療を受ける250名の患者を含み、以下の特性を有します：

• 局所進行性乳癌で、トリプルネガティブ表現型または小葉組織型を有するもの（N=50）；
• 高悪性度漿液性卵巣癌（N=50）；
• ステージIII黒色腫（N=50）；
• ステージIIBおよびIIIA非小細胞肺癌（N=50）；
• リンパ節転移および血管侵襲を有する結腸癌（N=50）。

コホート2A、2B、および3に登録された患者は、WP2のために以下の採血を受けます：

• ctDNA分析のため、Cell-Free DNA BCT® CE管（Streck）に20 ml。サンプルは室温で10分間、1600（±150）gで遠心分離されます。遠心分離後、血漿はさらに10分間、3000（±150）gで遠心分離されます。
• CTC分離のため、Cell Save管に20 ml。
• 循環免疫集団の研究（WP3）のために30 ml。さらに、手術段階で採取された腫瘍組織は回収され、WP4および微小環境の研究のために、「次世代シーケンシング」技術を腫瘍全体および単一細胞レベル、ならびに免疫集団（TILs）に適用して解析されます。