Een studie naar biologische, genetische en constitutionele factoren en niet-invasieve monitoring om persoonlijke kankerrisico's te beoordelen (PRO-ACTIVE)

De observationele studie bestaat uit een retrospectief en een prospectief deel.

Voor het retrospectieve deel worden 400 patiënten met borsttumoren die tussen 2000 en 2015 zijn geopereerd geselecteerd, waarvan 200 met erfelijke borsttumoren en 200 met niet-erfelijke borsttumoren en met de volgende klinische, morfologische en moleculaire klassekenmerken (luminal A en B, triple negatief) en stapelbare stadiering.

Het tumorweefsel wordt onderworpen aan immunocytochemisch onderzoek om de volgende parameters te bestuderen: angiogenese (CD31), fibroblasten (CD34 en vimentine), macrofagen (CD68) en tumor-geassocieerde macrofagen (M1: CD11c; M2: CD163); plasmacellen (CD138), T-lymfocyten (CD8); mestcellen (CD117).

De gegevens worden gecorreleerd met de prognose en met het risico op het ontwikkelen van erfelijke borstkanker.

Het prospectieve deel voorziet daarentegen in de inclusie van verschillende cohorten patiënten die aanvankelijk in WP1 worden gescreend.

600 patiënten bekend met borstkanker (N=200), eierstokkanker (N=200) en colorectale kanker (N=200) die in aanmerking komen voor kiembaan genetisch testen in het kader van een oncogenetisch consult worden geëvalueerd. Patiënten worden voor de operatie geselecteerd en, als zij instemmen met deelname aan de studie, ondertekenen zij de geïnformeerde toestemming in een oncogenetisch consult.

De geselecteerde patiënten ondergaan bloedafname (5 ml in EDTA-buizen) voor de extractie van nucleïnezuren (DNA en RNA).

Op basis van het resultaat van kiembaan genetisch testen worden patiënten ingedeeld in 3 cohorten:

• COHORT 2A, personen met erfelijke overerving (probanden): de identificatie van ongeveer 10% (N=60) probanden uit 600 onderzochte personen (20 per pathologie) wordt verondersteld.
• COHORT 2B, personen geïdentificeerd door genetische counseling als risicodragers van een erfelijk neoplasmatisch syndroom, niet bewezen door genetische tests: een populatie van 60 personen, 20 per type tumor, met vergelijkbare klinische kenmerken van leeftijd en fenotype vergeleken met cohort 2A.
• COHORT 2C, een verdere subgroep patiënten (N=150), 50 per type tumor, negatieve resultaten in diagnostische genetische analyse. Bij geselecteerde patiënten in cohort 2C wordt DNA/RNA geanalyseerd voor de identificatie van causale genetische varianten in genen die de routinematige diagnostische onderzoeken zijn ontgaan.

Bovendien wordt een verder cohort patiënten geselecteerd, COHORT 3, dat 250 patiënten omvat die een radicale chirurgische behandeling ondergaan en met de volgende kenmerken:

• lokaal gevorderde borstkanker met triple negatief fenotype of met lobulaire histologie (N=50);
• hooggradig sereus ovariumcarcinoom (N=50);
• stadium III melanoom (N=50);
• stadium IIB en IIIA niet-kleincellig longcarcinoom (N=50);
• dikkedarmkanker met lymfeklierbetrokkenheid en vasculaire invasie (N=50).

Patiënten ingesloten in COHORTS 2A, 2B en 3 ondergaan de volgende bloedafnames voor WP2:

• 20 ml in Cell-Free DNA BCT® CE buizen (Streck) voor ctDNA-analyse. Monsters worden gecentrifugeerd bij 1600 (±150) g gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur. Na centrifugatie wordt het plasma onderworpen aan verdere centrifugatie gedurende 10 minuten bij 3000 (±150) g.
• 20 ml in Cell Save buizen voor de isolatie van CTC's.
• 30 ml voor de studie van circulerende immuunpopulaties (WP3). Bovendien wordt het tumorweefsel genomen tijdens de chirurgische fase verzameld en geanalyseerd in WP4 en voor de studie van de micro-omgeving met "Next Generation Sequencing" technieken toegepast op de tumor als geheel en op het niveau van individuele cellen en op de immuunpopulaties (TIL's).