En studie om biologiska, genetiska och konstitutionella faktorer samt icke-invasiv övervakning för att bedöma personliga cancerrisker (PRO-ACTIVE)

Den observationsstudien består av en retrospektiv och en prospektiv del.

För den retrospektiva delen kommer 400 patienter med brösttumörer opererade mellan 2000 och 2015 att väljas ut, varav 200 med ärftliga brösttumörer och 200 med icke-ärftliga brösttumörer och med följande kliniska, morfologiska och molekylära klasskarakteristika (luminal A och B, trippelnegativa) och jämförbara stadieringskriterier.

Tumörvävnaden kommer att undersökas med immunocytokemiska metoder för att studera följande parametrar: angiogenes (CD31), fibroblaster (CD34 och vimentin), makrofager (CD68) och tumörassocierade makrofager (M1: CD11c; M2: CD163); plasmaceller (CD138), T-lymfocyter (CD8); mastceller (CD117).

Data kommer att korreleras med prognosen och med risken för att utveckla ärftlig bröstcancer.

Den prospektiva delen förutser däremot inkludering av olika kohorter av patienter som initialt screenas i WP1.

600 patienter kända för bröstcancer (N=200), äggstockscancer (N=200) och tjocktarmscancer (N=200) som är kandidater för germinal genetisk testning i samband med en onkogenetisk konsultation kommer att utvärderas. Patienterna kommer att väljas ut före operation och, om de samtycker till att delta i studien, kommer de att underteckna informerat samtycke i en onkogenetisk konsultationskontext.

De utvalda patienterna kommer att genomgå blodprovstagning (5 ml i EDTA-rör) för extraktion av nukleinsyror (DNA och RNA).

Baserat på resultatet av den germinala genetiska testningen kommer patienterna att klassificeras i 3 kohorter:

• KOHORT 2A, individer med ärftlig belastning (probander): identifiering av cirka 10% (N=60) probander av 600 undersökta individer (20 per patologi) förutsätts.
• KOHORT 2B, individer identifierade genom genetisk rådgivning som löper risk att vara bärare av ett ärftligt neoplastiskt syndrom, ej bevisat genom genetiska tester: en population på 60 individer, 20 per tumörtyp, med liknande kliniska egenskaper avseende ålder och fenotyp jämfört med kohort 2A.
• KOHORT 2C, ytterligare en undergrupp av patienter (N=150), 50 per tumörtyp, med negativa resultat i diagnostisk genetisk analys. I utvalda patienter i kohort 2C kommer DNA/RNA att analyseras för identifiering av orsakande genetiska varianter i gener som har undgått rutinmässig diagnostisk undersökning.

Dessutom kommer ytterligare en kohort av patienter att väljas ut, KOHORT 3 som omfattar 250 patienter som genomgår radikal kirurgisk behandling och med följande egenskaper:

• lokalt avancerad bröstcancer med trippelnegativ fenotyp eller med lobulär histologi (N=50);
• höggradigt seröst äggstockscarcinom (N=50);
• stadium III-melanom (N=50);
• stadium IIB och IIIA icke-småcellig lungcancer (N=50);
• tjocktarmscancer med lymfkörtelinvolvering och vaskulär invasion (N=50).

Patienter inkluderade i KOHORTERNA 2A, 2B och 3 kommer att genomgå följande blodprovstagningar för WP2:

• 20 ml i Cell-Free DNA BCT® CE-rör (Streck) för ctDNA-analys. Proverna centrifugeras vid 1600 (±150) g i 10 minuter vid rumstemperatur. Efter centrifugation utsätts plasman för ytterligare centrifugation i 10 minuter vid 3000 (±150) g.
• 20 ml i Cell Save-rör för isolering av CTC.
• 30 ml för studier av cirkulerande immunpopulationer (WP3). Dessutom kommer tumörvävnaden som tas under den kirurgiska fasen att samlas in och analyseras i WP4 och för studier av mikromiljön med "Next Generation Sequencing"-tekniker applicerade på tumören som helhet och på encellnivå samt på immunpopulationerna (TIL).