생물학적, 유전적 및 체질적 요인과 비침습적 모니터링을 통한 개인별 암 위험 평가 연구 (PRO-ACTIVE)

이 관찰 연구는 회고적 부분과 전향적 부분으로 구성되어 있습니다.

회고적 부분에서는 2000년부터 2015년 사이에 수술을 받은 유방 종양 환자 400명이 선정될 예정이며, 이 중 200명은 유전성 유방 종양을 가진 환자이고, 나머지 200명은 비유전성 유방 종양을 가진 환자로서 다음과 같은 임상적, 형태학적 및 분자적 등급 특성(루미날 A 및 B, 삼중 음성) 및 스테이징이 가능한 특성을 가집니다.

종양 조직은 다음과 같은 매개변수를 연구하기 위해 면역세포화학적 조사를 받게 됩니다: 혈관신생(CD31), 섬유아세포(CD34 및 비멘틴), 대식세포(CD68) 및 종양 연관 대식세포(M1: CD11c; M2: CD163); 형질세포(CD138), T 림프구(CD8); 비만세포(CD117).

데이터는 예후 및 유전성 유방암 발병 위험과 상관관계를 분석할 것입니다.

반면, 전향적 부분은 WP1에서 초기 선별된 다양한 환자 코호트의 등록을 예상하고 있습니다.

유전자 검사를 위한 유전상담 맥락에서 유방암(N=200), 난소암(N=200), 대장암(N=200)으로 알려진 600명의 환자가 평가될 것입니다. 환자들은 수술 전에 선정되며, 연구 참여에 동의하는 경우 유전상담 맥락에서 동의서에 서명하게 됩니다.

선정된 환자는 핵산(DNA 및 RNA) 추출을 위해 혈액 샘플링(EDTA 튜브에 5 ml)을 받게 됩니다.

유전자 검사 결과에 따라 환자는 3개의 코호트로 분류됩니다:

• 코호트 2A, 유전성 유전을 가진 대상(프로밴드): 검사 대상 600명 중 약 10%(N=60)의 프로밴드(각 병리별 20명)가 확인될 것으로 가정합니다.
• 코호트 2B, 유전상담을 통해 유전성 종양 증후군 보인자 위험이 있는 것으로 확인되었으나 유전자 검사로 증명되지 않은 대상: 각 종양 유형별 20명씩 총 60명의 인구로, 코호트 2A와 비교하여 연령 및 표현형에서 유사한 임상적 특성을 가집니다.
• 코호트 2C, 진단적 유전자 분석에서 음성 결과를 보이는 추가 환자 하위 그룹(N=150), 각 종양 유형별 50명. 코호트 2C에 선정된 환자에서는 일상적인 진단 조사에서 누락된 유전자의 원인 유전자 변이를 확인하기 위해 DNA/RNA가 분석될 것입니다.

또한, 추가 환자 코호트가 선정될 예정이며, 코호트 3은 다음과 같은 특성을 가진 근치적 수술 치료를 받는 250명의 환자를 포함합니다:

• 삼중 음성 표현형 또는 소엽 조직학을 가진 국소 진행성 유방암(N=50);
• 고등급 장액성 난소암(N=50);
• 3기 흑색종(N=50);
• 2B기 및 3A기 비소세포폐암(N=50);
• 림프절 침범 및 혈관 침습을 동반한 대장암(N=50).

코호트 2A, 2B 및 3에 등록된 환자는 WP2를 위해 다음과 같은 혈액 채취를 받게 됩니다:

• ctDNA 분석을 위한 Cell-Free DNA BCT® CE 튜브(Streck)에 20 ml. 샘플은 상온에서 10분 동안 1600(±150) g으로 원심분리됩니다. 원심분리 후, 혈장은 3000(±150) g으로 10분 동안 추가 원심분리를 거칩니다.
• CTC 분리를 위한 Cell Save 튜브에 20 ml.
• 순환 면역 집단 연구(WP3)를 위해 30 ml. 또한, 수술 단계에서 채취된 종양 조직은 WP4 및 미세환경 연구를 위해 수집되고 분석될 것이며, "차세대 시퀀싱" 기술이 종양 전체 및 단일 세포 수준과 면역 집단(TILs)에 적용될 것입니다.