국부적인 Vulvodynia에서 Helicobacter Pylori 검색

파라핀 블록의 후속 섹션을 준비하고 수정된 Giemsa로 염색했습니다. H. pylori에 대한 면역 염색은 설명된 대로 수행되었습니다. 요컨대, 조직 절편을 크실렌에서 탈파라핀화하고 인산완충식염수(PBS)로 끝나는 감소하는 농도의 알코올을 통해 재수화하고 프로테이나제 K(8분)로 전처리했습니다. 절편을 3% 과산화수소로 켄칭하고, 실온에서 15분 동안 단백질 블록과 함께 인큐베이션하고, PBS로 세척하였다. 그런 다음 조직을 다클론 토끼 항-H pylori 항체(희석, 1:10; 클론 ch-20 429, DAKO, Carpinteria, CA)와 함께 배양했습니다. 마지막으로, 절편을 PBS(pH 7.4)의 0.05% 폴리소르베이트 20으로 세척하고 결합된 항체를 스트렙타비딘 및 발색원으로서 디아미노벤지딘을 포함하는 비오티닐화된 2차 항체를 사용하여 검출했습니다. 절편을 헤마톡실린으로 대조 염색하고, 탈수하고, 장착했습니다. 음성 대조군은 상기와 같이 처리된 절편이었지만, 1차 항체와 함께 인큐베이션하는 대신 PBS에서 1% 소혈청 알부민과 함께 인큐베이션되었다.

국부적인 외음부 동통이 없는 7명의 다른 여성의 외음부 생검은 건강한 대조군으로 사용되었습니다.

H. pylori 미생물의 면역조직화학적 염색을 위한 양성 및 음성 대조군 위 조직은 병리과의 기록보관소에서 입수하였다.