En søgning efter Helicobacter pylori i lokaliseret vulvodyni

Efterfølgende snit fra paraffinblokkene blev fremstillet og farvet med modificeret Giemsa. Immunfarvning for H. pylori blev udført som beskrevet. Kort sagt blev vævssnit afparaffineret i xylen, rehydreret gennem faldende koncentrationer af alkohol, der ender i phosphatpufret saltvand (PBS), og underkastet forbehandling med Proteinase K (8 minutter). Sektionerne blev standset med 3 % hydrogenperoxidase, inkuberet med proteinblok i 15 minutter ved stuetemperatur og vasket i PBS. Væv blev derefter inkuberet med polyklonalt kanin-anti-H pylori-antistof (fortynding, 1:10; klon ch-20 429, DAKO, Carpinteria, CA). Til sidst blev sektioner vasket i 0,05 % polysorbat 20 i PBS, pH 7,4, og det bundne antistof blev påvist ved anvendelse af streptavidin og biotinyleret sekundært antistof med diaminobenzidin som kromogen. Sektioner blev modfarvet med hæmatoxylin, dehydreret og monteret. Negative kontroller blev sektioner behandlet som ovenfor, men i stedet for inkubation med det primære antistof blev de inkuberet med 1% bovint serumalbumin i PBS.

Vulvarbiopsier af syv andre kvinder uden lokal vulvodyni fungerede som sunde kontroller.

De positive og negative kontrolmavevæv til den immunhistokemiske farvning af H. pylori-mikroorganismerne blev opnået fra arkiverne fra patologisk afdeling.