Uma busca por Helicobacter Pylori em vulvodínia localizada

As seções subsequentes dos blocos de parafina foram preparadas e coradas por Giemsa modificado. A imunocoloração para H. pylori foi realizada conforme descrito. Resumindo, os cortes de tecido foram desparafinizados em xileno, reidratados por meio de concentrações decrescentes de álcool terminando em solução salina tamponada com fosfato (PBS) e submetidos a pré-tratamento com Proteinase K (8 minutos). Os cortes foram extintos com peroxidase de hidrogênio a 3%, incubados com bloco de proteína por 15 minutos em temperatura ambiente e lavados em PBS. Os tecidos foram então incubados com anticorpo policlonal de coelho anti-H pylori (diluição, 1:10; clone ch-20 429, DAKO, Carpinteria, CA). Finalmente, os cortes foram lavados em polissorbato 20 a 0,05% em PBS, pH 7,4, e o anticorpo ligado foi detectado usando estreptavidina e anticorpo secundário biotinilado com diaminobenzidina como cromogênio. Os cortes foram contracorados com hematoxilina, desidratados e montados. Os controlos negativos foram secções tratadas como acima, mas em vez da incubação com o anticorpo primário, foram incubadas com albumina de soro bovino a 1% em PBS.

Biópsias vulvares de sete outras mulheres sem vulvodinia localizada serviram como controles saudáveis.

Os tecidos gástricos controle positivo e negativo para a coloração imuno-histoquímica dos microrganismos H. pylori foram obtidos dos arquivos do Departamento de Patologia.