당뇨병 발의 자가 내피 전구 세포 치료

연구 설계 이 연구는 중국 동부의 퉁지 대학 10인민 병원과 난징 1병원의 2개 센터에서 수행된 전향적 비무작위 시험이었습니다. 각 센터의 윤리위원회는 프로토콜을 승인했으며 모든 환자는 서면 동의서를 제공했습니다. 등록된 모든 환자는 CD133+ 세포 치료 그룹(CD133+ 그룹)과 자신의 의지에 따라 대조군으로 배정되었습니다. 이 연구는 PAD가 있는 당뇨병 환자에게 자가 CD133+ 세포의 동맥내 주입의 효능 및 면역 조절 영향을 평가하기 위한 것입니다.

환자 등록 및 분류 Rutherford 범주가 2~5인 18세 이상의 당뇨병 PAD 환자가 이 연구의 적격성을 평가하기 위해 포함되었습니다. 연구 참여에 동의한 모든 환자는 자가 CD133+ 전구 세포 치료를 받을지 여부를 자발적으로 선택할 수 있습니다.

이 연구에서는 CD133+ 세포를 사용하여 혈관신생을 자극하고 효율적인 미세혈관 혈액 공급을 재구성했습니다. 영향을 받은 사지의 대동맥하(장골 및 대퇴-슬와) 및 1개의 슬와하(전/후경골, 비골) 동맥의 내강내 재관류술에 실패한 후보는 연구에서 제외됩니다.

기타 배제 기준은 다음과 같다: ① 헤모글로빈 < 10 mg/dl, ② 크레아티닌 청소율 < 30 ml/min, ③ 과거 줄기세포/전구세포 치료 병력, ④ 중추신경계 질환으로 인한 마비, ⑤ 사고로 인한 절단 또는 골절 입국 후 외상으로 인한 과녁 사지, ⑥ 입국 후 항혈소판제 중단, ⑦ 입국 후 흡연 또는 재흡연, ⑧ 악성 종양.

대동맥하 및 슬와하동맥 병변의 치료 1차적으로 혈관 병변의 상태를 분석하기 위해 컴퓨터단층혈관조영술(Computed tomographic angiography, CTA)을 시행한 후, 대동맥하 및 슬와하동맥의 병변을 정확히 파악하기 위해 디지털감산혈관조영술(DSA)을 시행하였다. 치료 전 슬와 동맥.

대동맥 하부 동맥 병변의 치료는 TASC II 분류에 따른 병변의 등급에도 불구하고 내강 내 기술(풍선 확장 및/또는 스텐트 이식)으로 제한적으로 수행되었습니다. 반대쪽 대퇴동맥에 동맥초를 삽입한 후 전방접근법으로 표적지의 혈관재생술을 시행하였다.

이전 시술 후 슬와하 동맥의 병변을 DSA로 재평가하였다. 풍선 확장을 통해 앞/뒤 경골 및 비골 동맥 중 적어도 하나가 발에 명백한 직접적인 혈액 공급을 달성했습니다.

위 절차의 목표는 표적 사지의 정상적인 주 몸통 혈류역학적 상태를 완전히 회복시키는 것입니다.

자가 CD133+ 세포 수집 및 준비 대동맥 하부 및 슬와 하부 절차의 성공적인 재혈관화 후 환자의 대퇴 동맥초를 통해 말초 혈액 100ml를 수집하여 CD133+ 세포 분류 및 농축을 위해 화동 줄기 세포 은행으로 보냈습니다. Ficoll 분리 배지를 사용하여 밀도 구배 원심분리에 의해 단핵 세포를 전혈에서 분리한 다음 자기 활성화 세포 분류를 사용하여 CD133+ 세포를 선택합니다. 선별된 세포는 혈액백에 인간알부민과 헤파린나트륨이 함유된 염화나트륨주사액 50ml를 혼합한 후 다시 병원으로 보내어 4℃에 보관하였다. 모든 수집 및 준비 절차는 6시간 이내에 완료되었습니다.

선택된 세포는 또한 품질 테스트를 받아야 합니다. 그렇지 않으면 세포가 폐기되고 소스 환자가 연구에서 제외됩니다. 품질 기준은 다음과 같습니다: 세포 수 ≥ 1×107, 세포 현탁액에 눈에 보이는 침전물 없음, 생존 세포 ≥90%, 내독소 ≤ 2EU/ml 세포 주입 절차 카테터를 경골 고평부에서 표적 사지의 슬와 동맥에 삽입했습니다. 수준. CD133+ 세포 현탁액을 50ml 주사기에 넣고 카테터를 통해 주입 펌프 타이밍을 30분으로 설정하여 주입했습니다.

대조군의 경우 위약으로 카테터를 통해 인간 알부민과 헤파린 나트륨을 함유한 50ml 무세포 염화나트륨 주사액을 주입했습니다.

약물치료 및 생활습관 변화 두 그룹 모두 당뇨병, 고지혈증, 고혈압에 대해 전문의의 지시에 따라 지속적으로 약물치료를 받도록 하였다. 장용성 아스피린 100mg과 클로피도그렐 75mg을 매일 투여하는 항혈소판 치료와 동맥 플라크의 안정화를 위한 스타틴 투여도 요구했다.

이러한 약물 외에도 모든 지원자는 입장 후 금연을 제한적으로 요청 받았습니다.

후속 조치 및 종점 환자들은 18개월에 추적 조사되었습니다. 1차 종점은 궤양의 악화(새로운 궤양 또는 더 크거나 더 깊은 궤양 발생) 및 절단(중족골 수준 이상)으로 정의되었습니다. 궤양 치유 및 절단 상태를 매달 관찰하였다.

Rurtherford 분류의 변화, 발등의 TcPO2 및 ABI를 기록하여 6개월 및 18개월에 사지의 혈액 관류를 두 번째 종점으로 평가하였다.

입증된 바와 같이, 줄기 세포는 높은 수준의 혈관 내피 성장 인자(VEGF) [9]의 측분비에 의한 내피 세포 증식, 이동 및 생존의 자극을 통해 혈관신생을 촉진합니다. 재생 특성 외에도 줄기 세포는 면역 조절 능력을 가지고 있으며 일련의 상황에서 면역 억제 효과를 유발합니다[10]. 인간 줄기 세포는 활성화된 대식세포에서 인터루킨-6(IL-6) 발현을 억제하는 것으로 밝혀졌으며, 이는 상처 치유에서 염증 반응에 중요한 역할을 합니다[11]. 따라서, CD133+ 세포 주입 전 및 1, 2, 4주 후의 VEGF 및 IL-6의 혈청 농도를 테스트하여 절차 및 기간의 프로-혈관형성 및 면역조절 영향을 평가했습니다.