마른 체형, 과체중, 비만 성인의 단백질 섭취 후 근육 단백질 합성률

참가자는 하룻밤 금식 후 오전 7시에 실험실에 보고해야 합니다. 도착 시 테프론 카테터를 한쪽 팔의 전주정맥에 삽입하여 동맥 혈액 샘플링을 하고 기본 혈액 샘플을 채취합니다. 피험자의 팔뚝을 각 채혈 시점 이전 10분 동안 가열 담요(45°C)로 감싸 동맥화된 혈액 샘플을 얻습니다. 두 번째 테프론 카테터를 반대쪽 팔의 전주 정맥에 삽입하고 참가자는 L-[ring- 13C6]페닐알라닌(0.05 µmol∙kg∙min)(t=-240). 기본 및 연속 추적자 주입은 0.2μm 필터를 통과합니다. 1시간마다 혈액을 수집하고 흡수 후 측정을 위해 2% 자일로카인 국소 마취하에 5 mm Bergström 바늘(수동 흡인을 위해 수정됨)을 사용하여 t=-180 및 t=-15분에 외측광근의 생검을 수집합니다. 근육 단백질 합성 속도. 두 번째 생검(t=-15분)은 영양소 감지 및 근육 동화 신호에 관련된 인산화 및 총 단백질의 기준선 수준을 결정하는 데 사용될 것입니다. 그 후, 참가자들은 6온스의 신선한 갈은 센터 컷 돼지 허리를 섭취하게 됩니다. 이 부위는 지질 함량이 낮고(2.5-3%) 모양, 크기 및 구성이 균일하기 때문에 선택되었습니다. 섭취한 돼지고기와 함께 참가자들은 300mL의 물을 섭취하게 됩니다. 돼지고기의 페닐알라닌 함량 ~4%에 따라 추적자를 사용하여 물을 5%까지 농축합니다. 이 접근법은 동위 원소 정상 상태의 교란을 최소화하고 식후 근육 단백질 합성률 계산을 위한 적절한 조건을 제공하는 데 필요합니다. 돼지고기를 소비하는 데 필요한 시간이 기록됩니다. 돼지고기 식사와 물이 끝나면 식후 단계가 시작됩니다(t=0). 이 기간 동안 동맥화된 혈액 샘플은 t=30, 60, 90, 120, 180, 240 및 300분에 진공 냉각된 헤파린 처리된 튜브에 수집됩니다. 추가 근육 생검은 식후 근육 단백질 합성 및 근육 단백 동화 신호 단백질 반응의 측정을 위해 실험 주입의 t=120 및 300분에 수집될 것입니다. 근육 생검 샘플은 눈에 보이는 혈액, 지방 및 결합 조직에서 제거되고 액체 질소에서 급속 냉동되며 분석할 때까지 -80˚C에서 보관됩니다. 혈액 샘플은 10분 동안 4˚C에서 1,000×g로 원심분리되고 분리된 혈장은 2.0ml cryovials로 옮겨집니다. 혈장 샘플은 추가 분석이 있을 때까지 -20˚C에서 보관됩니다.