Muskelproteinsyntesehastigheder efter proteinforbrug hos magre, overvægtige og fede voksne

Deltagerne vil blive bedt om at melde sig til laboratoriet kl. 7:00 efter en natfaste. Ved ankomst vil et teflon-kateter blive indsat i en antecubital vene i den ene arm til arterialiseret blodprøvetagning, og en baseline-blodprøve vil blive udtaget. Arterialiserede blodprøver vil blive opnået ved at pakke forsøgspersonernes underarm ind i et varmetæppe (45 °C) i 10 minutter før hvert blodopsamlingstidspunkt. Et andet Teflon-kateter vil blive indsat i en antecubital vene i den modsatte arm, og deltagerne vil modtage en priming-dosis af L-[ring-13C6]phenylalanin (2,0 µmol∙kg) før påbegyndelse af en kontinuerlig infusion af L-[ring- 13C6]phenylalanin (0,05 µmol∙kg∙min) (t=-240). Den primære og kontinuerlige sporstofinfusion vil blive ført gennem et 0,2 μm filter. Blod vil blive opsamlet hver 1 time, og biopsier af vastus lateralis vil blive indsamlet ved t=-180 og t=-15 min ved hjælp af en 5 mm Bergström nål (modificeret til manuel sugning) under 2 % xylocain lokalbedøvelse til måling af postabsorptiv muskelproteinsyntesehastigheder. Den anden biopsi (t=-15 min) vil blive brugt til at bestemme baseline niveauer af phosphorylerede og totale proteiner involveret i næringsstofsansing og muskelanabolsk signalering. Efterfølgende vil deltagerne indtage 6 oz friskkværnet centerskåren svinekam. Denne udskæring af kød blev valgt på grund af dets lave lipidindhold (2,5-3%), og det er ensartet i form, størrelse og sammensætning. Sammen med det indtagede svinekød vil deltagerne indtage 300 ml vand. Vandet vil blive beriget til 5% med sporstof i henhold til phenylalaninindholdet på ~4% i svinekødet. Denne tilgang er nødvendig for at minimere forstyrrelser i isotopisk steady state og give passende betingelser for beregning af postprandiale muskelproteinsyntesehastigheder. Den tid, det tager at indtage svinekødet, vil blive registreret. Færdiggørelsen af ​​svinekød og vand vil markere starten på den postprandiale fase (t=0). I denne periode vil arterialiserede blodprøver blive opsamlet i evakuerede afkølede hepariniserede rør ved t=30, 60, 90, 120, 180, 240 og 300 min. Yderligere muskelbiopsier vil blive indsamlet ved t=120 og 300 minutter efter den eksperimentelle infusion til måling af postprandiale muskelproteinsyntetiske og muskelanabolske signalproteinresponser. Muskelbiopsiprøverne frigøres fra synligt blod, fedt og bindevæv, fryses hurtigt i flydende nitrogen og opbevares ved -80˚C indtil analyse. Blodprøver vil blive centrifugeret ved 1.000×g ved 4˚C i 10 minutter, og separeret plasma overføres til 2,0 ml kryoglas. Plasmaprøverne vil blive opbevaret ved -20˚C indtil videre analyse.