Muskelproteinsyntesehastigheter etter proteinforbruk hos magre, overvektige og overvektige voksne

Deltakerne vil bli bedt om å melde seg til laboratoriet kl. 07.00 etter faste over natten. Ved ankomst vil et teflon-kateter settes inn i en antecubital vene på den ene armen for arterialisert blodprøvetaking og en baseline-blodprøve vil bli tatt. Arterialiserte blodprøver vil bli tatt ved å pakke forsøkspersonens underarm inn i et varmeteppe (45 °C) i 10 minutter før hvert blodprøvetidspunkt. Et andre Teflon-kateter vil bli satt inn i en antecubital vene i den motsatte armen, og deltakerne vil motta en primingdose av L-[ring-13C6]fenylalanin (2,0 µmol∙kg) før de starter en kontinuerlig infusjon av L-[ring- 13C6]fenylalanin (0,05 µmol∙kg∙min) (t=-240). Den primære og kontinuerlige sporinfusjonen vil bli ført gjennom et 0,2 μm filter. Blod vil bli tatt hver 1 time og biopsier av vastus lateralis vil bli tatt ved t=-180 og t=-15 min ved bruk av en 5 mm Bergström nål (modifisert for manuell suging) under 2 % xylocain lokalbedøvelse for måling av postabsorptiv muskelproteinsyntesehastigheter. Den andre biopsien (t=-15 min) vil bli brukt til å bestemme baselinenivåer av fosforylerte og totale proteiner involvert i næringsstoffføling og muskelanabole signaler. Deretter vil deltakerne få i seg 6 oz ferskkvernet senterkuttet svinekam. Dette kjøttstykket ble valgt på grunn av dets lave lipidinnhold (2,5-3%) og det er ensartet i form, størrelse og sammensetning. Sammen med inntatt svinekjøtt, vil deltakerne konsumere 300 ml vann. Vannet vil bli beriket til 5 % med sporstoff i henhold til fenylalanininnholdet på ~4 % i svinekjøttet. Denne tilnærmingen er nødvendig for å minimere forstyrrelser i isotopisk steady state og gi passende forhold for beregning av postprandiale muskelproteinsyntesehastigheter. Tiden som kreves for å konsumere svinekjøttet vil bli registrert. Fullføringen av svinekjøttet og vannet vil markere starten på den postprandiale fasen (t=0). I løpet av denne perioden vil arterialiserte blodprøver samles inn i evakuerte avkjølte hepariniserte rør ved t=30, 60, 90, 120, 180, 240 og 300 min. Ytterligere muskelbiopsier vil bli samlet inn ved t=120 og 300 minutter etter den eksperimentelle infusjonen for måling av postprandiale muskelproteinsyntetiske og muskelanabole signalproteinresponser. Muskelbiopsiprøvene vil bli frigjort fra synlig blod, fett og bindevev, raskt frosset i flytende nitrogen og lagret ved -80˚C frem til analyse. Blodprøver vil bli sentrifugert ved 1000×g ved 4˚C i 10 minutter og separert plasma vil bli overført til 2,0 ml kryovials. Plasmaprøvene vil bli lagret ved -20˚C inntil videre analyse.