Isoform B보다 프로게스테론 수용체 Isoform A 수치가 더 높은 유방암 환자를 위한 미페프리스톤. (MIPRA)

가설

PR은 유방암 성장에 관여합니다. 항프로게스틴 미페프리스톤(MFP)은 PRA 발현이 높은 유선 암종에서 항종양 효과를 발휘합니다. 연구자들은 PRB보다 PRA 수치가 더 높은 유방암이 항프로게스틴 요법의 혜택을 받을 것이라는 가설을 세웠습니다.

대의 필기

이 연구의 목적은 PR(50% 이상) 및 PRB와 비교하여 1.5배 PRA를 발현하는 원발성 종양을 가진 20명의 유방암 환자를 선택하여 생검 코어와 생검 코어 사이의 14일 동안 미페프리스톤(MFP)을 사용한 선행 치료를 위해 선택하는 것입니다. 수술. 현 시점에서 표현된 일반적인 PR 동형에 따라 유방암 환자를 선택하는 연구는 없습니다. 이는 항프로게스틴이 효과가 없거나 심지어 PRB를 과발현하는 사람들을 자극할 수 있기 때문에 매우 중요합니다.

배경

유방암은 여성의 주요 사망 원인 중 하나입니다. 현재 내분비 치료는 에스트로겐 수용체(ER)를 표적으로 하거나 17-β-에스트라디올(E2)의 합성을 억제하는 것을 목표로 합니다. 인간 역학뿐만 아니라 실험 연구에서 얻은 새로운 증거는 유방암 성장에서 프로게스틴의 중요한 역할을 지적합니다.

두 PR isoform은 동일한 유전자에서 전사됩니다. PRB에는 933개의 아미노산이 있는 반면 PRA에는 처음 164개의 아미노산이 없습니다. 그들은 녹아웃 모델을 사용하여 입증된 바와 같이 생체 내에서 다른 역할을 합니다.

프로게스테론 길항제인 MFP는 PRB가 있을 때 작용제 역할을 할 수도 있습니다. 이러한 맥락에서 MFP에 묶인 PR은 공동 압박자가 아닌 공동 활성화자를 모집합니다. MFP는 또한 항글루코코르티코이드 효과를 발휘할 수 있습니다. 항프로게스틴으로서 자궁 성숙 및 자궁 내 태아 사망과 같은 다양한 산과 징후에 200mg/일 이상의 용량으로 사용되었습니다. 항글루코코르티코이드로서 우울증과 알츠하이머병을 포함한 다양한 정신 장애에 잠재적으로 사용할 수 있으며 최근 FDA는 쿠싱병 치료에 사용을 승인했습니다(매일 300mg).

유방암 치료의 항프로게스틴

환자의 항프로게스틴 요법을 평가하기 위한 첫 번째 임상 시험에서는 3차 연구를 위해 22명의 환자를 모집했습니다. 환자들은 1-3개월 동안 MFP, 200mg/일로 치료를 받았습니다. 3개월 치료 후 반응률은 18%였습니다. 장기 내성은 양호했다. 세 개의 다른 연구가 다섯 번째 연구의 미발표 결과와 함께 검토되었습니다. MFP를 사용한 유방암 치료에 대해 발표된 다른 임상 결과는 없습니다.

보다 최근에는 안티프로게스틴의 평가를 위한 4개의 임상 시험이 최근 시작되었습니다. ClinicalTrials.gov 식별자: NCT01138553, neoadjuvancy에서 MFP를 테스트하는 것은 모집의 어려움 때문에 중단되었고 lonaprisan을 테스트하는 NCT00555919, Schering은 예상되는 임상 반응의 부족으로 중단되었습니다. 텔라프리스톤을 테스트하는 NCT01800422와 오나프리스톤을 테스트하는 NCT02052128의 두 가지 다른 연구가 진행 중입니다.

전임상 연구에서의 항프로게스틴

다른 PR 이소형을 발현하는 쥐의 유방 암종과 다른 PR 비율을 나타내도록 조작된 실험적인 인간 유방암 모델을 사용하여 연구자들은 PRB 수준보다 높은 PRA 수준을 가진 종양만이 항프로게스틴 치료로 퇴행한다는 것을 입증했습니다. 더욱이, PRB보다 높은 수준의 PRA를 갖는 유방암 샘플은 MFP 치료에 생체 외에서 반응합니다.

연구 설계

등록: 조사관은 a) 임상적으로 유방암으로 진단되었고(생검에서 확인됨) b) 이 암의 치료를 위해 수술이 권장된 유방조영술 및 초음파 검사 연구를 통해 환자를 모집합니다. 환자는 Dr. Gass 및/또는 Dr. Liguori 또는 Dr. Paula Martínez-Vazquez와 인터뷰하고 연구에 동의했습니다. 원본 IC는 환자의 CRF에 보관되고 사본은 기본 연구 파일에 보관됩니다.

고유한 환자 식별자의 익명화 및 생성: 연구 샘플은 식별 코드로 익명화됩니다. Gass 박사와 Lanari 박사만이 코드에 액세스할 수 있습니다.

생검: IC에 서명하고 환자가 잠재적으로 임상 시험 후보인지 평가한 후 환자는 초음파 가이드에 따라 생검을 받게 됩니다. a) 최종 진단을 내리고, b) 웨스턴 블롯(WB)으로 PRA/PRB isoform 비율을 측정하고, c) 면역조직화학(IHC)으로 ER 및 PR을 측정하고 바이오마커 염색을 위해 파라핀 블록을 저장하기 위해 세 개의 바늘 코어를 얻습니다. d) 종양 전사체를 수행한다. 생검 코어는 분자 연구를 위해 -80°C에서 급속 냉동되고 나머지는 일상적인 병원 지침에 따라 진단 결정 및 PR IHC를 위해 10% 완충 포름알데히드에 고정됩니다.

혈액: 생검 당일(표준 병원 절차에 따라 40ml) 수집하여 다음과 같은 일상적인 접근 방식 외에 다른 연구를 수행하기 위해 보관합니다. a) MFP 측정 b) 순환하는 DNA/microRNA/종양 세포 정제. 이 절차는 수술 당일에 반복됩니다.

진단: 생검 후 72시간이 지나면 진단, PR WB 및 IHC PR 값을 사용할 수 있습니다. 환자가 자격이 있으면 14일 치료를 받을 준비가 된 것입니다. 모든 연구는 CRF에 기록됩니다.

치료: 14일 동안 하루에 한 번 MFP 200 mg p.o의 일반 정제. MFP는 Pharma web Canada의 국제 약국에서 수입됩니다. 유통기한은 2018년 7월입니다. 모든 의약품은 FDA 승인 시설(help@pharmawebcanada.com)에서 제조됩니다. 각각 99개 단위로 3개의 케이스를 구매할 예정입니다. 환자가 프로토콜을 입력하면 집에서 환자에게 약을 제공하는 담당자에게 14개의 알약이 제공됩니다(아르헨티나 당국의 요구 사항). 양식은 환자, 작업자 및 Dr. Gass가 서명하고 양식에 서명합니다. 환자 CRF에 보관.

진료소 통제: 치료 시작 후 1주일 후에 환자는 진료소 통제를 위해 병원으로 돌아갑니다. 참고: 모집 기간 연장으로 인해 유효 기간이 2019년 10월인 새로운 미페프리스톤 알약을 구입했습니다.

금기 사항:

• MFP 과민증.
• 만성 신부전.
• 천식.

부작용: 심각한 부작용은 예상되지 않습니다. 경미한 영향에는 메스꺼움, 구토, 낮은 수준의 무기력증이 포함될 수 있습니다. 프로토콜을 종료한 환자는 프로토콜 내부의 환자로 취급됩니다.

금기 요법: 여성이 다른 약물을 복용 중인 경우 주치의는 가능한 상호 작용을 사례별로 평가합니다. 환자는 필요한 경우 프로토콜에서 제외됩니다. 시험의 일부로 투여된 것과 다른 약물을 투여해야 할 필요성이 발생하는 경우 환자는 주치의에게 알리도록 지시받을 것입니다.

수술 전: 치료 전과 후의 이미지를 비교하기 위한 새로운 유방 촬영 사진 및 생태학(예상되는 차이 없음).

수술: 모든 유방암 환자를 위한 일상적인 병원 지침에 따름. 치료 개시 후 15일째에 시행한다. 면역조직화학적 염색(포르말린 고정)을 위해 조직을 수집하고 게놈/단백질 연구를 위해 -80°C에서 냉동 보관합니다. 앞에서 언급한 대로 혈액도 수집됩니다.

기술 절차

샘플 운송: 익명화된 냉동 샘플은 특수 운송 기업(Transportes Ambientales S.A)을 사용하여 드라이아이스에서 WB 연구를 위해 IBYME로 보내집니다. IBYME에서 보안 담당자가 도착을 기록하고 LCH 연구소로 이송합니다.

PR WB: 핵 추출물은 이전에 설명한 대로 수행되고 처리됩니다. T47D 세포는 양성 대조군으로 사용됩니다. Paola Rojas는 PRA/PRB 비율 결정을 담당하게 됩니다. 절차가 기록됩니다. 결과는 Dr.Liguori와 Dr. Gass에게 전송되며 그 사본은 CRF에 보관됩니다.

PR IHC: 5미크론 파라핀 내장 코어 조직은 FDA 승인 항체를 사용하여 표준 PR IHC 분석을 위해 처리되고 이전에 설명한 대로 정량화됩니다. 두 명의 병리학자(Dr. Gonzalez와 Dr. May, Dr. Molinolo가 감독함)이 IHC 염색을 정량화하고 점수를 매깁니다. 병리학자는 환자 CRF에 기록을 포함시킬 생검 후 72시간 후에 Liguori 박사에게 PR 점수를 알릴 것입니다.

환자 포함 결정: Dr Liguori는 WB 정보 및 PR IHC 정보 수집을 책임지고 Dr. Gass는 환자가 모든 포함 기준과 일치하기 때문에 프로토콜에 들어갈 수 있다는 데 동의해야 합니다. 서명된 양식이 환자 CRF에 포함됩니다.

바이오마커 평가: 1차 및 2차 종점에 대한 모든 분석은 환자 모집을 마친 후 분석됩니다. 핵 Ki-67 염색은 Goldhirsch et al., 2013에 따라 평가될 것이며 다른 바이오마커는 모집된 모든 환자의 생검 및 수술 점수를 비교하는 연구가 끝날 때 평가될 것입니다. 세포질, 핵 및 막 염색은 호르몬 수용체 및 Ki-67 이외의 바이오마커에 대해서도 고려됩니다. 두 병리학자 사이에 Ki-67 스코어링 차이가 10% 이상인 종양은 완전한 동의를 얻을 때까지 재평가됩니다. 차이가 10% 미만인 경우 평균 점수가 고려됩니다. 양성 반응이 보이면(생검과 수술 사이에 바이오마커 발현의 30% 변화) 조사관은 사용 가능한 게놈 플랫폼을 사용하여 샘플의 분자 분석을 시작합니다.

통계: 기술 통계는 피험자 기준선 특성, 치료 관리/순응도 등을 요약하는 데 사용됩니다. 데이터는 적절한 경우 그래픽으로도 표시됩니다. 등록된 모든 과목의 설명이 요약됩니다. 연구를 중단한 피험자의 수와 중단 이유를 표로 작성할 것입니다. 적격 기준을 충족하지 못한 피험자가 설명됩니다. 피험자 연령, 성별, 인종, 신장, 체중, ECOG 수행 상태, 악성 병력 및 병력과 같은 인구통계학적 및 기준선 특성이 요약됩니다. Wilcoxon 부호 순위 테스트는 바이오마커 발현의 변화를 비교하는 데 사용됩니다.

포함할 환자 수: 포함할 환자 수를 계산하기 위해 조사관은 유형 1 오류: 0.05 및 유형 2: 0.10, 검정력 0.8을 고정했습니다. 치료 없이 Ki-67 또는 세포사멸 지표에서 생검과 수술 사이에 차이가 등록되지 않아야 하고 Ki-67의 30% 감소를 긍정적인 결과로 간주해야 한다고 가정했습니다. 미공개 데이터에 따르면 환자의 37.3%가 PRA/PRB가 1.5보다 높은 것으로 나타나 올바른 수치를 충족하기 위해 WB에서 약 80개의 생검을 연구할 것임을 나타냅니다.

보험: Prudencia Seguros, # 00056924 병원 고용

규제 파일에 포함할 문서:

1. 아르헨티나 보건부 규정 Res 1480 ANMAT
2. ANMAT에 제시된 프로토콜의 마지막 버전(버전 3, 2015년 3월 16일)
3. Clinicaltrials.gov에서 승인한 버전
4. IC 모델
5. 참가자 이력서
6. IRB 승인 및 수정
7. 의약품 수입을 허용하는 ANMAT 양식
8. 앞에서 언급한 투약과 관련된 모든 형태
9. IRB 인증 관련 문서
10. 장비 교정 방법을 포함한 WB 및 IHC 관련 프로토콜
11. 모든 임상 실습과 관련된 SOP

전체 파일은 Institutional IRB 또는 MINCYT, COICET 또는 기타 관련 기관에서 검사할 수 있습니다. Gass 박사는 평가 위원회에서 요청한 모든 데이터를 제공할 책임이 있습니다.

참고: Dr M. Liguori는 2018년 8월 이후 더 이상 환자를 담당하지 않습니다. Hugo Gass 박사는 환자 모집, 생검 및 임상 평가를 담당하고 있습니다. 병리학자인 Marìa May 박사와 Pedro Gonzalez 박사는 더 이상 연구에 참여하지 않습니다. 그들은 Eunice Spengler와 Silvia Ines Vanzulli로 대체되었습니다.