호흡기 세포융합 바이러스의 방출 패턴

연구 설계 및 방법 이 연구의 주요 목적은 자연적으로 감염된 환자에서 RSV의 공기 중 방출 및 후속 표면 부담 패턴을 확인하고 결정하는 것입니다.

환자 정보:

응급실(ED)에서 보거나 호흡기 증상으로 병원에 입원하고 RSV 진단을 받은 환자는 등록할 수 있습니다. 호흡기 바이러스 패널(RVP)과 같은 일상적인 사내 실험실 진단 테스트 결과는 환자를 식별하는 데 사용됩니다.

환경:

Wake Forest Baptist Medical Center(WFBMC)는 885개의 병상을 갖춘 3차 진료 교육 병원입니다. 매년 약 36,000명의 입원 환자가 입원하고 89,000명 이상의 ED 방문(소아/성인)이 있습니다. 공기 샘플링은 약 20°C 온도 및 40% 상대 습도에서 난기류(시간당 총 6회의 공기 변화)가 있는 병실에서 수행됩니다. 공기는 최소 효율 보고 값이 15인 ANSI/ASHRAE 52.2 준수 엔드 필터로 필터링됩니다.

견본 추출:

하나의 비인두 면봉을 각 피험자로부터 얻을 것입니다. 샘플은 RSV 감염을 확인하고 개인이 보유한 병원체의 양을 결정하는 데 사용됩니다. 실시간 역전사효소 PCR(rRT-PCR) 분석을 위해 샘플을 Becton Dickinson Universal Viral Transport System(VTM, BD Diagnostics, Franklin Lakes, NJ)에 접종합니다.

일회성 공기 샘플은 6단계 Andersen 공기 샘플링 장치를 사용하여 3개 위치(환자 머리에서 2피트 떨어진 침대/의자 머리, 머리에서 8피트 떨어진 침대/의자 발, 출구)에서 침전판을 사용하여 수집됩니다. 병실의 (11):

샘플은 RNA 안정화 완충액(Qiagen AVL 완충액) 및 운반체 RNA가 보충된 바이러스 수송 배지(VTM)에서 수집한 다음 -80C에서 보관합니다. 운반체 RNA는 식물 담배 모자이크 바이러스의 게놈 RNA를 포함함으로써 운반체 및 내부 통제 역할을 모두 수행할 것입니다. 540 ul 부피의 RNA 샘플이 QIAmp Viral RNA Mini Extraction Kit로 정제되고 약 10배 농축됩니다. RSV 혈청형 A 및 B 뿐만 아니라 대조군 바이러스성 담배 모자이크 바이러스 RNA는 역전사 및 정량적 PCR에 의해 검출될 것이다. 또한 비인두 면봉은 RSV 특정 배지를 포함하는 페트리 접시에 접종하여 배양하는 데에도 사용할 수 있습니다.

RSV의 표면 부담은 3개의 공기 샘플링 위치에서 VTM으로 채워진 개방형 표준 페트리 접시를 배치하여 평가합니다. 페트리 접시의 덮개는 공기 샘플링 세션이 시작될 때 제거되고 종료된 후에 닫힙니다. 선택된 환경 표면은 VTM 또는 TSB 국물에 적신 멸균 면봉으로 샘플링됩니다. 2평방인치 영역은 매일 세 곳의 접촉이 많은 위치에서 한 번 닦습니다: 침대 핸드레일 머리, 음식 트레이 테이블 중앙, 방 뒤의 테이블/수평 표면(침대 발치에서 약 10피트 떨어져 있음) . 면봉은 30초 동안 와동되고 공기 샘플에서 RSV 검출에 대해 설명된 대로 처리됩니다.

샘플링 중에 의료 전문가(HCP)와 연구 직원은 호흡기(N-95)를 착용하여 잠재적인 RSV 보균자 상태로 인한 외부 오염 위험을 줄입니다. 호흡보호구를 수집하고 멸균 가위를 사용하여 호흡보호구의 2제곱인치 중앙부를 잘라냅니다. 잘라낸 부분을 2mL VTM 또는 TSB 국물에 넣고 얼립니다. 해동 후 샘플을 와동/교반하고 RSV 샘플에 대해 설명된 대로 추가 처리합니다.