RSウイルスの放出パターン

研究のデザインと方法 この研究の主な目的は、自然感染患者における RSV の空中放出とその後の表面負荷パターンを特定して決定することです。

患者情報:

救急部（ED）で見られるか、呼吸器症状で入院し、RSVと診断された患者は、登録の資格があります。 呼吸器ウイルスパネル（RVP）などの定期的な社内検査室診断テストの結果は、患者の特定に使用されます。

設定:

ウェイク フォレスト バプテスト メディカル センター (WFBMC) は、885 床の三次医療教育病院です。 年間約 36,000 件の入院患者と 89,000 件以上の ED 訪問があります (小児/成人)。 空気サンプリングは、約 20°C の温度と 40% の相対湿度で、乱気流 (1 時間あたり合計 6 回の換気) の下で病室で実施されます。 空気は ANSI/ASHRAE 52.2 準拠のエンドフィルターによってろ過され、最小効率レポート値は 15 です。

サンプリング：

各被験者から1つの鼻咽頭スワブが得られます。 サンプルは、RSV感染を確認し、個人が保有する病原体の量を決定するために使用されます。 リアルタイム逆転写酵素ＰＣＲ（ｒＲＴ－ＰＣＲ）分析のために、サンプルをベクトン・ディッキンソン・ユニバーサル・ウイルス輸送システム（ＶＴＭ、ＢＤ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、フランクリン・レイクス、ニュージャージー州）に接種する。

1回限りの空気サンプルは、6段階のアンダーセン空気サンプリング装置と沈降プレートを使用して、患者の頭から2フィート離れたベッド/椅子の頭、頭から8フィート離れたベッド/椅子の足、および出口の3か所で収集されます。病室 (11):

サンプルはウイルス輸送培地 (VTM) に収集され、RNA 安定化バッファー (Qiagen AVL バッファー) およびキャリア RNA が補充され、-80℃で保存されます。 キャリア RNA は、植物タバコ モザイク ウイルスのゲノム RNA を含むことにより、キャリアおよび内部コントロールの両方として機能します。 540 ul の RNA サンプルを QIAmp Viral RNA Mini Extraction Kit で精製し、約 10 倍に濃縮します。 RSV 血清型 A および B、ならびに対照のウイルス タバコ モザイク ウイルス RNA は、逆転写および定量的 PCR によって検出されます。 さらに、鼻咽頭スワブは、RSV 固有のメディアを含むペトリ皿に接種する培養にも使用できます。

RSV の表面負荷は、3 つの空気サンプリング位置で VTM で満たされたオープン標準ペトリ皿の配置によって評価されます。 ペトリ皿のカバーは、空気サンプリング セッションの開始時に削除され、終了後に閉じられます。 選択された環境表面は、VTM または TSB ブロスで湿らせた滅菌スワブでサンプリングされます。 2 平方インチの領域を 3 つの接触頻度の高い場所で毎日 1 回拭き取ります: ベッドの手すりの頭、食品トレイ テーブルの中央、部屋の後ろのテーブル/水平面 (ベッドの足から約 10 フィート離れた場所)。 . スワブを 30 秒間ボルテックスし、空気サンプル中の RSV 検出について説明したように処理します。

サンプリング中、医療専門家 (HCP) と研究スタッフは呼吸器 (N-95) を着用して、潜在的な RSV キャリア状態による外部汚染のリスクを軽減します。 人工呼吸器を回収し、滅菌はさみを使用して人工呼吸器の 2 平方インチの中央部分を切り取ります。 カットアウトを 2 mL の VTM または TSB ブイヨンに入れて冷凍します。 解凍後、サンプルをボルテックス/攪拌し、RSV サンプルで説明したようにさらに処理します。