呼吸道合胞病毒的排放模式

研究设计和方法 本研究的主要目的是识别和确定自然感染患者中 RSV 的空气传播和随后的表面负荷模式。

患者信息：

在急诊室 (ED) 就诊或因呼吸道症状入院并被诊断患有 RSV 的患者有资格入组。 常规内部实验室诊断测试的结果，例如呼吸道病毒面板 (RVP)，将用于识别患者。

环境：

维克森林浸信会医疗中心 (WFBMC) 是一家拥有 885 个床位的三级护理教学医院。 每年大约有 36,000 人次住院和 >89,000 人次急诊就诊（儿科/成人）。 空气采样是在大约 20°C 的温度和 40% 的相对湿度下，在湍流气流（每小时总共换气 6 次）下在病房中进行的。 空气由符合 ANSI/ASHRAE 52.2 标准的末端过滤器过滤，最低效率报告值为 15。

采样：

从每个受试者获得一根鼻咽拭子。 该样本将用于确认 RSV 感染并确定个体携带的病原体数量。 将样本接种到 Becton Dickinson 通用病毒转运系统（VTM，BD Diagnostics，Franklin Lakes，NJ）以进行实时逆转录酶 PCR（rRT-PCR）分析。

一次性空气样本将使用六级安徒生空气采样装置和沉降板在三个位置收集，床头/椅子距离患者头部两英尺，床脚/椅子距离头部八英尺，以及出口病房 (11):

样品将收集在病毒运输介质 (VTM) 中，补充 RNA 稳定缓冲液（Qiagen AVL 缓冲液）和载体 RNA，然后储存在 -80°C。 载体 RNA 通过包含植物烟草花叶病毒的基因组 RNA，将同时作为载体和内部对照。 使用 QIAmp 病毒 RNA 小量提取试剂盒纯化 540 ul 体积的 RNA 样品，并浓缩约 10 倍。 RSV 血清型 A 和 B 以及对照病毒烟草花叶病毒 RNA 将通过逆转录和定量 PCR 检测。 此外，鼻咽拭子也可用于在含有 RSV 特定培养基的培养皿中接种培养物。

RSV 的表面负荷将通过在三个空气采样点放置装有 VTM 的开放式标准培养皿进行评估。 培养皿的盖子将在空气采样会议开始时取下并关闭。 将使用蘸有 VTM 或 TSB 肉汤的无菌拭子对选定的环境表面进行取样。 每天在三个高接触位置擦拭一次两平方英寸的区域：床头扶手、食物托盘中间和房间后面的桌子/水平表面（距离床脚约 10 英尺） . 拭子将涡旋 30 秒，并按照空气样本中 RSV 检测的描述进行处理。

在采样期间，医疗保健专业人员 (HCP) 和研究人员将佩戴呼吸器 (N-95) 以降低由于潜在的 RSV 携带者状态而造成外部污染的风险。 将收集呼吸器并使用无菌剪刀将呼吸器的两平方英寸中间部分剪掉。 将切下的部分置于 2mL VTM 或 TSB 肉汤中并冷冻。 解冻后，样品被涡旋/搅动，并按照 RSV 样品的描述进行进一步处理。