섬유근육통과 올리브 오일

목표:

본 연구의 목표는 환자의 심혈관 위험 요인(혈액 응고 매개 변수, 혈소판 지수, 적혈구 수, 염증 표지자, 지질 프로필, 산화질소 및 코르티솔)에 대한 항산화 성분이 다른 두 가지 올리브 오일의 효과를 조사하는 것입니다. 섬유근육통 진단을 받았습니다. 조사관은 혈전증 관련 매개변수(피브리노겐 수치, 프로트롬빈 시간, 프로트롬빈 활성도, 두부 시간, 혈소판 수, 혈소판 분포 폭[PDW], 평균 혈소판 부피[MPV], 혈소판 수치, 적혈구[RBC] 수, 호중구- 림프구 대 림프구 비율[NLR] 및 혈소판 대 림프구 비율[PLR]), 염증 마커(인터루킨 6[IL-6], IL-10, C-반응성 단백질[CRP], 적혈구 침강 속도(ESR)) , 산화질소 수치, 지질 프로파일 및 코티솔 수치.

참가자들:

이 연구는 세계의사협회 헬싱키 선언문의 규정에 따라 수행될 것이다.

연구 그룹은 연구에 참여할 환자를 찾기 위해 스페인 섬유근육통 환자 협회인 AFIXA(스페인 Jaén의 섬유근육통 협회)에 연락할 예정입니다. 연구자들은 관심 있는 여러 데이터(나이, BMI, 기타 만성 질환, 임신, 수유 및 약물)를 얻기 위해 Jaén 대학(스페인)의 건강 과학 학부 실험실에서 환자를 소집할 것입니다. 이 데이터를 기반으로 연구자는 섬유 근육통 그룹을 선택합니다. 두 번째 실험실 방문에서 모든 환자는 정보에 입각한 동의서에 서명하고 혈액 샘플을 채취하여 몇 가지 설문지(Fibromyalgia Impact Questionnaire, Visual Analogic Scale, Short Form 12 Health Survey)를 작성합니다.

섬유근육통이 있는 여성은 이전에 전문 류마티스 전문의에 의해 섬유근육통 진단을 받았고 섬유근육통에 대한 미국 류마티스학회(ACR) 기준을 충족했습니다. 제외 기준은 다른 만성 질환(당뇨병, 고혈압, 류마티스 관절염, 간염, 암 또는 허혈성 심장 질환), 이상지질혈증, 임신, 수유 또는 등급 II 비만(BMI ≥ 35 kg/m2)의 존재입니다. 참가자 중 누구도 항응고제, 코르티코스테로이드, 에스트로겐, 진통제 또는 항염증제로 치료받지 않을 것이며 연구 시작 최소 2개월 전에 사용을 중단한 경우에만 포함됩니다. 아무도 정기적으로 술을 마시지 않을 것이며 모두 비흡연자일 것입니다. 모든 참가자는 앉아있을 것입니다.

연구 설계: 무작위, 통제, 이중 맹검 영양 실험이 수행됩니다. 시험은 항산화 성분이 다른 두 가지 유기농 올리브 오일 EVOO 또는 ROO 중 하나를 3주 동안 하루 50ml 소비하는 것으로 구성됩니다. 현재와 ​​같은 단기 영양 시험은 장기 시험과 관련하여 특정 이점을 제공할 수 있습니다. 환자가 다른 항산화제 섭취와 관련하여 더 엄격하고 통제된 식단을 고수할 수 있기 때문입니다. 이러한 방식으로 다른 항산화제의 가능한 간섭이 제한될 수 있으며, 환자의 생활 방식의 가능한 변화로 인한 간섭이 결과를 바꿀 수도 있습니다.

참가자는 EVOO와 ROO의 두 그룹 중 하나에 무작위로 배정됩니다. 3주간의 식이 시험을 시작하기 전에 참가자는 정기적으로 올리브 오일을 섭취하는 인구의 일부이기 때문에 ROO(2주 동안 매일 50ml)를 섭취하는 2주간의 휴약 기간을 실시합니다. 각 참가자의 생화학적 지표 및 임상 매개변수는 3주 치료 기간 전후에 결정됩니다.

유기농 올리브 오일은 Olifarma S.L. (그라나다, 스페인). 올리브 오일은 유사하게 포장되며 참가자들은 그들이 소비할 올리브 오일의 종류에 대해 눈이 멀게 됩니다. 참가자는 트리트먼트 올리브 오일을 생으로 섭취하지만 산화 방지제 섭취를 변경하지 않고 유지하기 위해 ROO를 요리에 사용합니다. 조사단은 온 가족이 사용할 수 있는 충분한 양의 요리용 ROO를 공급할 것입니다. 연구원은 시험 시작 시 3일(근무일 기준 2일 및 휴무일) 동안 완료할 24시간 리콜을 통해 참가자의 섭취량을 추정할 것입니다. 조사관은 3일 동안 얻은 값의 평균을 사용하여 참가자의 에너지 섭취량(kcal/일)과 다량 영양소 섭취량(탄수화물[g/일], 지질[g/일] 및 단백질[g/일]을 계산합니다. ]) 및 미량 영양소, 특히 비타민 C, 비타민 A, 구리, 아연 및 셀레늄을 포함하여 항산화 효과가 있을 수 있는 것들. 이 분석을 기반으로 조사관은 모든 참가자에게 개선해야 할 측면에 초점을 맞춘 식이 권장 사항을 제공합니다. 시험 시작 및 종료 시 참가자의 체중 데이터가 기록됩니다. 조사관은 참가자가 올리브 오일 소비를 통제하기 위해 실험이 끝날 때 모든 치료 올리브 오일 용기(소비된 용기와 소비되지 않은 용기)를 반환하도록 요청할 것입니다(즉, 각 참가자가 반환할 빈 용기와 가득 찬 용기의 수).

혈액 수집 및 혈액 샘플 준비: 하룻밤 금식 후 이른 아침에 정맥혈을 항응고제 및 항응고제가 없는 튜브가 있는 여러 튜브로 전주정맥에서 채취합니다. 항응고제가 없는 튜브의 혈액은 실온에서 30분 동안 응고될 수 있습니다. 항응고제 및 항응고제가 없는 튜브는 각각 혈장 및 혈청 샘플을 얻기 위해 4°C에서 5분 동안 3500rpm에서 원심분리됩니다. 혈액은 일주기 변화를 피하기 위해 항상 같은 시간에 채취됩니다. 혈전증 관련 매개변수(피브리노겐 수치, 프로트롬빈 시간, 프로트롬빈 활성도, 두부 시간, 혈소판 수, 혈소판 분포 폭[PDW], 평균 혈소판 부피[MPV], 혈소판 수치, 적혈구[RBC] 수, 호중구 대 림프구 비율 [NLR], 및 혈소판-림프구 비율[PLR]) 및 적혈구 침강 속도(ESR)를 혈장 샘플에서 측정하였다. 염증 마커(인터루킨 6[IL-6], IL-10, C-반응성 단백질[CRP]), 산화질소 수치, 지질 프로파일 및 코르티솔 수치를 혈청 샘플에서 측정했습니다.

참가자의 임상 특성: 조사관은 참가자의 인터뷰 및 설문지에서 인구 통계 및 임상 데이터를 얻습니다. 동일한 전문가가 연구 전반에 걸쳐 모든 측정 및 테스트를 수행합니다. 설문지는 채혈 후 즉시 완료됩니다. 연구자들은 스페인어 버전의 Fibromyalgia Impact Questionnaire(FIQ)를 사용하여 섬유근육통 환자의 일상 생활 활동에서 기능적 능력을 평가할 것입니다. 섬유근육통의 중증도를 추정하기 위해 연구자들이 가장 자주 사용하는 도구인 FIQ 점수의 범위는 0에서 100까지입니다. 자가 보고 근골격계 통증은 섬유근육통 환자에서 Visual Analogue Scale(VAS; 10cm)로 평가됩니다. 이 두 가지 도구 모두에서 높은 점수는 더 나쁜 증상을 반영합니다. 조사관은 스페인어 버전의 12개 항목 약식 건강 조사(SF-12)를 사용하여 환자 및 대조군의 신체적(물리적 구성요소 요약, PCS-12) 및 정신적(정신적 구성요소 요약, MCS-12) 건강 상태를 평가합니다. ). 점수 범위는 0에서 100까지이며 값이 낮을수록 건강 상태가 좋지 않음을 나타냅니다.

생화학 파라미터의 결정

산화질소(NO) 측정: 오존 화학발광 기반 방법을 사용하여 질산염/아질산염 및 S-니트로즈 화합물(NOx)을 측정하여 NO 생성을 간접적으로 정량화했습니다. 해동된 혈청 분취액을 NaOH 0.8N 및 ZnSO4 16% 용액으로 단백질을 제거했습니다. NOx의 총량은 Sievers Instruments의 퍼지 시스템, 모델 NOA 280i(GE Analytical Instruments, Colorado (CO), USA)를 사용하여 이전에 기술된 바와 같이(Rus et al., 2011) 결정될 것이다.

염증 마커의 결정: IL-6 수준은 Access Immunoassay Systems(Beckman Coulter)를 사용하는 화학발광 면역분석으로 결정됩니다. IL-10의 수준은 MLX™ 발광측정기(Dynex Technologies, Chantilly, VA)를 사용하는 화학발광 면역효소 검정에 의해 측정될 것입니다. CRP는 AU 5800 분석기(Beckman Coulter)를 사용하여 측정됩니다.

코르티솔 측정: 코르티솔 수치는 AxSYM 분석기(Abbott Laboratories, Illinois (IL), USA)를 사용하는 형광 편광 면역분석법에 의해 혈청 샘플에서 결정될 것입니다.

지질 프로필 결정: 혈청 지질 프로필(총 콜레스테롤, 고밀도 지단백[HDL]-콜레스테롤, 트리글리세리드, 아포지단백 A1 및 아포지단백 B)은 OLYMPUS AU 5400 분석기(Beckman Coulter)를 사용하여 분광광도계 절차로 측정됩니다. 저밀도 지단백질(LDL)-콜레스테롤 수치는 Friedewald 방정식으로 간접적으로 추정됩니다. 호모시스테인의 수준은 AxSYM 분석기(Abbott Laboratories)를 사용하는 형광 편광 면역분석으로 결정됩니다. 연구진은 산화 스트레스의 주요 지표인 지질 과산화의 좋은 지표인 티오바르비투르산 반응성 물질(TBARS)을 측정해 지질 과산화를 판단할 예정이다. TBARS는 제조업체의 권장사항(TBARS Assay Kit, OXItek, Catalog. 0801192).

혈전증 관련 매개변수의 결정: 혈액 응고 매개변수(피브리노겐 수준, 프로트롬빈 시간, 프로트롬빈 활성 및 세팔린 시간)는 BCS XP 분석기(Siemens Healthineers, Erlangen, Germany)를 사용하여 혈장 샘플에서 결정됩니다. 연구원들은 ADVIA 2120을 사용하여 유동 세포 계측법으로 혈장 샘플에서 혈소판 기능 결정 요인(혈소판 수, 혈소판 분포 폭[PDW] 및 평균 혈소판 부피[MPV]), 적혈구(RBC), 호중구 및 림프구 수를 측정할 예정입니다. 분석기(Siemens Healthineers, Erlangen, Germany).

샘플 크기 평가: Ene 3.0 소프트웨어(GlaxoSmithKline)를 사용하여 샘플 크기를 추정했습니다. 샘플 크기는 말론디알데히드의 수준을 기준으로 추정되었습니다(Gassió et al., 2008). 일방적 가설을 사용하여 제1종 오류 확률을 5%, β 위험을 0.10, 효과의 표준 편차를 1.4로 가정하면 연구의 분기당 10명의 환자, 즉 총 20명이 필요한 것으로 간주됩니다. 환자. 환자 손실의 10%를 가정하면 연구의 각 분기당 12명씩 최소 24명의 환자 표본 크기가 필요합니다.

통계 분석: 데이터의 통계 분석은 Windows용 통계 패키지 IBM SPSS Statistics 24(SPSS Inc, Chicago, IL)를 사용하여 수행됩니다. Kolmogorov-Smirnov 테스트와 Levenne 테스트를 각각 정규성과 동분산성을 테스트하기 위해 수행합니다.

사전 및 사후 측정 사이의 각 올리브 오일의 효과를 분석하기 위해 정규 분포와 분산의 동분산 원칙을 따르는 데이터를 양방향 ANOVA로 테스트했습니다. 평균 간의 차이를 비교하기 위해 짝이 없는 스튜던트 t-테스트를 ​​적용하여 통계적 유의성을 설정합니다. 정규 분포 또는 동분산 원칙을 따르지 않은 데이터는 양방향 ANOVA에 대한 비모수적 동등물인 Scheirer-Ray-Hare 테스트를 사용하여 테스트됩니다. Mann-Whitney U-test를 적용하여 평균 간의 차이를 비교하여 통계적 유의성을 설정합니다.

올리브 오일의 종류에 따른 영향을 분석하기 위해 모든 값을 델타 점수(즉, post-pre 값)로 변환한 후 정규성과 동질성에 기반한 unpaired Student's t test 또는 Mann-Whitney U-test로 테스트합니다. 데이터의.

효과 크기는 파라메트릭 테스트의 경우 Cohen's d를 사용하고 비모수 테스트의 경우 에타 제곱(η²)을 사용하여 계산됩니다. 0.2, 0.5 및 0.8의 Cohen's d 값은 효과 크기 해석의 고전적 Cohen 대역에 각각 소형, 중형 및 대형에 해당합니다. 0.02, 0.13 및 0.26의 η² 값은 각각 작은, 중간 및 큰 효과 크기에 해당합니다. 조사관은 통계적 유의 수준을 p < 0.05로 설정했습니다.