Fibromyalgie et huile d'olive

But:

L'objectif de la présente étude est d'étudier les effets de deux huiles d'olive à teneur différente en antioxydants sur les facteurs de risque cardiovasculaire (paramètres de la coagulation sanguine, indices plaquettaires, numération des globules rouges, marqueurs inflammatoires, profil lipidique, oxyde nitrique et cortisol) chez les patients. diagnostiqué avec la fibromyalgie. Les enquêteurs détermineront les paramètres liés à la thrombose (taux de fibrinogène, temps de prothrombine, activité de prothrombine, temps de céphaline, numération plaquettaire, largeur de distribution plaquettaire [PDW], volume plaquettaire moyen [MPV], plaquettrite, nombre de globules rouges [RBC], neutrophiles- rapport plaquette-lymphocytes [NLR] et rapport plaquettes-lymphocytes [PLR]), marqueurs inflammatoires (interleukine 6 [IL-6], IL-10, protéine C-réactive [CRP], vitesse de sédimentation érythrocytaire (VS)) , les niveaux d'oxyde nitrique, le profil lipidique et les niveaux de cortisol.

Intervenants :

Cette étude sera menée conformément aux dispositions de la Déclaration d'Helsinki de l'Association Médicale Mondiale.

Le groupe de recherche contactera une association espagnole de patients atteints de fibromyalgie, AFIXA (Association de la fibromyalgie de Jaén, Espagne) pour trouver des patients pour participer à l'étude. Les chercheurs convoqueront des patients dans le laboratoire de la Faculté des sciences de la santé de l'Université de Jaén (Espagne) pour obtenir plusieurs données d'intérêt (âge, IMC, autres maladies chroniques, grossesse, allaitement et médicaments). Sur la base de ces données, les enquêteurs sélectionneront le groupe fibromyalgie. Lors d'une deuxième visite au laboratoire, tous les patients signeront un formulaire de consentement éclairé, les échantillons de sang seront prélevés et ils rempliront plusieurs questionnaires (Fibromyalgia Impact Questionnaire, Visual Analogic Scale, Short Form 12 Health Survey).

Les femmes atteintes de fibromyalgie auront préalablement reçu un diagnostic de fibromyalgie par un rhumatologue professionnel et répondront aux critères de l'American College of Rheumatology (ACR) pour la fibromyalgie. Les critères d'exclusion seront la présence de toute autre maladie chronique (diabète sucré, hypertension, polyarthrite rhumatoïde, hépatite, cancer ou cardiopathie ischémique), dyslipidémie, grossesse, allaitement ou obésité de grade II (IMC ≥ 35 kg/m2). Aucun des participants ne sera traité avec des anticoagulants, des corticoïdes, des œstrogènes, des analgésiques ou des anti-inflammatoires, et ne sera inclus que s'il avait cessé de les utiliser au moins 2 mois avant le début de notre étude. Aucun ne consommera régulièrement de l'alcool et tous seront non-fumeurs. Tous les participants seront sédentaires.

Conception de l'étude : Un essai nutritionnel randomisé, contrôlé et en double aveugle sera réalisé. L'essai consistera en la consommation de 50 ml/jour de l'une des deux huiles d'olive biologiques à teneur différente en antioxydants, EVOO ou ROO, pendant 3 semaines. Un essai nutritionnel à court terme, tel que celui-ci, peut présenter certains avantages par rapport à un essai à long terme, car il permet aux patients d'adhérer à un régime alimentaire plus strict et mieux contrôlé par rapport à l'apport d'autres antioxydants. De cette façon, l'éventuelle interférence d'autres antioxydants peut être limitée, tout comme l'interférence d'éventuelles modifications du mode de vie des patients, qui pourraient également altérer les résultats.

Les participants seront assignés au hasard à l'un des deux groupes : EVOO et ROO. Avant de commencer l'essai diététique de 3 semaines, les participants effectueront une période de sevrage de 2 semaines au cours de laquelle ils ont consommé du ROO (50 ml par jour pendant 2 semaines) car ils font partie d'une population qui consomme régulièrement de l'huile d'olive. Les marqueurs biochimiques et les paramètres cliniques de chaque participant seront déterminés avant et après la période de traitement de 3 semaines.

Les huiles d'olive biologiques seront obtenues auprès d'Olifarma S.L. (Grenade, Espagne). Les huiles d'olive seront emballées de la même manière et les participants seront aveuglés quant au type d'huile d'olive qu'ils consommeront. Les participants consommeront l'huile d'olive de traitement crue mais utiliseront ROO pour la cuisson afin de maintenir leur ingestion d'antioxydants inchangée. Les enquêteurs fourniront des ROO pour cuisiner en quantité suffisante pour toute la famille. Les chercheurs estimeront l'apport des participants au moyen d'un rappel de 24 heures qu'ils effectueront pendant 3 jours (2 jours ouvrables et un jour de congé) au début de l'essai. Les enquêteurs utiliseront la moyenne des valeurs obtenues sur les 3 jours pour calculer l'apport énergétique des participants (kcals/jour) et l'apport en macronutriments (glucides [g/jour], lipides [g/jour] et protéines [g/jour ]) et des micronutriments, en particulier ceux qui peuvent avoir un effet antioxydant, notamment la vitamine C, la vitamine A, le cuivre, le zinc et le sélénium. Sur la base de cette analyse, les enquêteurs fourniront à tous les participants des recommandations diététiques, en se concentrant sur les aspects que chacun devrait améliorer. Les données du poids des participants au début et à la fin de l'essai seront enregistrées. Les enquêteurs demanderont aux participants de retourner tous les récipients d'huile d'olive de traitement (les récipients consommés et non consommés) à la fin de l'essai pour contrôler la consommation d'huile d'olive (c'est-à-dire un décompte des récipients vides et pleins que chaque participant restituera).

Prélèvement sanguin et préparation des échantillons de sang : Après une nuit de jeûne, le sang veineux sera prélevé tôt le matin de la veine antécubitale dans plusieurs tubes avec anticoagulant et tubes sans anticoagulant. Le sang des tubes sans anticoagulant sera autorisé à coaguler pendant 30 min à température ambiante. Les tubes anticoagulant et sans anticoagulant seront ensuite centrifugés à 3500 rpm pendant 5 min à 4°C pour obtenir respectivement des échantillons de plasma et de sérum. Le sang sera toujours prélevé au même moment de la journée pour éviter les variations circadiennes. Paramètres liés à la thrombose (taux de fibrinogène, temps de prothrombine, activité de prothrombine, temps de céphaline, numération plaquettaire, largeur de distribution plaquettaire [PDW], volume plaquettaire moyen [MPV], plaquettrite, numération érythrocytaire [RBC], rapport neutrophiles/lymphocytes) [NLR] et le rapport plaquettes/lymphocytes [PLR]) et la vitesse de sédimentation des érythrocytes (ESR) ont été déterminés dans des échantillons de plasma. Les marqueurs inflammatoires (interleukine 6 [IL-6], IL-10, protéine C-réactive [CRP]), les niveaux d'oxyde nitrique, le profil lipidique et les niveaux de cortisol ont été mesurés dans des échantillons de sérum.

Caractéristiques cliniques des participants : les enquêteurs obtiendront des données démographiques et cliniques à partir des entretiens et des questionnaires des participants. Le même spécialiste réalisera toutes les mesures et les tests tout au long de l'étude. Les questionnaires seront remplis immédiatement après le prélèvement sanguin. Les chercheurs évalueront la capacité fonctionnelle dans les activités de la vie quotidienne chez les patients atteints de fibromyalgie à l'aide de la version espagnole du questionnaire sur l'impact de la fibromyalgie (FIQ). Le score FIQ, qui est l'instrument le plus souvent utilisé par les chercheurs pour estimer la gravité de la fibromyalgie, varie de 0 à 100. La douleur musculo-squelettique autodéclarée sera évaluée chez les patients atteints de fibromyalgie par une échelle visuelle analogique (EVA ; 10 cm). Pour ces deux instruments, des scores plus élevés reflètent une symptomatologie moins bonne. Les enquêteurs évalueront l'état de santé physique (Physical Component Summary, PCS-12) et mental (Mental Component Summary, MCS-12) des patients et des témoins à l'aide de la version espagnole de l'enquête sur la santé en 12 points (SF-12 ). Les scores vont de 0 à 100, les valeurs les plus faibles reflétant un état de santé moins bon.

Détermination des paramètres biochimiques

Mesure de l'oxyde nitrique (NO) : la production de NO a été indirectement quantifiée en mesurant les composés nitrate/nitrite et S-nitrose (NOx) à l'aide d'une méthode basée sur la chimiluminescence à l'ozone. Les aliquotes de sérum décongelées ont été déprotéinisées avec des solutions de NaOH 0,8 N et de ZnSO4 à 16 %. La quantité totale de NOx sera déterminée comme décrit précédemment (Rus et al., 2011) en utilisant le système de purge de Sievers Instruments, modèle NOA 280i (GE Analytical Instruments, Colorado (CO), USA).

Détermination des marqueurs inflammatoires : Le niveau d'IL-6 sera déterminé par un dosage immunologique chimiluminescent à l'aide des systèmes d'immunoanalyse Access (Beckman Coulter). Les niveaux d'IL-10 seront mesurés par un dosage immunoenzymatique chimiluminescent à l'aide d'un luminomètre MLX™ (Dynex Technologies, Chantilly, VA). La CRP sera mesurée à l'aide d'un analyseur AU 5800 (Beckman Coulter).

Mesure du cortisol : le niveau de cortisol sera déterminé dans des échantillons de sérum par un dosage immunologique par polarisation de fluorescence à l'aide d'un analyseur AxSYM (Abbott Laboratories, Illinois (IL), États-Unis).

Détermination du profil lipidique : Le profil lipidique sérique (cholestérol total, lipoprotéines de haute densité [HDL]-cholestérol, triglycérides, apolipoprotéine A1 et apolipoprotéine B) sera mesuré par une procédure spectrophotométrique à l'aide d'un analyseur OLYMPUS AU 5400 (Beckman Coulter). Les niveaux de lipoprotéines de basse densité (LDL)-cholestérol seront estimés indirectement avec l'équation de Friedewald. Le niveau d'homocystéine sera déterminé par un dosage immunologique par polarisation de fluorescence à l'aide d'un analyseur AxSYM (Abbott Laboratories). Les chercheurs détermineront la peroxydation des lipides en mesurant les substances réactives à l'acide thiobarbiturique (TBARS), qui sont un bon indicateur de la peroxydation des lipides, un marqueur majeur du stress oxydatif. Les TBARS seront déterminés par spectrophotométrie dans des échantillons de plasma en suivant les recommandations du fabricant (TBARS Assay Kit, OXItek, Catalog. 0801192).

Détermination des paramètres liés à la thrombose : les paramètres de coagulation sanguine (taux de fibrinogène, temps de prothrombine, activité de prothrombine et temps de céphaline) seront déterminés dans des échantillons de plasma à l'aide de l'analyseur BCS XP (Siemens Healthineers, Erlangen, Allemagne). Les chercheurs mesureront les déterminants de la fonction plaquettaire (numération plaquettaire, largeur de distribution plaquettaire [PDW] et volume plaquettaire moyen [MPV]) et le nombre de globules rouges (RBC), de neutrophiles et de lymphocytes dans des échantillons de plasma par cytométrie en flux à l'aide de l'ADVIA 2120 analyseur (Siemens Healthineers, Erlangen, Allemagne).

Évaluation de la taille de l'échantillon : La taille de l'échantillon a été estimée à l'aide du logiciel Ene 3.0 (GlaxoSmithKline). La taille de l'échantillon a été estimée sur la base des niveaux de malondialdéhyde (Gassió et al., 2008). Avec une hypothèse unilatérale, en supposant une probabilité d'erreur de type I de 5%, un risque β de 0,10, avec un écart-type de l'effet de 1,4, 10 patients sont considérés comme nécessaires par branche de l'étude, soit un total de 20 les patients. Si l'on suppose 10 % de pertes de patients, une taille d'échantillon minimale de 24 patients, 12 pour chaque branche de l'étude, sera nécessaire.

Analyse statistique : L'analyse statistique des données sera effectuée à l'aide du progiciel statistique IBM SPSS Statistics 24 pour Windows (SPSS Inc, Chicago, IL). Le test de Kolmogorov-Smirnov et le test de Levenne seront effectués pour tester respectivement la normalité et l'homoscédasticité.

Pour analyser l'effet de chaque huile d'olive entre les mesures pré et post, les données qui suivaient une distribution normale et le principe d'homoscédasticité des variances ont été testés par une ANOVA à deux voies. La signification statistique sera établie en appliquant un test t de Student non apparié pour comparer les différences entre les moyennes. Les données qui n'ont pas suivi une distribution normale ou le principe d'homoscédasticité seront testées à l'aide du test de Scheirer-Ray-Hare, l'équivalent non paramétrique de l'ANOVA à deux facteurs. La signification statistique sera établie en appliquant le test U de Mann-Whitney pour comparer les différences entre les moyennes.

Pour analyser l'effet du type d'huile d'olive, toutes les valeurs seront converties en scores delta (c'est-à-dire, les valeurs post-pré) et ensuite seront testées par le test t de Student non apparié ou le test U de Mann-Whitney basé sur la normalité et l'homoscédasticité de données.

La taille de l'effet sera calculée à l'aide du d de Cohen pour les tests paramétriques et de l'êta au carré (η²) pour les tests non paramétriques. Les valeurs du d de Cohen de 0,2, 0,5 et 0,8 correspondent aux bandes d'interprétation classiques de Cohen de la taille de l'effet comme petite, moyenne et grande, respectivement. Les valeurs de η² de 0,02, 0,13 et 0,26 correspondent respectivement à une taille d'effet petite, moyenne et grande. Les enquêteurs ont fixé le niveau de signification statistique à p < 0,05.