Fibromialgia y Aceite de Oliva

Apuntar:

El objetivo del presente estudio es investigar los efectos de dos aceites de oliva con diferente contenido de antioxidantes sobre los factores de riesgo cardiovascular (parámetros de coagulación sanguínea, índices de plaquetas, recuento de glóbulos rojos, marcadores inflamatorios, perfil lipídico, óxido nítrico y cortisol) en pacientes diagnosticado con fibromialgia. Los investigadores determinarán los parámetros relacionados con la trombosis (niveles de fibrinógeno, tiempo de protrombina, actividad de protrombina, tiempo de cefalina, recuento de plaquetas, ancho de distribución de plaquetas [PDW], volumen plaquetario medio [MPV], plaquetcrit, recuento de glóbulos rojos [RBC], neutrófilos). proporción de linfocitos [NLR] y proporción de plaquetas a linfocitos [PLR]), marcadores inflamatorios (interleucina 6 [IL-6], IL-10, proteína C reactiva [CRP], tasa de sedimentación de eritrocitos [ESR]) , niveles de óxido nítrico, perfil de lípidos y niveles de cortisol.

Participantes:

Este estudio se realizará de acuerdo con lo establecido en la Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial.

El grupo de investigación se pondrá en contacto con una asociación española de pacientes con fibromialgia, AFIXA (Asociación de Fibromialgia de Jaén, España) para buscar pacientes que participen en el estudio. Los investigadores convocarán a pacientes en el laboratorio de la Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad de Jaén (España) para obtener varios datos de interés (edad, IMC, otras enfermedades crónicas, embarazo, lactancia y medicación). Con base en estos datos, los investigadores seleccionarán el grupo de fibromialgia. En una segunda visita al laboratorio, todos los pacientes firmarán un consentimiento informado, se tomarán muestras de sangre y se completarán varios cuestionarios (Fibromyalgia Impact Questionnaire, Visual Analogic Scale, Short Form 12 Health Survey).

Las mujeres con fibromialgia serán previamente diagnosticadas con fibromialgia por un reumatólogo profesional y cumplirán con los criterios del American College of Rheumatology (ACR) para la fibromialgia. Serán criterios de exclusión la presencia de cualquier otra enfermedad crónica (diabetes mellitus, hipertensión arterial, artritis reumatoide, hepatitis, cáncer o cardiopatía isquémica), dislipidemia, embarazo, lactancia u obesidad grado II (IMC ≥ 35 kg/m2). Ninguno de los participantes estará en tratamiento con anticoagulantes, corticoides, estrógenos, analgésicos o antiinflamatorios, y solo se incluirán si hubieran dejado de usarlos al menos 2 meses antes del inicio de nuestro estudio. Ninguno consumirá alcohol habitualmente, y todos serán no fumadores. Todos los participantes serán sedentarios.

Diseño del estudio: Se llevará a cabo un ensayo nutricional aleatorizado, controlado y doble ciego. La prueba consistirá en el consumo de 50 ml/día de uno de los dos aceites de oliva ecológicos con diferente contenido en antioxidantes, AOVE o ROO, durante 3 semanas. Un ensayo nutricional a corto plazo, como el presente, puede ofrecer ciertas ventajas respecto a un ensayo a largo plazo, ya que permite a los pacientes seguir una dieta más estricta y controlada en relación con la ingesta de otros antioxidantes. De esta forma, se puede limitar la posible interferencia de otros antioxidantes, así como la interferencia de posibles cambios en el estilo de vida de los pacientes, que también podrían alterar los resultados.

Los participantes serán asignados aleatoriamente a uno de los dos grupos: AOVE y ROO. Antes de comenzar la prueba dietética de 3 semanas, los participantes realizarán un período de lavado de 2 semanas durante el cual consumirán ROO (50 ml diarios durante 2 semanas) porque forman parte de una población que consume aceite de oliva con regularidad. Los marcadores bioquímicos y los parámetros clínicos de cada participante se determinarán antes y después del período de tratamiento de 3 semanas.

Los aceites de oliva ecológicos se obtendrán de Olifarma S.L. (Granada, España). Los aceites de oliva se empaquetarán de manera similar y los participantes no sabrán qué tipo de aceite de oliva consumirán. Los participantes consumirán el tratamiento de aceite de oliva crudo pero usarán ROO para cocinar para mantener su ingesta de antioxidantes sin cambios. Los investigadores suministrarán ROO para cocinar en cantidad suficiente para toda la familia. Los investigadores estimarán la ingesta de los participantes mediante un recordatorio de 24 horas que completarán durante 3 días (2 laborables y un día libre) al inicio del ensayo. Los investigadores utilizarán la media de los valores obtenidos durante los 3 días para calcular la ingesta energética (kcal/día) y la ingesta de macronutrientes (hidratos de carbono [g/día], lípidos [g/día] y proteínas [g/día) de los participantes. ]) y micronutrientes, especialmente aquellos que pueden tener un efecto antioxidante, como la vitamina C, la vitamina A, el cobre, el zinc y el selenio. En base a este análisis, los investigadores proporcionarán a todos los participantes recomendaciones dietéticas, centrándose en los aspectos que cada uno debe mejorar. Se registrarán los datos del peso de los participantes al inicio y al final de la prueba. Los investigadores solicitarán que los participantes devuelvan todos los envases de aceite de oliva de tratamiento (los envases consumidos y no consumidos) al final de la prueba para el control del consumo de aceite de oliva (es decir, un recuento de los envases vacíos y llenos que devolverá cada participante).

Recolección de sangre y preparación de muestras de sangre: Después del ayuno nocturno, se tomará sangre venosa temprano en la mañana de la vena antecubital en varios tubos con anticoagulante y tubos sin anticoagulante. La sangre de los tubos sin anticoagulante se dejará coagular durante 30 min a temperatura ambiente. A continuación, los tubos con anticoagulante y sin anticoagulante se centrifugarán a 3500 rpm durante 5 min a 4 °C para obtener muestras de plasma y suero, respectivamente. La extracción de sangre se realizará siempre a la misma hora del día para evitar variaciones circadianas. Parámetros relacionados con la trombosis (niveles de fibrinógeno, tiempo de protrombina, actividad de protrombina, tiempo de cefalina, recuento de plaquetas, ancho de distribución de plaquetas [PDW], volumen medio de plaquetas [MPV], plaquetas, recuento de glóbulos rojos [RBC], proporción de neutrófilos a linfocitos [NLR], y la proporción de plaquetas a linfocitos [PLR]) y la tasa de sedimentación de eritrocitos (ESR) se determinaron en muestras de plasma. Se midieron marcadores inflamatorios (interleucina 6 [IL-6], IL-10, proteína C reactiva [PCR]), niveles de óxido nítrico, perfil de lípidos y niveles de cortisol en muestras de suero.

Características Clínicas de los Participantes: Los investigadores obtendrán datos demográficos y clínicos de las entrevistas y cuestionarios de los participantes. El mismo especialista realizará todas las mediciones y pruebas a lo largo del estudio. Los cuestionarios se completarán inmediatamente después de la extracción de sangre. Los investigadores evaluarán la capacidad funcional en las actividades de la vida diaria en pacientes con fibromialgia utilizando la versión española del Fibromyalgia Impact Questionnaire (FIQ). La puntuación FIQ, que es el instrumento más utilizado por los investigadores para estimar la gravedad de la fibromialgia, varía de 0 a 100. El dolor musculoesquelético autoinformado se evaluará en pacientes con fibromialgia mediante una escala analógica visual (VAS; 10 cm). Para ambos instrumentos, las puntuaciones más altas reflejan una peor sintomatología. Los investigadores evaluarán el estado de salud física (Physical Component Summary, PCS-12) y mental (Mental Component Summary, MCS-12) de pacientes y controles utilizando la versión en español de la Encuesta de salud de formato corto de 12 ítems (SF-12). ). Las puntuaciones van de 0 a 100, y los valores más bajos reflejan un peor estado de salud.

Determinación de parámetros bioquímicos

Medición de óxido nítrico (NO): la producción de NO se cuantificó indirectamente mediante la medición de compuestos de nitrato/nitrito y S-nitrosa (NOx) utilizando un método basado en quimioluminiscencia de ozono. Las alícuotas de suero descongelado se desproteinizaron con soluciones de NaOH 0,8 N y ZnSO4 al 16%. La cantidad total de NOx se determinará como se describió anteriormente (Rus et al., 2011) utilizando el sistema de purga de Sievers Instruments, modelo NOA 280i (GE Analytical Instruments, Colorado (CO), EE. UU.).

Determinación de marcadores inflamatorios: el nivel de IL-6 se determinará mediante un inmunoensayo quimioluminiscente utilizando Access Immunoassay Systems (Beckman Coulter). Los niveles de IL-10 se medirán mediante un ensayo inmunoenzimático quimioluminiscente usando un luminómetro MLX™ (Dynex Technologies, Chantilly, VA). La PCR se medirá utilizando un analizador AU 5800 (Beckman Coulter).

Medición de cortisol: el nivel de cortisol se determinará en muestras de suero mediante un inmunoensayo de polarización de fluorescencia utilizando un analizador AxSYM (Abbott Laboratories, Illinois (IL), EE. UU.).

Determinación del perfil de lípidos: el perfil de lípidos en suero (colesterol total, colesterol de lipoproteínas de alta densidad [HDL], triglicéridos, apolipoproteína A1 y apolipoproteína B) se medirá mediante un procedimiento espectrofotométrico utilizando un analizador OLYMPUS AU 5400 (Beckman Coulter). Los niveles de colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL) se estimarán indirectamente con la ecuación de Friedewald. El nivel de homocisteína se determinará mediante un inmunoensayo de polarización de fluorescencia usando un analizador AxSYM (Abbott Laboratories). Los investigadores determinarán la peroxidación lipídica midiendo las sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS), que son un buen indicador de la peroxidación lipídica, un marcador importante del estrés oxidativo. TBARS se determinará espectrofotométricamente en muestras de plasma siguiendo las recomendaciones del fabricante (TBARS Assay Kit, OXItek, Catalog. 0801192).

Determinación de parámetros relacionados con trombosis: Se determinarán parámetros de coagulación sanguínea (niveles de fibrinógeno, tiempo de protrombina, actividad de protrombina y tiempo de cefalina) en muestras de plasma utilizando el analizador BCS XP (Siemens Healthineers, Erlangen, Alemania). Los investigadores medirán los determinantes de la función plaquetaria (recuento de plaquetas, ancho de distribución de plaquetas [PDW] y volumen plaquetario medio [MPV]), y recuentos de glóbulos rojos (RBC), neutrófilos y linfocitos en muestras de plasma mediante citometría de flujo utilizando el ADVIA 2120 analizador (Siemens Healthineers, Erlangen, Alemania).

Evaluación del tamaño de la muestra: El tamaño de la muestra se ha estimado utilizando el software Ene 3.0 (GlaxoSmithKline). El tamaño de la muestra se ha estimado en función de los niveles de malondialdehído (Gassió et al., 2008). Con una hipótesis unilateral, asumiendo una probabilidad de error tipo I del 5%, un riesgo β de 0,10, con una desviación estándar del efecto de 1,4, se consideran necesarios 10 pacientes por rama de estudio, es decir, un total de 20 pacientes Si se supone un 10% de pérdidas de pacientes, se necesitará un tamaño de muestra mínimo de 24 pacientes, 12 por cada rama del estudio.

Análisis estadístico: El análisis estadístico de los datos se realizará utilizando el paquete estadístico IBM SPSS Statistics 24 para Windows (SPSS Inc, Chicago, IL). Se realizará la prueba de Kolmogorov-Smirnov y la prueba de Levenne para probar la normalidad y la homocedasticidad, respectivamente.

Para analizar el efecto de cada aceite de oliva entre las medidas pre y post, los datos que siguieron una distribución normal y el principio de homocedasticidad de varianzas se probaron mediante un ANOVA de dos vías. La significancia estadística se establecerá aplicando una prueba t de Student para datos no apareados para comparar diferencias entre medias. Los datos que no siguieron una distribución normal o el principio de homocedasticidad se probarán mediante la prueba de Scheirer-Ray-Hare, el equivalente no paramétrico para ANOVA de dos vías. La significación estadística se establecerá aplicando la prueba U de Mann-Whitney para comparar diferencias entre medias.

Para analizar el efecto del tipo de aceite de oliva, todos los valores se convertirán en puntuaciones delta (es decir, valores post-pre) y luego se probarán mediante la prueba t de Student no pareada o la prueba U de Mann-Whitney basada en normalidad y homocedasticidad. de datos.

El tamaño del efecto se calculará utilizando la d de Cohen para pruebas paramétricas y la eta al cuadrado (η²) para pruebas no paramétricas. Los valores de d de Cohen de 0.2, 0.5 y 0.8 corresponden a las bandas clásicas de Cohen de interpretación del tamaño del efecto como pequeño, mediano y grande, respectivamente. Valores de η² de 0.02, 0.13 y 0.26 corresponden a tamaño del efecto pequeño, mediano y grande, respectivamente. Los investigadores establecieron el nivel de significación estadística en p < 0,05.