CPB 기간에 따른 DAMPs의 변화

심장 수술을 위해 수술실에 입원한 환자에 대해 표준 마취 모니터링 후 마취 유도 시 불안정한 혈역학이 예상될 수 있으므로 마취과 의사는 소량의 국소 마취제(2% 리도카인 1ml)로 요골 동맥에 동맥 캐뉼라를 시행했습니다. 이때 캐뉼라 삽입 후 도관의 공기를 제거하기 위해 혈액을 흡인하고 소량의 혈액(1-2ml)을 채취하여 EDTA(Ethylene Diamine Tetra acetic Acid di potassium) 혈액검사병(Pre-ANE)에 담는다. ).

마취는 정맥 마취제(propofol1-2mg/kg)와 속효성 오피오이드 진통제인 레미펜타닐(0.01-0.1mcg/kg/min)을 투여하여 수행됩니다. 그 후 신경근차단제와 흡입마취제(세보플루란)를 사용하여 마취를 유지한다. 마취방법은 양산부산대학교 마취통증의학과의 "심장마취 프로토콜"에 따라 동일하게 시행한다.

마취 후 심폐 바이패스를 사용하기 전에 환자의 기저 응고 상태를 결정하기 위해 활성 응고 시간(ACT)을 측정합니다. 이때 약 3ml의 동맥혈 시료가 필요하며, 추가로 1-2ml의 혈액을 채취하여 EDTA Bottle(Pre-CPB)에 보관합니다. 동맥과 정맥을 카테터 삽입한 후 CPB를 적용하면 환자의 상태를 모니터링하기 위해 30분마다 ABGA(동맥혈가스분석)를 시행한다. 이때 필요한 혈액량은 1ml 정도이며 추가로 1~2ml의 혈액을 채취하여 EDTA에 보관하며 CPB-30min, CPB-60min, CPB-90min 등으로 표기한다. 외과적 교정이 완료되면 CPB 이유식을 시행하고 CPB 이유식과 마취종료 사이에 ACT와 ABGA를 한번 더 시행한다. 이때 동맥혈 1~2ml를 추가로 채취하여 EDTA Bottle(Post-CPB)에 보관한다. 환자가 수술 후 중환자실에 입원하면 수술 다음날 1-2ml의 혈액을 추가로 채취하여 EDTA 병(Post-OP)에 보관합니다.

상기 방법으로 채혈한 혈액은 원심분리 및 저온처리를 거친다. 그 후 DNA(deoxyribonucleic acid)와 PMN(Polymorphonuclear) 호중구를 QIAmp DNA mini kit(QIAGEN, Germantown MD)를 사용하여 혈장에서 분리하고 RNA(ribonucleic acid) 정제를 통해 cDNA(complementary DNA)를 얻습니다. 정량 실시간 중합효소 연쇄 반응(qPCR)은 mtDNA(미토콘드리아 DNA) 및 IL(인터루킨)-6 유전자 발현을 통해 시간 경과에 따른 DAMP의 정량적 변화를 조사하는 데 사용됩니다.