Endringer i DAMPs i henhold til varigheten av CPB

Etter standard anestesiovervåking av pasienten som er innlagt på operasjonsstuen for hjertekirurgi, utførte anestesilegen arteriell kanylering på arteria radialis med liten mengde lokalbedøvelse (2 % lidokain 1ml) fordi det kan forventes ustabil hemodynamikk under anestesiinduksjon. På dette tidspunktet aspireres blodet for å fjerne luft fra kanalen etter kanylering, og små mengder blod (1-2ml) samles opp og plasseres i en EDTA (Ethylene Diamine Tetra eddiksyre di kalium) blodprøveflaske (Pre-ANE) ).

Anestesi utføres ved å gi et intravenøst ​​anestesimiddel (propofol1-2mg/kg) og et korttidsvirkende opioidanalgetikum, remifentanil (0,01-0,1mcg/kg/min). Etter det opprettholdes anestesi ved hjelp av en nevromuskulær blokker og et inhalasjonsbedøvelsesmiddel (sevofluran). Anestesimetoden utføres på samme måte i henhold til «cardiac anesthesia protocol» ved Institutt for anestesiologi og smertemedisin, Pusan ​​National University, Yangsan.

Etter anestesi måles den aktiverte koagulasjonstiden (ACT) for å bestemme pasientens basale koagulasjonsstatus før kardiopulmonal bypass tas i bruk. På dette tidspunktet kreves ca. 3 ml arteriell blodprøve, og ytterligere 1-2 ml blod samles opp og lagres i en EDTA-flaske (Pre-CPB). Etter kateterisering av arterie og vene, når CPB påføres, utføres ABGA (Arteriell blodgassanalyse) hvert 30. minutt for å overvåke pasientens tilstand. På dette tidspunktet er det nødvendige blodvolumet omtrent 1 ml, og ytterligere 1-2 ml blod samles og lagres i EDTA, og de er merket med CPB-30min, CPB-60min, CPB-90min, etc. Når kirurgisk korreksjon er fullført, utføres CPB-avvenning, og ACT og ABGA utføres en gang til mellom CPB-avvenning og slutten av anestesi. På dette tidspunktet samles ytterligere 1-2 ml arterielt blod opp og lagres i en EDTA-flaske (Post-CPB). Når en pasient ble innlagt på intensivavdelingen etter operasjonen, samles ytterligere 1-2 ml blod opp og lagres i EDTA-flasken (Post-OP) neste dag etter operasjonen.

Blodet samlet ved metoden ovenfor behandles ved sentrifugering og lavtemperaturbehandling. Deretter blir DNA (deoksyribonukleinsyre) og PMN (polymorfonukleære) nøytrofiler isolert fra plasma ved hjelp av QIAmp DNA minisett (QIAGEN, Germantown MD), og RNA (ribonukleinsyre) rensing for å få cDNA (komplementært DNA). Kvantitativ sanntids polymerasekjedereaksjon (qPCR) brukes til å undersøke kvantitative endringer i DAMPs over tid gjennom mtDNA (mitokondrielt DNA) og IL (interlukin)-6 genuttrykk.