Mudanças nos DAMPs de acordo com a duração da CEC

Após monitorização anestésica padrão do paciente admitido na sala de cirurgia para cirurgia cardíaca, o anestesiologista realizou canulação arterial na artéria radial com pequena quantidade de anestésico local (lidocaína a 2% 1ml), pois hemodinâmica instável pode ser esperada durante a indução anestésica. Neste momento, o sangue é aspirado para remover o ar do conduto após a canulação, e uma pequena quantidade de sangue (1-2ml) é coletada e colocada em um frasco de teste de sangue EDTA (Etileno Diamino Ácido Acético di Potássio) (Pré-ANE ).

A anestesia é realizada pela administração de um anestésico intravenoso (propofol1-2mg/kg) e um analgésico opioide de ação curta, remifentanil (0,01-0,1mcg/kg/min). A seguir, a anestesia é mantida com bloqueador neuromuscular e anestésico inalatório (sevoflurano). O método de anestesia é realizado da mesma forma de acordo com o "protocolo de anestesia cardíaca" do Departamento de Anestesiologia e Medicina da Dor, Pusan ​​National University, Yangsan.

Após a anestesia, o tempo de coagulação ativado (ACT) é medido para determinar o estado de coagulação basal do paciente antes do uso do bypass cardiopulmonar. Neste momento, cerca de 3 ml de amostra de sangue arterial são necessários, e 1-2 ml adicionais de sangue são coletados e armazenados em um Frasco de EDTA (Pré-CPB). Após a cateterização da artéria e da veia, quando a CEC é aplicada, a ABGA (gasometria arterial) é realizada a cada 30 minutos para monitorar a condição do paciente. Neste momento, o volume de sangue necessário é de cerca de 1ml, e 1-2ml adicionais de sangue são coletados e armazenados em EDTA, e são marcados com CPB-30min, CPB-60min, CPB-90min, etc. Concluída a correção cirúrgica, realiza-se o desmame da CEC e novamente ACT e ABGA entre o desmame da CEC e o término da anestesia. Neste momento, 1-2 ml adicionais de sangue arterial são coletados e armazenados em um Frasco de EDTA (Pós-CPB). Quando um paciente é internado na unidade de terapia intensiva após a cirurgia, 1-2ml adicionais de sangue são coletados e armazenados no frasco de EDTA (pós-operatório) no dia seguinte após a cirurgia.

O sangue coletado pelo método acima é processado por centrifugação e processamento a baixa temperatura. Depois disso, os neutrófilos de DNA (ácido desoxirribonucleico) e PMN (polimorfonucleares) são isolados do plasma usando mini kit QIAmp DNA (QIAGEN, Germantown MD) e purificação de RNA (ácido ribonucleico) para obtenção de cDNA (DNA complementar). A reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) é usada para investigar alterações quantitativas nos DAMPs ao longo do tempo através da expressão do gene mtDNA (DNA mitocondrial) e IL (interlucina)-6.