根据 CPB 持续时间的 DAMP 变化

对进入手术室接受心脏手术的患者进行标准麻醉监测后，由于麻醉诱导过程中血流动力学不稳定，麻醉师使用少量局麻药（2% 利多卡因 1ml）对桡动脉进行动脉插管。 此时，插管后抽吸血液以除去导管中的空气，并收集少量血液（1-2ml）并置于EDTA（乙二胺四乙酸二钾）血液测试瓶（Pre-ANE ).

麻醉通过静脉内麻醉剂 (propofol1-2mg/kg) 和短效阿片类镇痛剂瑞芬太尼 (0.01-0.1mcg/kg/min) 进行。 之后，使用神经肌肉阻滞剂和吸入麻醉剂（七氟醚）维持麻醉。 麻醉方法按照釜山国立大学梁山分校麻醉学与疼痛医学系《心脏麻醉方案》以同样方式进行。

麻醉后，测量活化凝血时间 (ACT) 以确定患者在使用体外循环之前的基础凝血状态。 此时需要采集约3ml的动脉血样，另外采集1-2ml的血液保存在EDTA瓶（Pre-CPB）中。 动脉和静脉插管后，应用CPB时，每30分钟进行一次ABGA（动脉血气分析）以监测患者的情况。 此时所需血量为1ml左右，另取1-2ml血液保存于EDTA中，分别标记为CPB-30min、CPB-60min、CPB-90min等。 当手术矫正完成后，进行 CPB 撤机，并在 CPB 撤机和麻醉结束之间再次进行 ACT 和 ABGA。 此时，额外收集 1-2 ml 动脉血并储存在 EDTA 瓶中（CPB 后）。 当患者在手术后进入重症监护病房时，会在手术后的第二天额外收集 1-2 毫升的血液并储存在 EDTA 瓶中（术后）。

将上述方法采集的血液进行离心和低温处理。 之后，使用 QIAmp DNA 迷你试剂盒（QIAGEN，Germantown MD）从血浆中分离 DNA（脱氧核糖核酸）和 PMN（多形核）中性粒细胞，并纯化 RNA（核糖核酸）以获得 cDNA（互补 DNA）。 定量实时聚合酶链反应 (qPCR) 用于通过 mtDNA（线粒体 DNA）和 IL（白细胞介素）-6 基因表达研究 DAMP 随时间的定量变化。