Changements dans les DAMP en fonction de la durée du CPB

Après une surveillance anesthésique standard du patient admis en salle d'opération pour une chirurgie cardiaque, l'anesthésiste a effectué une canulation artérielle sur l'artère radiale avec une petite quantité d'anesthésique local (2 % de lidocaïne 1 ml) car une hémodynamique instable peut être attendue lors de l'induction de l'anesthésie. À ce moment, le sang est aspiré pour éliminer l'air du conduit après canulation, et une petite quantité de sang (1-2 ml) est collectée et placée dans un flacon de test sanguin EDTA (acide éthylène diamine tétra acétique di potassium) (pré-ANE ).

L'anesthésie est réalisée en administrant un anesthésique intraveineux (propofol1-2mg/kg) et un analgésique opioïde à courte durée d'action, le rémifentanil (0,01-0,1mcg/kg/min). Après cela, l'anesthésie est maintenue à l'aide d'un bloqueur neuromusculaire et d'un anesthésique par inhalation (sévoflurane). La méthode d'anesthésie est réalisée de la même manière selon le "protocole d'anesthésie cardiaque" du Département d'anesthésiologie et de médecine de la douleur, Université nationale de Pusan, Yangsan.

Après l'anesthésie, le temps de coagulation activé (ACT) est mesuré pour déterminer l'état de coagulation basale du patient avant l'utilisation de la circulation extracorporelle. À ce moment, environ 3 ml d'échantillon de sang artériel sont nécessaires, et 1 à 2 ml supplémentaires de sang sont collectés et stockés dans une bouteille d'EDTA (pré-CPB). Après le cathétérisme de l'artère et de la veine, lorsque la CPB est appliquée, l'ABGA (analyse des gaz du sang artériel) est effectuée toutes les 30 minutes pour surveiller l'état du patient. À ce moment, le volume sanguin requis est d'environ 1 ml, et 1 à 2 ml supplémentaires de sang sont collectés et stockés dans de l'EDTA, et ils sont étiquetés avec CPB-30min, CPB-60min, CPB-90min, etc. Lorsque la correction chirurgicale est terminée, le sevrage CPB est effectué, et ACT et ABGA sont effectués une fois de plus entre le sevrage CPB et la fin de l'anesthésie. A ce moment, 1-2 ml supplémentaires de sang artériel sont collectés et stockés dans une bouteille EDTA (Post-CPB). Lorsqu'un patient est admis à l'unité de soins intensifs après l'opération, 1 à 2 ml de sang supplémentaire sont prélevés et stockés dans le flacon d'EDTA (post-opératoire) le lendemain de l'opération.

Le sang recueilli par le procédé ci-dessus est traité par centrifugation et traitement à basse température. Après cela, l'ADN (acide désoxyribonucléique) et les neutrophiles PMN (polymorphonucléaires) sont isolés du plasma à l'aide du mini kit QIAmp DNA (QIAGEN, Germantown MD) et de la purification de l'ARN (acide ribonucléique) pour obtenir de l'ADNc (ADN complémentaire). La réaction quantitative en chaîne par polymérase en temps réel (qPCR) est utilisée pour étudier les changements quantitatifs des DAMP au fil du temps grâce à l'expression des gènes de l'ADNmt (ADN mitochondrial) et de l'IL (interlukine)-6.