Förändringar i DAMPs enligt Duration av CPB

Efter standardanestesiövervakning av patienten som är inlagd på operationssalen för hjärtkirurgi utförde narkosläkaren arteriell kanylering på radialartären med liten mängd lokalbedövningsmedel (2 % lidokain 1ml) eftersom instabil hemodynamik kan förväntas vid anestesiinduktion. Vid denna tidpunkt aspireras blodet för att avlägsna luft från ledningen efter kanylering, och en liten mängd blod (1-2ml) samlas upp och placeras i en EDTA (Ethylene Diamine Tetra acetic Acid di kalium) blodprovsflaska (Pre-ANE) ).

Anestesi utförs genom att administrera ett intravenöst bedövningsmedel (propofol1-2mg/kg) och ett kortverkande opioidanalgetikum, remifentanil (0,01-0,1mcg/kg/min). Därefter upprätthålls anestesin med hjälp av en neuromuskulär blockerare och ett inhalationsbedövningsmedel (sevofluran). Anestesimetoden utförs på samma sätt enligt "cardiac anesthesia protocol" vid Institutionen för anestesiologi och smärtmedicin, Pusan ​​National University, Yangsan.

Efter anestesi mäts den aktiverade koaguleringstiden (ACT) för att fastställa patientens basala koaguleringsstatus innan kardiopulmonell bypass används. Vid denna tidpunkt krävs cirka 3 ml arteriellt blodprov, och ytterligare 1-2 ml blod samlas upp och förvaras i en EDTA-flaska (Pre-CPB). Efter kateterisering av artär och ven, när CPB appliceras, utförs ABGA (Arteriell blodgasanalys) var 30:e minut för att övervaka patientens tillstånd. Vid denna tidpunkt är den erforderliga blodvolymen cirka 1 ml, och ytterligare 1-2 ml blod samlas in och lagras i EDTA, och de är märkta med CPB-30min, CPB-60min, CPB-90min, etc. När kirurgisk korrigering är klar utförs CPB-avvänjning och ACT och ABGA utförs en gång till mellan CPB-avvänjning och slutet av anestesin. Vid denna tidpunkt samlas ytterligare 1-2 ml arteriellt blod upp och förvaras i en EDTA-flaska (Post-CPB). När en patient lades in på intensivvårdsavdelningen efter operationen samlas ytterligare 1-2 ml blod upp och förvaras i EDTA-flaskan (Post-OP) nästa dag efter operationen.

Blodet som samlas in med ovanstående metod behandlas genom centrifugering och lågtemperaturbehandling. Därefter isoleras DNA (deoxiribonukleinsyra) och PMN (polymorfonukleär) neutrofiler från plasma med hjälp av QIAmp DNA minikit (QIAGEN, Germantown MD) och RNA (ribonukleinsyra) rening för att få cDNA (komplementärt DNA). Kvantitativ realtidspolymeraskedjereaktion (qPCR) används för att undersöka kvantitativa förändringar i DAMPs över tid genom mtDNA (mitokondriellt DNA) och IL (interlukin)-6 genuttryck.