Cambios en los DAMP según la duración de la CEC

Después de la monitorización anestésica estándar del paciente que ingresa al quirófano para cirugía cardíaca, el anestesiólogo realizó la canulación arterial en la arteria radial con una pequeña cantidad de anestésico local (lidocaína al 2% 1 ml) porque se puede esperar una hemodinámica inestable durante la inducción de la anestesia. En este momento, la sangre se aspira para eliminar el aire del conducto después de la canulación, y se recolecta una pequeña cantidad de sangre (1-2 ml) y se coloca en una botella de análisis de sangre con EDTA (ácido etilendiamino tetraacético di potasio) (Pre-ANE). ).

La anestesia se realiza mediante la administración de un anestésico intravenoso (propofol 1-2 mg/kg) y un analgésico opioide de acción corta, remifentanilo (0,01-0,1 mcg/kg/min). Posteriormente se mantiene la anestesia mediante un bloqueador neuromuscular y un anestésico inhalatorio (sevoflurano). El método de anestesia se realiza de la misma manera de acuerdo con el "protocolo de anestesia cardíaca" del Departamento de Anestesiología y Medicina del Dolor de la Universidad Nacional de Pusan, Yangsan.

Después de la anestesia, se mide el tiempo de coagulación activado (ACT) para determinar el estado de coagulación basal del paciente antes de utilizar el bypass cardiopulmonar. En este momento, se requieren aproximadamente 3 ml de muestra de sangre arterial, y se recolectan y almacenan 1-2 ml adicionales de sangre en una botella de EDTA (Pre-CPB). Después del cateterismo de la arteria y la vena, cuando se aplica CPB, se realiza ABGA (análisis de gases en sangre arterial) cada 30 minutos para controlar el estado del paciente. En este momento, el volumen de sangre requerido es de aproximadamente 1 ml, y se recolectan y almacenan en EDTA 1-2 ml adicionales de sangre, y se etiquetan con CPB-30min, CPB-60min, CPB-90min, etc. Cuando se completa la corrección quirúrgica, se realiza el destete de la CEC y se vuelven a realizar ACT y ABGA entre el destete de la CEC y el final de la anestesia. En este momento, se recolectan 1-2 ml adicionales de sangre arterial y se almacenan en una botella de EDTA (Post-CPB). Cuando un paciente ingresa en la unidad de cuidados intensivos después de la cirugía, se recolectan 1-2 ml adicionales de sangre y se almacenan en la botella de EDTA (Post-OP) al día siguiente de la cirugía.

La sangre recogida por el método anterior se procesa mediante centrifugación y procesamiento a baja temperatura. Después de eso, los neutrófilos de ADN (ácido desoxirribonucleico) y PMN (polimorfonuclear) se aíslan del plasma utilizando el mini kit de ADN QIAmp (QIAGEN, Germantown MD) y la purificación de ARN (ácido ribonucleico) para obtener ADNc (ADN complementario). La reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qPCR) se utiliza para investigar los cambios cuantitativos en los DAMP a lo largo del tiempo a través de la expresión del gen mtDNA (ADN mitocondrial) e IL (interluquina)-6.