Ændringer i DAMP'er i henhold til varigheden af ​​CPB

Efter standard anæstesimonitorering af patienten, der er indlagt på operationsstuen til hjertekirurgi, udførte anæstesilægen arteriel kanylering på den radiale arterie med en lille mængde lokalbedøvelse (2 % lidokain 1 ml), fordi der kan forventes ustabil hæmodynamik under anæstesi-induktion. På dette tidspunkt aspireres blodet for at fjerne luft fra kanalen efter kanylering, og en lille mængde blod (1-2ml) opsamles og anbringes i en EDTA (Ethylen Diamine Tetra eddikesyre di kalium) blodprøveflaske (Pre-ANE) ).

Anæstesi udføres ved at administrere et intravenøst ​​anæstetikum (propofol1-2mg/kg) og et korttidsvirkende opioidanalgetikum, remifentanil (0,01-0,1mcg/kg/min). Derefter opretholdes anæstesien ved hjælp af en neuromuskulær blokker og et inhalationsbedøvelsesmiddel (sevofluran). Anæstesimetoden udføres på samme måde i henhold til "cardiac anesthesia protocol" fra Institut for Anæstesiologi og Smertemedicin, Pusan ​​National University, Yangsan.

Efter anæstesi måles den aktiverede koagulationstid (ACT) for at bestemme patientens basale koagulationsstatus, før kardiopulmonal bypass anvendes. På dette tidspunkt kræves der ca. 3 ml arteriel blodprøve, og yderligere 1-2 ml blod opsamles og opbevares i en EDTA-flaske (Pre-CPB). Efter kateterisering af arterie og vene, når CPB påføres, udføres ABGA (Arteriel blodgasanalyse) hvert 30. minut for at overvåge patientens tilstand. På dette tidspunkt er den nødvendige blodvolumen ca. 1 ml, og yderligere 1-2 ml blod opsamles og opbevares i EDTA, og de er mærket med CPB-30min, CPB-60min, CPB-90min osv. Når den kirurgiske korrektion er afsluttet, udføres CPB-fravænning, og ACT og ABGA udføres endnu en gang mellem CPB-fravænning og afslutningen af ​​anæstesien. På dette tidspunkt opsamles yderligere 1-2 ml arterielt blod og opbevares i en EDTA-flaske (Post-CPB). Når en patient blev indlagt på intensivafdelingen efter operationen, opsamles yderligere 1-2 ml blod og opbevares i EDTA-flasken (Post-OP) næste dag efter operationen.

Blodet opsamlet ved ovenstående metode behandles ved centrifugering og lavtemperaturbehandling. Derefter isoleres DNA (deoxyribonukleinsyre) og PMN (polymorfonukleære) neutrofiler fra plasma ved hjælp af QIAmp DNA minikit (QIAGEN, Germantown MD) og RNA (ribonukleinsyre) oprensning for at få cDNA (komplementært DNA). Kvantitativ realtidspolymerasekædereaktion (qPCR) bruges til at undersøge kvantitative ændringer i DAMP'er over tid gennem mtDNA (mitokondrielt DNA) og IL (interlukin)-6 genekspression.