새로 진단된 급성림프구성백혈병을 가진 청소년에서 메트포르민이 ABCB1과 AMPK 발현에 미치는 영향

급성 림프구성 백혈병은 소아 및 청소년에서 가장 흔한 암입니다. 지금까지 화학요법제 조합은 환자의 90% 이상에서 관해를 달성했습니다. 그러나 청소년은 어린이에 비해 예후가 좋지 않습니다.

다중 약물 내성 유전자는 다양한 암에서 내성을 유발하는 것으로 잘 알려져 있으며, 이들 유전자 중 가장 중요한 것은 ABCB 유전자군, 특히 ABCB1입니다. 이 저항성은 급성 림프구성 백혈병에서도 보고됩니다. 또한 AMPK(adenosine triphosphate) 유전자 발현의 변화는 세포 내 항종양 효과와 관련이 있습니다.

비구아나이드인 메트포르민은 AMPK 활성화에 의해 세포 내 ATP 수준을 감소시키고 ABCB1 유전자의 산물인 당단백질 P를 차단하는 것으로 나타났습니다. 많은 보고서에서 다양한 암 유형에 대한 메트포르민의 효과를 설명했습니다. 성인에서 메트포르민의 사용은 낮은 ABCB1/MDR1(다제 내성 1) 발현 및 높은 AMPK 발현과 관련하여 전체 및 사건 없는 생존을 개선하는 데 유용한 것으로 입증되었습니다.

연구자들은 메트포르민이 새로 진단된 급성 림프구성 백혈병을 가진 청소년의 관해 유도 단계 동안 ABCB1/MDR1 및 AMPK에 어떤 영향을 미치는지 제안합니다.

가설: 새로 진단된 급성 림프 구성 백혈병을 가진 멕시코 청소년의 관해 유도 동안 표준 화학 요법에 메트포르민을 추가하면 ABCB1 유전자의 mRNA(messenger ribonucleid acid) 발현 수준이 감소하고 AMPK 유전자 발현은 말기에 증가할 것입니다. 완화 유도.

이 연구는 새로 진단된 급성 림프 구성 백혈병을 가진 청소년의 관해 유도 동안 ABCB1 및 AMPK 유전자의 발현 변형에서 표준 화학 요법에 메트포르민을 추가하는 효과를 평가하는 척합니다.

또한 건강한 청소년과 급성 림프 구성 백혈병으로 진단받은 사람들의 ABCB1과 AMPK의 발현 수준을 설명합니다. 진단 시와 관해 유도 종료 시 해당 유전자의 발현 수준을 비교합니다. 그리고 이들 유전자의 초기 발현 및 메트포르민의 사용을 기반으로 전체 생존 및 사건 없는 생존을 비교합니다.

연구자들은 기존의 화학요법과 기존의 화학요법 + 메트포르민 1000mgm2SC/일을 받은 환자에서 새로 진단된 급성 림프 구성 백혈병을 가진 청소년의 ABCB1 및 AMPK 유전자 발현의 변형을 비교하기 위해 무작위 공개 임상 시험을 제안했습니다. 치료.

10세에서 21세 사이의 새로운 급성 림프 구성 백혈병 환자는 사전 동의를 받아 참여하도록 초대됩니다. 제외 기준에는 이전에 스테로이드 또는 기타 화학 요법을 사용한 환자 및 다운 증후군 환자가 포함됩니다.

조사관은 각 그룹에 대해 10명의 환자를 등록하는 것으로 가정합니다. 급성 림프 구성 백혈병의 형태 및 세포 계측 진단 확인 후 청소년은 환자 및 법적 권한을 부여받은 대리인이 서명한 정보에 입각한 동의서에 참여하도록 초대됩니다.

샘플은 말초 혈액의 단핵 세포에서 얻었고, 전체 RNA(리보뉴세이드 산)는 TRIzol®(Invitrogen(R) Life Technologies)에서 얻었습니다. 핵산의 완전성 및 순도는 분광광도계에 의해 결정됩니다. RNA는 필요할 때까지 -80ºC에서 동결됩니다. DNAc(complementary desoxyribonuclelic acid) 합성은 2마이크로그램의 RNA, 올리고뉴클레오티드, dNTPs, 버퍼, MgCl2, KCl(염화칼륨) 및 DTT(디티오트레이톨)를 첨가하여 최종 부피 20마이크로그램을 얻습니다. 혼합물을 37ºC에서 2분간 배양하고 1마이크로리터의 역전사효소를 넣고 37ºC에서 50분간 배양합니다. 유전자의 qRT-PCR(정량적 실시간 중합효소 연쇄 반응)은 유전자 발현 검정 TaqMan®을 사용하여 수행됩니다. 발현 수준은 2-delta-delta-Ct 방법을 사용하여 계산됩니다.

완화 유도 화학요법은 7일 동안의 프레드니손 60mgm2SCD의 스테로이드 전단계를 포함합니다. 적절한 완화 유도 단계는 0일부터 28일까지 매일 프레드니손 60mgm2로 구성됩니다. 0, 7, 14 및 21일에 빈크리스틴 1.5mgm2; 0, 7, 21일에 독소루비신 25mgm2; 2, 4, 6, 8, 10 및 12일에 L-아스파라기나제 10,000 Um2. 22, 25 및 29일에 에토포사이드 300mgm2 및 시타라빈 300mgm2. Intrathecal 화학 요법은 0, 7, 14 및 21 일에 시행됩니다. 관해 유도 계획 후 형태를 ​​평가하기 위해 골수 흡인을 시행하고, 림프구 모세포의 5% 미만이 보고되면 환자는 고용량의 메토트렉세이트와 6 메르캅토푸린으로 강화 단계를 계속하고 그 후 유지 단계를 끝까지 진행합니다. 프로토콜.

중간 변수는 0일의 말초 모세포 수, 14일의 골수 형태 검사 및 유도 종료 및 유도 종료 MRD(최소 잔류 질환)입니다.

메트포르민은 7일째부터 관해 유도 기간 종료 시까지 무작위 배정하여 1일 1000mgm2, 최대 850mg을 1일 3회 투여한다. 유전자 ABCB1 및 AMPK의 발현을 결정하기 위한 말초 혈액 샘플의 조달은 -7일째 및 관해 유도 종료시에 이루어질 것이다. 전체 생존 및 사건 없는 생존을 계산하기 위해 환자에 대한 후속 조치가 수행될 것입니다.