탈수초성 장애 진단을 위한 CSF 유리 카파 경쇄

다발성 경화증(MS)은 일반적으로 장애를 유발하는 중추신경계(CNS)의 탈수초성 질환입니다. 이는 젊은 성인에서 발견되는 가장 흔한 장애 신경계 질환이며, 20~40세 사이에 가장 일반적으로 나타납니다. 진단을 위해 현재 선호되는 임상 검사실 테스트는 등전점 전기영동(IEF)에 이어 면역블롯팅에 의해 뇌척수액(CSF)에서 올리고클론 밴드(OCB)를 검출하는 것입니다. 이 수동 기술은 쌍을 이룬 CSF 및 혈청 표본을 주관적인 시각적 해석과 함께 병렬로 실행해야 합니다. 다단계 방법은 노동 집약적이고 비용이 많이 들며 평균 분석 처리 시간은 3시간 이상입니다. 임상적으로 긍정적인 결과에 필요한 OCB 양의 표준 정의는 없습니다. 다양한 기관에서 다양한 접근 방식을 통해 양성은 1~4개의 고유한 CSF 밴드로 특징지어질 수 있으며, 이는 분석의 민감도와 특이성에 상당한 영향을 미칩니다. CSF에서 Kappa Free Light Chain(K-FLC)의 수준을 측정하는 것은 OCB의 정성적 평가에 대한 잠재적인 대안으로 제안되었습니다. 이 실험실 기반 검증 연구를 통해 실험실은 기술자의 시간을 줄이고 값비싼 IEF 키트를 제거하여 지출을 줄일 수 있습니다. 또한 K-FLC는 주관적 해석을 정량적 값으로 대체하여 OCB 테스트의 성능 및 주관적 해석과 관련된 문제를 극복합니다. 이 연구의 목적은 금본위제로 IEF를 통해 OCB에 대한 CSF에서 K-FLC의 진단 수율을 검증하고 결정하는 것입니다.

IEF를 통한 OCB는 다발성 경화증 또는 탈수초 장애가 의심되는 환자를 위해 화학 병리과에서 일상적으로 수행됩니다. 한 쌍의 환자 CSF 및 혈청 표본을 수집합니다. oligoclonal 밴드는 Interlab 진단 CSF IEF 키트 및 수동 면역 블로팅 단계를 사용하여 아가로즈 겔에서 IEF로 테스트하여 단백질을 전달 막으로 전달합니다. 혈청 샘플에 대한 동시 분석도 수행됩니다. CSF에서 oligoclonal 밴드의 패턴은 병리학자에 의해 검토되고 그들의 발견은 CSF OCB의 존재 또는 부재 또는 일치, 즉 혈청과 CSF 모두에 존재하는 밴드에 대해 양성 또는 음성으로 기록됩니다.

지난 6월부터 8월까지 IEF를 통해 OCBS에 대해 지난 3개월 동안 받은 샘플은 분석을 위해 안정적인 냉동 상태로 실험실에 저장됩니다. 제조업체의 지침에 따라 Freelite, The Binding Site의 키트를 사용하여 Beckman Immage-800 분석기에서 비탁법에 의한 분석을 위해 0.5 ml CSF 샘플을 사용합니다.

기밀성을 보장하기 위해 모든 식별 정보는 익명으로 처리되며 연구 식별자가 할당됩니다. 또한 모든 데이터는 PI에 의해 암호로 보호되는 전자 형식으로 저장됩니다.

단일 센터에서 예상되는 탈수초 장애의 낮은 빈도를 고려합니다. 통계 분석의 상당한 힘과 신뢰성을 달성하기 위해 K-FLC 분석을 위한 최소 샘플 크기 60개의 CSF 샘플이 3개 그룹으로 계층화되어 포함됩니다: 양성(n=20), 음성(n=20) 및 매칭(n =20), OCB의 경우.

데이터 분석은 SPSS 버전 25에서 수행됩니다. Shapiro Wilk 테스트는 데이터의 정규성을 확인하는 데 사용됩니다. CSF K-FLC의 진단 정확도는 OCB를 금본위제로 삼는 민감도, 특이도, PPV 및 NPV를 기반으로 계산됩니다. 추가 분석을 위해 OCB에 대해 ROC(수신기 동작 특성) 곡선이 그려지고 곡선 아래 영역(AUC)이 계산되고 Youden 지수를 사용하여 최적의 컷오프가 생성됩니다. CSF L-FLC와 IEF 간의 검증 합의를 위해 Cohen의 kappa 통계에 의해 평가됩니다.