脱髄性疾患の診断のためのCSFフリーカッパ軽鎖

多発性硬化症 (MS) は、一般に障害を引き起こす中枢神経系 (CNS) の脱髄疾患です。 これは若年成人に見られる最も一般的な身体障害を引き起こす神経疾患であり、最も一般的には 20 ～ 40 歳の間で発症します。 診断のための現在好ましい臨床検査は、等電点電気泳動 (IEF) とそれに続く免疫ブロッティングによる脳脊髄液 (CSF) 中のオリゴクローナル バンド (OCB) の検出です。 この手動技術では、CSF と血清のペアの検体を主観的な視覚的解釈で並行して実行する必要があります。 多段階の方法は多大な労力と費用がかかり、分析処理にかかる平均時間は 3 時間以上かかります。 臨床的に陽性の結果を得るために必要な OCB 量の標準的な定義はありません。 さまざまな機関によるさまざまなアプローチにより、陽性は 1 ～ 4 つの固有の CSF バンドによって特徴付けられ、それがアッセイの感度と特異性に大きく影響します。 CSF中のカッパフリー軽鎖（K-FLC）レベルの測定は、OCBの定性的評価に代わる可能性のある方法として提案されています。 この研究室ベースの検証研究により、研究室は技術者の時間を削減し、高価な IEF キットを排除することで支出を削減できます。 さらに、K-FLC は主観的な解釈を定量的な値に置き換え、OCB テストのパフォーマンスと主観的な解釈に関連する課題を克服します。 この研究の目的は、ゴールドスタンダードとしての IEF による OCB に対する CSF 中の K-FLC の診断収率を検証し、決定することです。

IEF を介した OCB は、MS または脱髄疾患の疑いのある患者に対して化学病理学部門で定期的に行われています。 患者のCSFおよび血清のペアの検体が収集されます。 オリゴクローナル バンドは、Interlab Diagnostics CSF IEF キットを使用したアガロースゲル上の IEF と、タンパク質を転写膜に転写するための手動免疫ブロッティング ステップによってテストされます。 血清サンプルも同時に分析します。 CSF中のオリゴクローナルバンドのパターンは病理学者によって検査され、その所見はCSF OCBの有無または一致、つまり血清とCSFの両方に存在するバンドの陽性または陰性として記録されます。

6 月から 8 月までの 3 か月間に IEF 経由で OCBS のために受け取ったサンプルは、分析のために安定した状態で研究室に冷凍保存されます。 ０．５ｍｌのＣＳＦサンプルは、製造業者の指示に従って、Ｆｒｅｅｌｉｔｅ、Ｔｈｅ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｓｉｔｅからのキットを使用するＢｅｃｋｍａｎ Ｉｍｍａｇｅ－８００分析装置での比濁法による分析に利用される。

機密性を確保するために、すべての識別情報は匿名化され、研究識別子が割り当てられます。 さらに、すべてのデータは、PI によってパスワードで保護された電子形式で保存されます。

単一施設における脱髄障害の予想頻度が低いことを念頭に置く。統計解析の強力な検出力と信頼性を達成するために、K-FLC 解析には最小サンプル サイズ 60 個の CSF サンプルが含まれ、陽性 (n=20)、陰性 (n=20)、一致 (n) の 3 つのグループに層別化されます。 =20)、OCB の場合。

データ分析は SPSS バージョン 25 で行われます。 Shapiro Wilk テストはデータの正規性をチェックするために使用されます。 CSF K-FLC の診断精度は、OCB をゴールドスタンダードとして、感度、特異度、PPV および NPV に基づいて計算されます。 さらに分析するために、受信者動作特性 (ROC) 曲線が OCB に対してプロットされ、曲線下面積 (AUC) が計算され、Youden の指数を使用して最適なカットオフが生成されます。 CSF L-FLC と IEF 間の検証合意については、コーエンのカッパ統計によって評価されます。