用于脱髓鞘疾病诊断的 CSF 游离 Kappa 轻链

多发性硬化症 (MS) 是一种中枢神经系统 (CNS) 脱髓鞘疾病，通常会导致残疾。 它是年轻人中最常见的致残性神经系统疾病，最常见于 20 至 40 岁之间。 目前用于诊断的首选临床实验室测试是通过等电聚焦电泳 (IEF) 随后进行免疫印迹检测脑脊液 (CSF) 中的寡克隆带 (OCB)。 这种手动技术需要配对的 CSF 和血清标本平行运行，并带有主观视觉解释。 多步法劳动密集且成本高，平均分析处理时间超过 3 小时。 临床阳性结果所需的 OCB 量没有标准定义。 由于不同机构采用不同的方法，阳性可以用 1 到 4 个独特的 CSF 条带来表征，这会显着影响检测的灵敏度和特异性。 测量 CSF 中 Kappa 游离轻链 (K-FLC) 的水平已被提议作为 OCB 定性评估的潜在替代方法。 这种基于实验室的验证研究将允许实验室通过减少技术人员的时间和消除昂贵的 IEF 套件来削减开支。 此外，K-FLC 将用定量值代替主观解释，克服与 OCB 测试的性能和主观解释相关的挑战。 本研究的目的是通过 IEF 作为金标准验证和确定 CSF 中 K-FLC 对 OCB 的诊断率。

通过 IEF 进行的 OCB 通常在化学病理科对疑似 MS 或脱髓鞘疾病的患者进行。 收集成对的患者 CSF 和血清样本。 使用 Interlab 诊断 CSF IEF 试剂盒和手动免疫印迹步骤在琼脂糖凝胶上通过 IEF 测试寡克隆带，以将蛋白质转移到转移膜上。 还对血清样本进行了同步分析。 CSF 中的寡克隆条带模式由病理学家审查，他们的发现被标记为阳性或阴性 CSF OCB 的存在或不存在或匹配，即血清和 CSF 中均存在条带。

从 6 月到 8 月的最后 3 个月内通过 IEF 为 OCBS 收到的样本在实验室中冷冻保存，稳定用于分析。 根据制造商的说明，0.5 ml CSF 样品将用于使用来自结合位点 Freelite 的试剂盒在 Beckman Immage-800 分析仪上通过比浊法进行分析。

为确保机密性，所有身份详细信息都将匿名化，并分配研究标识符。 此外，PI 将以受密码保护的电子格式存储所有数据。

关注单个中心发生脱髓鞘疾病的预期频率较低；为了实现统计分析的显着功效和可靠性，用于 K-FLC 分析的最小样本量为 60 个 CSF 样本，将分为 3 组：阳性（n=20）、阴性（n=20）和匹配（n =20)，对于 OCB。

数据分析将在 SPSS 25 版上完成。 Shapiro Wilk 测试将用于检查数据的正态性。 CSF K-FLC的诊断准确率将以OCB为金标准，根据敏感性、特异性、PPV和NPV进行计算。 为了进一步分析，将为 OCB 绘制接受者操作特征 (ROC) 曲线，计算曲线下面积 (AUC)，并使用 Youden 指数生成最佳截止值。 对于 CSF L-FLC 和 IEF 之间的验证协议，将通过 Cohen 的 kappa 统计进行评估。