치주염에서 GCF Annexin-A1, Carbonic Anhydrase-1 및 Elongation Factor-1 감마 수준

치주 질환 및 상태의 진단은 치주 및 임플란트 주위 질환 및 상태 분류에 관한 2017 세계 워크숍에서 제안한 방사선 및 임상 진단 기준에 따라 배열되었습니다. 3기 B급 전신 치주염 환자 20명, 3기 C급 전신 치주염 환자 20명, 치은염 환자 19명 및 치주적으로 건강한 지원자가 이 연구에 포함되었습니다.

건강한 치주염 대상자의 임상 치주 검사는 플라크 지수(PI), 프로빙 포켓 깊이(PPD), 임상 부착 수준(CAL) 및 프로빙 시 출혈(BOP)로 구성되었습니다. CAL은 PPD 값에 GR을 더하여 계산했습니다. 전체 구강 PPD, CAL 및 BOP가 있는 부위의 백분율에 대한 평균을 각 피험자에 대해 계산했습니다. 단일 보정 검사관(VO)이 모든 참가자의 전체 구강 치주 검사를 수행했습니다. 측정은 Williams periodontal probe (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA)를 사용하여 수행되었습니다. 모든 측정은 각 치아에 대해 전체 구강 및 4개 부위(mesio-buccal, mid-buccal, distobuccal 및 mid-lingual)에서 수행되었습니다. 임상 측정 전에 5명의 환자를 대상으로 PPD와 CAL 값을 1일 간격으로 2회 측정하여 검사자 내 보정을 수행한 결과 클래스 내 상관 계수는 PD의 경우 0.92, CAL의 경우 0.90이었습니다.

단일 뿌리 치아에서 인접하지 않은 두 치간 부위의 협측면에서 GCF 샘플을 채취했습니다. 치주염 그룹에서 GCF는 단일 뿌리 치아의 가장 깊은 두 개의 주머니에서 샘플링되었습니다. 치은염 그룹에서 눈에 띄는 염증 징후가 있는 부위와 건강한 그룹에서 BOP가 없는 부위에서 샘플을 채취했습니다. 선택한 부위는 멸균 큐렛을 사용하여 치은연상 플라크를 조심스럽게 제거하고 면봉으로 분리하고 오염을 피하기 위해 약간 공기 건조했습니다.

표준화된 여과지 스트립(PerioPaper, Proflow, Amityville, NY)을 GCF 샘플링에 사용했습니다. 멸균 종이 스트립을 약간의 저항이 느껴질 때까지 잇몸 열구 또는 치은 주머니에 부드럽게 삽입하고 30초 동안 그대로 두었습니다. 기계적 자극을 피하고 혈액으로 시각적으로 오염된 스트립을 폐기했습니다. 사전 보정된 전자 장치는 흡수된 유체 부피를 측정했습니다(Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). 판독값은 표준 곡선을 참조하여 실제 부피(마이크로리터, μL)로 변환되었습니다. 종이 스트립을 개별적으로 멸균 폴리프로필렌 튜브에 넣고 추가 분석을 위해 -80ºC에 보관했습니다.

Annexin-A1 수준은 ELISA 방법(Bioscience SRB, 카탈로그 번호: 201-12-3158)을 사용하여 시판되는 키트로 연구되었습니다. 광학 밀도는 450nm의 파장(Tecan)에서 분광광도계로 측정되었습니다. Annexin-A1 키트의 분석 범위는 0.20-20 ng/mL, 민감도는 0.2 ng/mL, 분석 내 및 분석 간 분산 계수(CV%)는 <10%였습니다. 결과는 ng로 표시되었습니다.

Carbonic anhydrase 1 수준은 ELISA 방법(Bioscience SRB, 카탈로그 번호: SRB-T-88927)을 사용하여 시판되는 키트로 연구되었습니다. 광학 밀도는 450nm의 파장(Tecan)에서 분광광도계로 측정되었습니다. CA I 키트의 분석 범위는 3.12-200ng/mL, 민감도 <1.875ng/mL, 분석 내 및 분석 간 변동 계수(CV%)는 <10%였습니다. 결과는 ng로 표시되었습니다.

EEF1G 수준은 ELISA 방법(Bioscience SRB, 카탈로그 번호: 201-12-3732)을 사용하여 상업적으로 이용 가능한 키트로 연구되었습니다. 광학 밀도는 450nm의 파장(Tecan)에서 분광광도계로 측정되었습니다. EF1-Ɣ 키트의 분석 범위는 31.25-2000pg/mL, 민감도 <12.4pg/mL, 분석 내 및 분석 간 분산 계수(CV%)는 <10%였습니다. 결과는 ng로 표시되었습니다.

비모수적 기법을 사용하여 통계 분석을 수행했습니다. 연구 그룹 간의 비교는 Kruskal-Wallis 테스트를 사용하여 수행되었습니다. 유의한 차이(p < 0.05)가 있는 경우 Bonferroni 보정 Mann-Whitney U 검정으로 사후 2그룹 비교를 평가했으며 p 값 < 0.05를 유의한 것으로 간주했습니다. 모든 데이터 분석은 통계 패키지(Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, USA)를 사용하여 수행되었습니다. 테스트 데이터 세트의 진단 정확도, 민감도, 특이도, 양성 예측값(PPV), 음성 예측값(NPV), 수신자 작동 특성(ROC) 곡선 및 ROC 곡선 아래 면적(AUC)을 평가했습니다. P 값 < 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주되었고 95% 신뢰 구간(CI)이 계산되었습니다.