GCF Annexin-A1, Carbonic Anhydrase-1 och Elongation Factor-1 Gamma-nivåer vid parodontit

Diagnos av parodontala sjukdomar och tillstånd arrangerades enligt de radiografiska och kliniska diagnostiska kriterierna som föreslagits av 2017 års World Workshop on Classifcation of Periodontal and Peri-implant Diseases and Conditions; 20 patienter med steg III grad B generaliserad parodontit, 20 patienter med steg III grad C generaliserad parodontit, 19 gingivitpatienter och parodontalt friska frivilliga inkluderades i denna studie.

Den kliniska parodontala undersökningen av de friska och parodontitpatienterna bestod av plackindex (PI), sonderingsfickadjup (PPD), klinisk anknytningsnivå (CAL) och blödning vid sondering (BOP) registrerad. CAL beräknades genom att addera GR till PPD-värdena. Medelvärden för helmun PPD, CAL och procentandelen platser med BOP beräknades för varje individ. En enda kalibrerad examinator (VO) genomförde en helmun parodontitundersökning av alla deltagare. Mätningarna utfördes med användning av en Williams periodontal sond (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA). Alla mätningar utfördes i hela munnen och på 4 ställen (mesio-buckal, mid-buckal, distobuckal och mid-lingual) för varje tand. Före kliniska mätningar utfördes kalibrering inom examinator genom att mäta PPD- och CAL-värden två gånger på fem patienter med en dags intervall vilket resulterade i att intraklasskorrelationskoefficienter var 0,92 för PD och 0,90 för CAL.

GCF-prover togs från de buckala aspekterna av två icke-angränsande interproximala platser i enkelrotade tänder. I parodontitgrupper togs GCF från två djupaste fickor av enrotiga tänder. Prover togs från platser med synliga tecken på inflammation i gingivitgruppen och utan BOP i den friska gruppen. De utvalda områdena rensades noggrant från supragingival plack med hjälp av sterila kyretter, isolerades med bomullsrullar och lufttorkades lätt för att undvika kontaminering.

Standardiserade filterpappersremsor (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) användes för GCF-provtagning. Sterila pappersremsor fördes försiktigt in i tandköttssulcusen eller fickan tills lätt motstånd kändes och lämnades där i 30 sekunder. Mekanisk irritation undveks och remsor som var visuellt kontaminerade med blod kasserades. En förkalibrerad elektronisk anordning mätte den absorberade vätskevolymen (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). Avläsningarna omvandlades till en faktisk volym (mikroliter, μL) med hänvisning till standardkurvan. Pappersremsorna placerades individuellt i ett sterilt polypropenrör och förvarades vid -80◦C för vidare analys.

Annexin-A1-nivåer studerades med kommersiellt tillgängliga kit med användning av ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognr: 201-12-3158). Den optiska densiteten mättes spektrofotometriskt vid en våglängd av 450 nm (Tecan). Analysintervallen för Annexin-A1-kitet var 0,20-20 ng/ml, känslighet 0,2 ng/ml, och variansen inom och mellan analysen (CV%) var <10%. Resultaten presenterades som ng.

Kolsyraanhydras 1-nivåer studerades med kommersiellt tillgängliga kit med användning av ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognummer: SRB-T-88927). Den optiska densiteten mättes spektrofotometriskt vid en våglängd av 450 nm (Tecan). Analysintervallen för CA I-kitet var 3,12-200 ng/ml, känslighet <1,875 ng/ml, och variansen inom och mellan analysen (CV%) var <10%. Resultaten presenterades som ng.

EEF1G-nivåer studerades med kommersiellt tillgängliga kit med användning av ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognr: 201-12-3732). Den optiska densiteten mättes spektrofotometriskt vid en våglängd av 450 nm (Tecan). Analysintervallen för EF1-Ɣ-kitet var 31,25-2000 pg/mL, känslighet <12,4 pg/ml, och varianskoefficienterna inom och mellan analyser (CV%) var <10%. Resultaten presenterades som ng.

Statistisk analys utfördes med användning av icke-parametriska tekniker. Jämförelser mellan studiegrupperna utfördes med Kruskal-Wallis-testet. När det fanns signifikanta skillnader (p < 0,05) bedömdes post-hoc 2-gruppsjämförelser med Bonferroni-korrigerade Mann-Whitney U-tester, och p-värden < 0,05 ansågs signifikanta. All dataanalys utfördes med användning av ett statistiskt paket (Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, USA). Den diagnostiska noggrannheten, känsligheten, specificiteten, positivt prediktivt värde (PPV), negativt prediktivt värde (NPV), kurvan för mottagarens funktionskarakteristik (ROC) och arean under ROC-kurvan (AUC) för testdatauppsättningen bedömdes. P-värden < 0,05 ansågs vara statistiskt signifikanta och 95 % konfidensintervall (CI) beräknades.