GCF Annexine-A1, koolzuuranhydrase-1 en verlengingsfactor-1 Gamma-niveaus bij parodontitis

Diagnose van parodontale ziekten en aandoeningen werd geregeld volgens de radiografische en klinische diagnostische criteria voorgesteld door de 2017 World Workshop on Classifcation of Parodontal and Peri-implant Diseases and Conditions; 20 patiënten met gegeneraliseerde parodontitis graad III graad B, 20 patiënten met gegeneraliseerde parodontitis graad III graad C, 19 patiënten met gingivitis en parodontaal gezonde vrijwilligers werden in deze studie opgenomen.

Het klinisch parodontaal onderzoek van de gezonde proefpersonen en proefpersonen met parodontitis bestond uit plaque-index (PI), sondeerpocketdiepte (PPD), klinisch hechtingsniveau (CAL) en geregistreerde bloeding bij sonderen (BOP). CAL werd berekend door GR toe te voegen aan de PPD-waarden. Gemiddelden voor volledige mond PPD, CAL en het percentage sites met BOP werden voor elk onderwerp berekend. Een enkele gekalibreerde examinator (VO) voerde een parodontaal onderzoek uit bij alle deelnemers. De metingen werden uitgevoerd met behulp van een parodontale sonde van Williams (Hu-Friedy, Chicago, IL, VS). Alle metingen werden uitgevoerd in de volledige mond en op 4 plaatsen (mesiobuccaal, midbuccaal, distobuccaal en midlinguaal) voor elke tand. Voorafgaand aan klinische metingen werd intra-examinatorkalibratie uitgevoerd door tweemaal de PPD- en CAL-waarden te meten bij vijf patiënten met een interval van een dag, wat resulteerde in intraclass-correlatiecoëfficiënten van 0,92 voor PD en 0,90 voor CAL.

Er werden GCF-monsters genomen van de buccale aspecten van twee niet-aangrenzende interproximale plaatsen in tanden met één wortel. In parodontitisgroepen werd GCF bemonsterd uit twee diepste zakken met tanden met één wortel. Monsters werden verzameld van de plaatsen met zichtbare tekenen van ontsteking in de gingivitisgroep en zonder BOP in de gezonde groep. De geselecteerde gebieden werden zorgvuldig ontdaan van supragingivale plaque met behulp van steriele curettes, geïsoleerd met wattenrollen en enigszins aan de lucht gedroogd om besmetting te voorkomen.

Gestandaardiseerde filterpapierstroken (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) werden gebruikt voor GCF-bemonstering. Steriele papieren stroken werden voorzichtig in de gingivale sulcus of pocket gestoken totdat er lichte weerstand werd gevoeld en daar gedurende 30 seconden gelaten. Mechanische irritatie werd vermeden en strips die visueel besmet waren met bloed werden weggegooid. Een vooraf gekalibreerd elektronisch apparaat mat het geabsorbeerde vloeistofvolume (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). De aflezingen werden geconverteerd naar een werkelijk volume (microliter, μL) door te verwijzen naar de standaardcurve. De papieren stroken werden afzonderlijk in een steriele polypropyleen buis geplaatst en bij -80◦C bewaard voor verdere analyse.

Annexine-A1-niveaus werden bestudeerd met in de handel verkrijgbare kits met behulp van de ELISA-methode (Bioscience SRB, catalogusnr.: 201-12-3158). De optische dichtheid werd spectrofotometrisch gemeten bij een golflengte van 450 nm (Tecan). De assaybereiken voor de Annexin-A1-kit waren 0,20-20 ng/ml, gevoeligheid 0,2 ng/ml, en de intra- en interassay-variantiecoëfficiënten (CV%) waren <10%. De resultaten werden gepresenteerd als ng.

Koolzuuranhydrase 1-niveaus werden bestudeerd met in de handel verkrijgbare kits met behulp van de ELISA-methode (Bioscience SRB, catalogusnr.: SRB-T-88927). De optische dichtheid werd spectrofotometrisch gemeten bij een golflengte van 450 nm (Tecan). De assaybereiken voor de CA I-kit waren 3,12-200 ng/ml, gevoeligheid <1,875 ng/ml, en de intra- en interassay variantiecoëfficiënten (CV%) waren <10%. De resultaten werden gepresenteerd als ng.

EEF1G-niveaus werden bestudeerd met in de handel verkrijgbare kits met behulp van de ELISA-methode (Bioscience SRB, catalogusnr.: 201-12-3732). De optische dichtheid werd spectrofotometrisch gemeten bij een golflengte van 450 nm (Tecan). De testbereiken voor de EF1-Ɣ-kit waren 31,25-2000 pg/ml, gevoeligheid <12,4 pg/ml, en de intra- en interassay variantiecoëfficiënten (CV%) waren <10%. De resultaten werden gepresenteerd als ng.

Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van niet-parametrische technieken. Vergelijkingen tussen de onderzoeksgroepen werden uitgevoerd met behulp van de Kruskal-Wallis-test. Wanneer er significante verschillen waren (p < 0,05), werden post-hoc 2-groepsvergelijkingen beoordeeld met Bonferroni-gecorrigeerde Mann-Whitney U-testen, en werden p-waarden < 0,05 als significant beschouwd. Alle gegevensanalyse werd uitgevoerd met behulp van een statistisch pakket (Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, VS). De diagnostische nauwkeurigheid, gevoeligheid, specificiteit, positief voorspellende waarde (PPV), negatief voorspellende waarde (NPV), receiver operating Characteristic (ROC)-curve en gebied onder de ROC-curve (AUC) van de testdataset werden beoordeeld. P-waarden < 0,05 werden als statistisch significant beschouwd en er werden 95%-betrouwbaarheidsintervallen (BI's) berekend.