GCF Annexin-A1, kulsyreanhydrase-1 og forlængelsesfaktor-1 gamma-niveauer ved paradentose

Diagnose af periodontale sygdomme og tilstande blev arrangeret i henhold til de radiografiske og kliniske diagnostiske kriterier foreslået af 2017 World Workshop om klassificering af periodontale og peri-implantatsygdomme og -tilstande; 20 patienter med trin III grad B generaliseret parodontitis, 20 patienter med trin III grad C generaliseret parodontitis, 19 gingivitis patienter og parodontalt raske frivillige blev inkluderet i denne undersøgelse.

Den kliniske parodontale undersøgelse af de raske og parodontitis forsøgspersoner bestod af plakindeks (PI), sonderingslommedybde (PPD), klinisk tilknytningsniveau (CAL) og blødning ved sondering (BOP) registreret. CAL blev beregnet ved at tilføje GR til PPD-værdierne. Gennemsnit for fuld mund PPD, CAL og procentdelen af ​​steder med BOP blev beregnet for hvert individ. En enkelt kalibreret eksaminator (VO) gennemførte en fuld mund parodontal undersøgelse af alle deltagere. Målingerne blev udført under anvendelse af en Williams periodontal probe (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA). Alle målinger blev udført med fuld mund og på 4 steder (mesio-bukkal, mid-bukkal, distobukkal og midlingual) for hver tand. Før kliniske målinger blev intra-eksaminatorkalibrering udført ved at måle PPD- og CAL-værdier to gange på fem patienter med en dags interval, hvilket resulterede i intraklasse-korrelationskoefficienter var 0,92 for PD og 0,90 for CAL.

GCF-prøver blev taget fra de bukkale aspekter af to ikke-tilstødende interproksimale steder i enkeltrodede tænder. I parodontitisgrupper blev GCF udtaget fra to dybeste lommer med enkeltrodede tænder. Prøver blev indsamlet fra steder med synlige tegn på betændelse i gingivitis-gruppen og uden BOP i den raske gruppe. De udvalgte områder blev omhyggeligt renset for supragingival plak ved hjælp af sterile curetter, isoleret med bomuldsruller og let lufttørret for at undgå kontaminering.

Standardiserede filterpapirstrimler (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) blev brugt til GCF-prøveudtagning. Sterile papirstrimler blev forsigtigt indsat i tandkødssulcusen eller lommen, indtil der kunne mærkes let modstand, og de blev efterladt der i 30 sekunder. Mekanisk irritation blev undgået, og strimler visuelt kontamineret med blod blev kasseret. En prækalibreret elektronisk enhed målte det absorberede væskevolumen (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). Aflæsningerne blev konverteret til et faktisk volumen (mikroliter, μL) ved reference til standardkurven. Papirstrimlerne blev individuelt anbragt i et sterilt polypropylenrør og opbevaret ved -80◦C til yderligere analyse.

Annexin-A1-niveauer blev undersøgt med kommercielt tilgængelige kits ved hjælp af ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognr.: 201-12-3158). Den optiske tæthed blev målt spektrofotometrisk ved en bølgelængde på 450 nm (Tecan). Analyseområderne for Annexin-A1-kittet var 0,20-20 ng/mL, følsomhed 0,2 ng/mL, og intra- og interassay-varianceskoefficienterne (CV%) var <10%. Resultaterne blev præsenteret som ng.

Kulsyreanhydrase 1-niveauer blev undersøgt med kommercielt tilgængelige kits ved anvendelse af ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognr.: SRB-T-88927). Den optiske tæthed blev målt spektrofotometrisk ved en bølgelængde på 450 nm (Tecan). Analyseområderne for CA I-kittet var 3,12-200 ng/ml, følsomhed <1,875 ng/ml, og intra- og interassay-varianceskoefficienterne (CV%) var <10%. Resultaterne blev præsenteret som ng.

EEF1G-niveauer blev undersøgt med kommercielt tilgængelige kits ved hjælp af ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognr.: 201-12-3732). Den optiske tæthed blev målt spektrofotometrisk ved en bølgelængde på 450 nm (Tecan). Analyseområderne for EF1-Ɣ-kittet var 31,25-2000 pg/mL, følsomhed <12,4pg/ml, og intra- og interassay-variansskoefficienterne (CV%) var <10%. Resultaterne blev præsenteret som ng.

Statistisk analyse blev udført under anvendelse af ikke-parametriske teknikker. Sammenligninger mellem undersøgelsesgrupperne blev udført ved hjælp af Kruskal-Wallis testen. Når der var signifikante forskelle (p < 0,05), blev post-hoc 2-gruppe sammenligninger vurderet med Bonferroni-korrigerede Mann-Whitney U-tests, og p-værdier < 0,05 blev betragtet som signifikante. Al dataanalyse blev udført ved hjælp af en statistisk pakke (Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, USA). Den diagnostiske nøjagtighed, sensitivitet, specificitet, positiv prædiktiv værdi (PPV), negativ prædiktiv værdi (NPV), modtagerdriftskarakteristik (ROC) kurve og areal under ROC-kurven (AUC) af testdatasættet blev vurderet. P-værdier < 0,05 blev betragtet som statistisk signifikante, og 95 % konfidensintervaller (CI'er) blev beregnet.