GCF Annexin-A1, Carbonic Anhydrase-1 og Elongation Factor-1 Gamma-nivåer ved periodontitt

Diagnose av periodontale sykdommer og tilstander ble arrangert i henhold til de radiografiske og kliniske diagnostiske kriteriene foreslått av 2017 World Workshop on Classifcation of Periodontal and Peri-implant Diseases and Conditions; 20 pasienter med stadium III grad B generalisert periodontitt, 20 pasienter med stadium III grad C generalisert periodontitt, 19 gingivittpasienter og periodontalt friske frivillige ble inkludert i denne studien.

Den kliniske periodontale undersøkelsen av friske og periodontitt-personer besto av plakkindeks (PI), sonderingslommedybde (PPD), klinisk tilknytningsnivå (CAL) og blødning ved sondering (BOP) registrert. CAL ble beregnet ved å legge GR til PPD-verdiene. Gjennomsnitt for full munn PPD, CAL og prosentandelen av steder med BOP ble beregnet for hvert individ. En enkelt kalibrert undersøker (VO) gjennomførte en full munn periodontal undersøkelse av alle deltakerne. Målingene ble utført ved bruk av en Williams periodontal probe (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA). Alle målinger ble utført med full munn og på 4 steder (mesio-bukkal, mid-bukkal, distobukkal og midlingual) for hver tann. Før kliniske målinger ble intra-eksaminatorkalibrering utført ved å måle PPD- og CAL-verdier to ganger på fem pasienter med ett dags intervall som resulterte i intraklassekorrelasjonskoeffisienter var 0,92 for PD og 0,90 for CAL.

GCF-prøver ble tatt fra de bukkale aspektene av to ikke-tilstøtende interproksimale steder i enkeltrotede tenner. I periodontittgrupper ble GCF tatt fra to dypeste lommer med enkeltrotede tenner. Prøver ble samlet fra steder med synlige tegn på betennelse i gingivitt-gruppen og uten BOP i den friske gruppen. De utvalgte områdene ble nøye renset for supragingival plakk ved bruk av sterile kyretter, isolert med bomullsruller og lett lufttørket for å unngå kontaminering.

Standardiserte filterpapirstrimler (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) ble brukt for GCF-prøvetaking. Sterile papirstrimler ble forsiktig ført inn i tannkjøttssulcus eller lomme inntil mild motstand ble kjent og ble liggende der i 30 sekunder. Mekanisk irritasjon ble unngått og striper visuelt kontaminert med blod ble kastet. En forhåndskalibrert elektronisk enhet målte det absorberte væskevolumet (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). Avlesningene ble konvertert til et faktisk volum (mikroliter, μL) ved referanse til standardkurven. Papirstrimlene ble individuelt plassert i et sterilt polypropylenrør og lagret ved -80◦C for videre analyse.

Annexin-A1-nivåer ble studert med kommersielt tilgjengelige sett ved bruk av ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognr: 201-12-3158). Den optiske tettheten ble målt spektrofotometrisk ved en bølgelengde på 450 nm (Tecan). Analyseområdene for Annexin-A1-settet var 0,20-20 ng/ml, sensitivitet 0,2 ng/ml, og variasjonskoeffisientene for intra- og interanalyse (CV%) var <10 %. Resultatene ble presentert som ng.

Karbonsyreanhydrase 1-nivåer ble studert med kommersielt tilgjengelige sett ved bruk av ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognr: SRB-T-88927). Den optiske tettheten ble målt spektrofotometrisk ved en bølgelengde på 450 nm (Tecan). Analyseområdene for CA I-settet var 3,12-200 ng/ml, sensitivitet <1,875 ng/ml, og variasjonskoeffisientene for intra- og interanalyse (CV%) var <10 %. Resultatene ble presentert som ng.

EEF1G-nivåer ble studert med kommersielt tilgjengelige sett ved bruk av ELISA-metoden (Bioscience SRB, katalognr: 201-12-3732). Den optiske tettheten ble målt spektrofotometrisk ved en bølgelengde på 450 nm (Tecan). Analyseområdene for EF1-Ɣ-settet var 31,25-2000 pg/mL, sensitivitet <12,4 pg/ml, og variasjonskoeffisientene for intra- og interanalyse (CV%) var <10%. Resultatene ble presentert som ng.

Statistisk analyse ble utført ved bruk av ikke-parametriske teknikker. Sammenligninger mellom studiegruppene ble utført ved bruk av Kruskal-Wallis-testen. Når det var signifikante forskjeller (p < 0,05), ble post-hoc 2-gruppe sammenligninger vurdert med Bonferroni-korrigerte Mann-Whitney U-tester, og p-verdier < 0,05 ble ansett som signifikante. All dataanalyse ble utført ved bruk av en statistisk pakke (Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, USA). Diagnostisk nøyaktighet, sensitivitet, spesifisitet, positiv prediktiv verdi (PPV), negativ prediktiv verdi (NPV), mottakerdriftskarakteristikk (ROC) kurve og arealet under ROC-kurven (AUC) for testdatasettet ble vurdert. P-verdier < 0,05 ble ansett som statistisk signifikante, og 95 % konfidensintervall (CI) ble beregnet.