Уровни аннексина-А1 GCF, карбоангидразы-1 и фактора элонгации-1 при пародонтите

Диагностика заболеваний и состояний пародонта проводилась в соответствии с рентгенологическими и клиническими диагностическими критериями, предложенными Всемирным семинаром по классификации пародонтальных и периимплантационных заболеваний и состояний 2017 г.; В это исследование были включены 20 пациентов с генерализованным пародонтитом стадии III степени B, 20 пациентов с генерализованным пародонтитом стадии III степени C, 19 пациентов с гингивитом и пародонтально здоровые добровольцы.

Клиническое пародонтальное обследование здоровых людей и пациентов с пародонтитом состояло из регистрации индекса зубного налета (PI), глубины кармана при зондировании (PPD), уровня клинического прикрепления (CAL) и кровоточивости при зондировании (BOP). CAL рассчитывали путем добавления GR к значениям PPD. Для каждого субъекта были рассчитаны средние значения PPD полного рта, CAL и процента участков с BOP. Один квалифицированный эксперт (VO) провел полное пародонтальное обследование всех участников. Измерения проводились с использованием пародонтального зонда Williams (Hu-Friedy, Чикаго, Иллинойс, США). Все измерения проводились во всей полости рта и в 4 местах (мезиально-щечной, среднещечной, дистально-щечной и среднеязычной) для каждого зуба. Перед клиническими измерениями была проведена внутриисследовательская калибровка путем измерения значений PPD и CAL дважды у пяти пациентов с интервалом в один день, в результате чего коэффициенты внутриклассовой корреляции составили 0,92 для PD и 0,90 для CAL.

Образцы GCF были взяты с щечных сторон двух несмежных интерпроксимальных участков однокорневых зубов. В группах с пародонтитом ГКФ брали из двух наиболее глубоких карманов однокорневых зубов. Образцы брали с участков с видимыми признаками воспаления в группе с гингивитом и без ВОР в группе здоровых. Выбранные участки тщательно очищали от наддесневого налета стерильными кюретками, изолировали ватными валиками и слегка подсушивали на воздухе во избежание контаминации.

Стандартные полоски фильтровальной бумаги (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) использовали для отбора проб GCF. Стерильные бумажные полоски осторожно вставляли в десневую борозду или карман до ощущения легкого сопротивления и оставляли там на 30 секунд. Избегали механического раздражения и выбрасывали полоски, визуально загрязненные кровью. Предварительно откалиброванное электронное устройство измеряло объем абсорбированной жидкости (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). Показания были преобразованы в фактический объем (микролитр, мкл) по стандартной кривой. Бумажные полоски по отдельности помещали в стерильную полипропиленовую пробирку и хранили при -80°С для дальнейшего анализа.

Уровни аннексина-А1 изучали с помощью имеющихся в продаже наборов методом ELISA (Bioscience SRB, номер по каталогу: 201-12-3158). Оптическую плотность измеряли спектрофотометрически при длине волны 450 нм (Tecan). Диапазоны анализа для набора Annexin-A1 составляли 0,20–20 нг/мл, чувствительность 0,2 нг/мл, а коэффициенты дисперсии внутри и между анализами (CV%) были <10%. Результаты были представлены как нг.

Уровни карбоангидразы 1 изучали с помощью имеющихся в продаже наборов методом ELISA (Bioscience SRB, № по каталогу: SRB-T-88927). Оптическую плотность измеряли спектрофотометрически при длине волны 450 нм (Tecan). Диапазоны анализа для набора CA I составляли 3,12–200 нг/мл, чувствительность <1,875 нг/мл, а коэффициенты дисперсии внутри и между анализами (CV%) были <10%. Результаты были представлены как нг.

Уровни EEF1G изучали с помощью имеющихся в продаже наборов методом ELISA (Bioscience SRB, № по каталогу: 201-12-3732). Оптическую плотность измеряли спектрофотометрически при длине волны 450 нм (Tecan). Диапазоны анализа для набора EF1-Ɣ составляли 31,25–2000 пг/мл, чувствительность <12,4 пг/мл, а коэффициенты дисперсии внутри и между анализами (CV%) были <10%. Результаты были представлены как нг.

Статистический анализ проводили с использованием непараметрических методов. Сравнение между исследуемыми группами проводилось с помощью теста Крускала-Уоллиса. При наличии значительных различий (p < 0,05) апостериорные сравнения двух групп оценивали с помощью U-критерия Манна-Уитни с поправкой Бонферрони, а значения p < 0,05 считались значимыми. Весь анализ данных был выполнен с использованием статистического пакета (Abacus Concepts Inc., Беркли, Калифорния, США). Были оценены диагностическая точность, чувствительность, специфичность, положительное прогностическое значение (PPV), отрицательное прогностическое значение (NPV), кривая рабочих характеристик приемника (ROC) и площадь под ROC-кривой (AUC) набора тестовых данных. Значения P <0,05 считались статистически значимыми, и были рассчитаны 95% доверительные интервалы (ДИ).