GCF-Annexin-A1, Carboanhydrase-1 und Elongationsfaktor-1-Gammawerte bei Parodontitis

Die Diagnose parodontaler Erkrankungen und Zustände wurde gemäß den röntgenologischen und klinischen diagnostischen Kriterien durchgeführt, die vom World Workshop on Classifcation of Parodontal and Peri-implant Diseases and Conditions 2017 vorgeschlagen wurden; 20 Patienten mit generalisierter Parodontitis im Stadium III Grad B, 20 Patienten mit generalisierter Parodontitis im Stadium III Grad C, 19 Patienten mit Gingivitis und parodontal gesunde Freiwillige wurden in diese Studie eingeschlossen.

Die klinische parodontale Untersuchung der gesunden Probanden und Probanden mit Parodontitis bestand aus dem aufgezeichneten Plaqueindex (PI), der Sondierungstaschentiefe (PPD), dem klinischen Attachmentlevel (CAL) und der Blutung bei der Sondierung (BOP). CAL wurde berechnet, indem GR zu den PPD-Werten addiert wurde. Durchschnitte für Vollmund-PDD, CAL und den Prozentsatz der Stellen mit BOP wurden für jeden Probanden berechnet. Ein einziger kalibrierter Untersucher (VO) führte eine vollständige parodontale Untersuchung aller Teilnehmer durch. Die Messungen wurden mit einer Parodontalsonde von Williams (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) durchgeführt. Alle Messungen wurden für jeden Zahn im vollen Mund und an 4 Stellen (mesio-bukkal, mittel-bukkal, distobukkal und mittel-lingual) durchgeführt. Vor den klinischen Messungen wurde eine Intra-Untersucher-Kalibrierung durchgeführt, indem die PPD- und CAL-Werte zweimal bei fünf Patienten mit einem Tagesintervall gemessen wurden, was zu Intraklassen-Korrelationskoeffizienten von 0,92 für PD und 0,90 für CAL führte.

GCF-Proben wurden von den bukkalen Seiten zweier nicht benachbarter interproximaler Stellen in einwurzeligen Zähnen entnommen. In Parodontitis-Gruppen wurde GCF aus zwei tiefsten Taschen einwurzeliger Zähne entnommen. Proben wurden von den Stellen mit sichtbaren Anzeichen einer Entzündung in der Gingivitis-Gruppe und ohne BOP in der gesunden Gruppe entnommen. Die ausgewählten Bereiche wurden mit sterilen Küretten sorgfältig von supragingivaler Plaque befreit, mit Watterollen isoliert und leicht luftgetrocknet, um eine Kontamination zu vermeiden.

Für die GCF-Probenahme wurden standardisierte Filterpapierstreifen (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) verwendet. Sterile Papierstreifen wurden vorsichtig in den gingivalen Sulcus oder die Tasche eingeführt, bis ein leichter Widerstand zu spüren war, und dort für 30 Sekunden belassen. Eine mechanische Reizung wurde vermieden und Streifen, die sichtbar mit Blut kontaminiert waren, wurden verworfen. Ein vorkalibriertes elektronisches Gerät maß das absorbierte Flüssigkeitsvolumen (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). Die Messwerte wurden unter Bezugnahme auf die Standardkurve in ein tatsächliches Volumen (Mikroliter, &mgr;l) umgewandelt. Die Papierstreifen wurden einzeln in ein steriles Polypropylenröhrchen gegeben und zur weiteren Analyse bei -80 °C gelagert.

Annexin-A1-Spiegel wurden mit im Handel erhältlichen Kits unter Verwendung des ELISA-Verfahrens (Bioscience SRB, Katalog-Nr.: 201-12-3158) untersucht. Die optische Dichte wurde spektrophotometrisch bei einer Wellenlänge von 450 nm (Tecan) gemessen. Die Testbereiche für das Annexin-A1-Kit betrugen 0,20–20 ng/ml, die Empfindlichkeit 0,2 ng/ml und die Intra- und Interassay-Varianzkoeffizienten (CV%) waren < 10 %. Die Ergebnisse wurden als ng dargestellt.

Carboanhydrase-1-Spiegel wurden mit im Handel erhältlichen Kits unter Verwendung des ELISA-Verfahrens (Bioscience SRB, Katalog-Nr.: SRB-T-88927) untersucht. Die optische Dichte wurde spektrophotometrisch bei einer Wellenlänge von 450 nm (Tecan) gemessen. Die Testbereiche für das CA-I-Kit waren 3,12–200 ng/ml, die Empfindlichkeit < 1,875 ng/ml, und die Intra- und Inter-Assay-Varianzkoeffizienten (CV%) waren < 10 %. Die Ergebnisse wurden als ng dargestellt.

EEF1G-Spiegel wurden mit im Handel erhältlichen Kits unter Verwendung des ELISA-Verfahrens (Bioscience SRB, Katalog-Nr.: 201-12-3732) untersucht. Die optische Dichte wurde spektrophotometrisch bei einer Wellenlänge von 450 nm (Tecan) gemessen. Die Testbereiche für das EF1-Ɣ-Kit waren 31,25–2000 pg/ml, Sensitivität < 12,4 pg/ml, und die Intra- und Interassay-Varianzkoeffizienten (CV%) waren < 10 %. Die Ergebnisse wurden als ng dargestellt.

Die statistische Analyse wurde unter Verwendung nichtparametrischer Techniken durchgeführt. Vergleiche zwischen den Studiengruppen wurden mit dem Kruskal-Wallis-Test durchgeführt. Bei signifikanten Unterschieden (p < 0,05) wurden post-hoc 2-Gruppen-Vergleiche mit Bonferroni-korrigierten Mann-Whitney-U-Tests bewertet, und p-Werte < 0,05 wurden als signifikant betrachtet. Die gesamte Datenanalyse wurde unter Verwendung eines Statistikpakets (Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, USA) durchgeführt. Die diagnostische Genauigkeit, Sensitivität, Spezifität, positiver prädiktiver Wert (PPV), negativer prädiktiver Wert (NPV), Receiver Operating Characteristic (ROC)-Kurve und Fläche unter der ROC-Kurve (AUC) des Testdatensatzes wurden bewertet. P-Werte < 0,05 wurden als statistisch signifikant angesehen und 95 % Konfidenzintervalle (CIs) wurden berechnet.