GCF Annexin-A1, Carbonic Anhydrase-1 et Elongation Factor-1 Gamma Levels dans la parodontite

Le diagnostic des maladies et affections parodontales a été organisé selon les critères de diagnostic radiographiques et cliniques proposés par l'Atelier mondial 2017 sur la classification des maladies et affections parodontales et péri-implantaires ; 20 patients atteints de parodontite généralisée de stade III de grade B, 20 patients atteints de parodontite généralisée de stade III de grade C, 19 patients atteints de gingivite et des volontaires en bonne santé parodontale ont été inclus dans cette étude.

L'examen clinique parodontal des sujets sains et atteints de parodontite comprenait l'indice de plaque (PI), la profondeur de poche au sondage (PPD), le niveau d'attache clinique (CAL) et le saignement au sondage (BOP) enregistré. CAL a été calculé en ajoutant GR aux valeurs PPD. Les moyennes pour la bouche complète PPD, CAL et le pourcentage de sites avec BOP ont été calculés pour chaque sujet. Un seul examinateur calibré (VO) a effectué un examen parodontal de la bouche complète de tous les participants. Les mesures ont été réalisées à l'aide d'une sonde parodontale Williams (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA). Toutes les mesures ont été effectuées en pleine bouche et sur 4 sites (mésio-buccal, mi-buccal, disto-buccal et mi-lingual) pour chaque dent. Avant les mesures cliniques, l'étalonnage intra-examinateur a été effectué en mesurant les valeurs PPD et CAL deux fois sur cinq patients avec un intervalle d'un jour, ce qui a donné des coefficients de corrélation intraclasse de 0,92 pour PD et 0,90 pour CAL.

Des échantillons de GCF ont été prélevés sur les aspects vestibulaires de deux sites interproximaux non adjacents dans des dents à racine unique. Dans les groupes de parodontite, le GCF a été échantillonné à partir des deux poches les plus profondes de dents à racine unique. Des échantillons ont été prélevés sur les sites présentant des signes visibles d'inflammation dans le groupe gingivite et sans BOP dans le groupe sain. Les zones sélectionnées ont été soigneusement débarrassées de la plaque supragingivale à l'aide de curettes stériles, isolées avec des rouleaux de coton et légèrement séchées à l'air pour éviter toute contamination.

Des bandes de papier filtre standardisées (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) ont été utilisées pour l'échantillonnage du GCF. Des bandes de papier stériles ont été délicatement insérées dans le sillon ou la poche gingivale jusqu'à ce qu'une légère résistance soit ressentie et laissées là pendant 30 secondes. L'irritation mécanique a été évitée et les bandelettes visuellement contaminées par du sang ont été jetées. Un dispositif électronique précalibré a mesuré le volume de fluide absorbé (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). Les lectures ont été converties en un volume réel (microlitre, μL) par référence à la courbe standard. Les bandes de papier ont été placées individuellement dans un tube en polypropylène stérile et stockées à -80°C pour une analyse plus approfondie.

Les niveaux d'annexine-A1 ont été étudiés avec des kits disponibles dans le commerce en utilisant la méthode ELISA (Bioscience SRB, numéro de catalogue : 201-12-3158). La densité optique a été mesurée par spectrophotométrie à une longueur d'onde de 450 nm (Tecan). Les plages de dosage pour le kit Annexin-A1 étaient de 0,20 à 20 ng/mL, la sensibilité de 0,2 ng/mL et les coefficients de variance intra- et inter-essai (CV %) étaient < 10 %. Les résultats ont été présentés en ng.

Les niveaux d'anhydrase carbonique 1 ont été étudiés avec des kits disponibles dans le commerce en utilisant la méthode ELISA (Bioscience SRB, n° de catalogue : SRB-T-88927). La densité optique a été mesurée par spectrophotométrie à une longueur d'onde de 450 nm (Tecan). Les plages de dosage pour le kit CA I étaient de 3,12 à 200 ng/mL, la sensibilité < 1,875 ng/mL et les coefficients de variance intra- et inter-essai (CV %) étaient < 10 %. Les résultats ont été présentés en ng.

Les niveaux d'EEF1G ont été étudiés avec des kits disponibles dans le commerce en utilisant la méthode ELISA (Bioscience SRB, n° de catalogue : 201-12-3732). La densité optique a été mesurée par spectrophotométrie à une longueur d'onde de 450 nm (Tecan). Les plages de dosage pour le kit EF1- Ɣ étaient de 31,25 à 2000pg/mL, sensibilité <12,4 pg/mL, et les coefficients de variance intra- et inter-essai (CV %) étaient < 10 %. Les résultats ont été présentés en ng.

L'analyse statistique a été réalisée à l'aide de techniques non paramétriques. Les comparaisons entre les groupes d'étude ont été effectuées à l'aide du test de Kruskal-Wallis. Lorsqu'il y avait des différences significatives (p < 0,05), les comparaisons post-hoc à 2 groupes ont été évaluées avec les tests U de Mann-Whitney corrigés de Bonferroni, et les valeurs de p < 0,05 ont été considérées comme significatives. Toutes les analyses de données ont été effectuées à l'aide d'un progiciel statistique (Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, États-Unis). L'exactitude du diagnostic, la sensibilité, la spécificité, la valeur prédictive positive (VPP), la valeur prédictive négative (VPN), la courbe caractéristique de fonctionnement du récepteur (ROC) et l'aire sous la courbe ROC (AUC) de l'ensemble de données de test ont été évaluées. Les valeurs P < 0,05 ont été considérées comme statistiquement significatives et des intervalles de confiance (IC) à 95 % ont été calculés.