Poziomy gamma aneksyny A1 GCF, anhydrazy węglanowej-1 i czynnika wydłużania-1 w zapaleniu przyzębia

Diagnozę chorób i schorzeń przyzębia zorganizowano zgodnie z radiograficznymi i klinicznymi kryteriami diagnostycznymi zaproponowanymi przez Światowe Warsztaty Klasyfikacji Chorób i Schorzeń Przyzębia i Periimplantów 2017; Do badania włączono 20 pacjentów z uogólnionym zapaleniem przyzębia stopnia III stopnia B, 20 pacjentów z uogólnionym zapaleniem przyzębia stopnia III stopnia C, 19 pacjentów z zapaleniem dziąseł i zdrowych ochotników pod względem przyzębia.

Kliniczne badanie periodontologiczne osób zdrowych i pacjentów z zapaleniem przyzębia obejmowało wskaźnik płytki nazębnej (PI), głębokość kieszonek dziąsłowych (PPD), kliniczny poziom przyczepu (CAL) i rejestrację krwawienia podczas sondowania (BOP). CAL obliczono dodając GR do wartości PPD. Średnie dla pełnych ust PPD, CAL i odsetek miejsc z BOP obliczono dla każdego pacjenta. Pojedynczy skalibrowany egzaminator (VO) przeprowadził pełne badanie periodontologiczne jamy ustnej wszystkich uczestników. Pomiary wykonano sondą periodontologiczną Williamsa (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA). Wszystkie pomiary przeprowadzono w całej jamie ustnej iw 4 miejscach (mezja policzkowa, środkowa część policzkowa, dystalna i środkowa część językowa) dla każdego zęba. Przed pomiarami klinicznymi przeprowadzono kalibrację wewnątrz badającego, mierząc dwukrotnie wartości PPD i CAL u pięciu pacjentów w odstępie jednego dnia, w wyniku czego współczynniki korelacji wewnątrzklasowej wyniosły 0,92 dla PD i 0,90 dla CAL.

Próbki GCF pobrano z policzkowych aspektów dwóch niesąsiadujących miejsc międzyzębowych w zębach jednokorzeniowych. W grupach z zapaleniem przyzębia próbkę GCF pobierano z dwóch najgłębszych kieszonek zębów jednokorzeniowych. Próbki pobierano z miejsc z widocznymi objawami zapalenia w grupie zapalenia dziąseł i bez BOP w grupie zdrowej. Wybrane obszary starannie oczyszczono z płytki naddziąsłowej za pomocą sterylnych kiret, odizolowano bawełnianymi wałeczkami i lekko wysuszono powietrzem, aby uniknąć zanieczyszczenia.

Standardowe paski bibuły filtracyjnej (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) zastosowano do pobierania próbek GCF. Sterylne paski papieru delikatnie wsuwano w bruzdę dziąsłową lub kieszonkę aż do wyczucia lekkiego oporu i pozostawiono tam na 30 sekund. Unikano podrażnień mechanicznych, a paski wizualnie zanieczyszczone krwią odrzucano. Wstępnie skalibrowane urządzenie elektroniczne mierzyło objętość wchłoniętego płynu (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). Odczyty przeliczono na rzeczywistą objętość (mikrolitry, μl) w odniesieniu do krzywej wzorcowej. Paski bibuły umieszczono pojedynczo w sterylnej probówce polipropylenowej i przechowywano w temperaturze -80°C do dalszej analizy.

Poziomy aneksyny-A1 badano dostępnymi w handlu zestawami, stosując metodę ELISA (Bioscience SRB, nr katalogowy: 201-12-3158). Gęstość optyczną mierzono spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm (Tecan). Zakresy testów dla zestawu Annexin-A1 wynosiły 0,20-20 ng/mL, czułość 0,2 ng/mL, a współczynniki wariancji wewnątrz- i między testami (CV%) wynosiły <10%. Wyniki przedstawiono jako ng.

Poziomy anhydrazy węglanowej 1 badano dostępnymi w handlu zestawami, stosując metodę ELISA (Bioscience SRB, nr katalogowy: SRB-T-88927). Gęstość optyczną mierzono spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm (Tecan). Zakresy testów dla zestawu CA I wynosiły 3,12-200 ng/mL, czułość <1,875 ng/mL, a współczynniki wariancji wewnątrz i między testami (CV%) <10%. Wyniki przedstawiono jako ng.

Poziomy EEF1G badano dostępnymi w handlu zestawami przy użyciu metody ELISA (Bioscience SRB, nr katalogowy: 201-12-3732). Gęstość optyczną mierzono spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm (Tecan). Zakresy testów dla zestawu EF1-Ɣ wynosiły 31,25-2000 pg/mL, czułość <12,4 pg/ml, a współczynniki wariancji wewnątrz i między testami (CV%) wynosiły <10%. Wyniki przedstawiono jako ng.

Analizę statystyczną przeprowadzono przy użyciu technik nieparametrycznych. Porównania między badanymi grupami przeprowadzono za pomocą testu Kruskala-Wallisa. Gdy występowały znaczące różnice (p < 0,05), porównania post-hoc 2-grupowe oceniano za pomocą testów U Manna-Whitneya z poprawką Bonferroniego, a wartości p < 0,05 uznano za istotne. Wszystkie analizy danych przeprowadzono przy użyciu pakietu statystycznego (Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, USA). Oceniono dokładność diagnostyczną, czułość, specyficzność, dodatnią wartość predykcyjną (PPV), ujemną wartość predykcyjną (NPV), krzywą charakterystyki działania odbiornika (ROC) oraz pole pod krzywą ROC (AUC) zestawu danych testowych. Wartości p < 0,05 uznano za istotne statystycznie i obliczono 95% przedziały ufności (CI).