단식 모방 다이어트와 치주염(FMD) (FMD)

소개

치주염은 미생물에 의해 유발되는 치주염의 염증성 질환입니다. 치주염과 관련된 염증은 치주에만 국한되지 않고 신체의 나머지 부분에 광범위한 영향을 미칠 수 있으며 이는 부분적으로 구강 미생물의 전신 확산에 의해 매개될 수 있는 것으로 나타났습니다. 치주 치료의 1단계와 2단계는 또한 순환하는 급성기 염증 표지의 상승을 특징으로 하는 단기 급성기 염증 반응과 연관되어 있으며, 성공할 경우 이러한 분자의 장기간 감소가 뒤따릅니다. 중장기적으로 이는 말초 혈관 건강의 다른 지표의 변화와 함께 최소 12개월 동안 지속되는 대사 조절의 개선을 동반합니다. 치주염은 대사 장애 및 조절 장애와 양방향 관계를 갖는 것으로 알려져 있습니다. 매우 최근의 연구에서는 치주염이 혈청 CRP(C-반응성 단백질) 수준으로 측정된 전신 염증과 관련이 있음이 확증되었습니다. 더욱이, 집중적인 비수술적 치주염 치료(1단계 및 2단계)로 인해 90일 후에 CRP가 점진적으로 감소하고 180일에 중간 정도 증가한 것으로 보고되었습니다. 대사 조절의 개선은 치주 결과도 개선할 수 있다고 생각되지만 이에 대한 정확한 메커니즘은 완전히 명확하지 않습니다. 치주염 관리에 영양이 미치는 영향에 관한 여러 인간 및 실험적 조사도 발표되었습니다. 원숭이를 대상으로 한 연구에서는 장기적인 식이 칼로리 제한(비타민과 미네랄이 풍부한 식단)이 임상적 염증을 완화하고 급성 미생물 공격으로 인한 치주 파괴 정도를 감소시키는 것으로 나타났습니다. 그러나 원숭이에 대한 또 다른 실험 연구에서는 장기간의 저칼로리 식단(일일 칼로리 섭취량의 30%에 비타민과 미네랄을 더한 것)이 수컷에서는 국소 염증 매개체의 생성과 염증성 치주 질환의 위험을 차등적으로 감소시키는 것으로 나타났으나 암컷에서는 그렇지 않았습니다. 또한 최근 동물 모델에 대한 체계적 검토에서는 산화 스트레스나 면역 체계에 영향을 미치는 다량 영양소(예: n-3 지방산)가 치주염 예방 또는 치료에 중요한 것으로 결론지었습니다. 인체 연구 측면에서 한국의 한 그룹은 치주가 건강한 비만인을 대상으로 4주간 체중 조절을 실시한 후 MMP(매트릭스 메탈로프로테이나제)-8, MMP-9 및 인터루킨-1β(IL-1β)가 감소하는 것을 관찰했습니다. 치은열구액(GCF). 독일 팀은 낮은 탄수화물 섭취, 풍부한 오메가 3 지방산과 섬유질, 높은 비타민 C 및 D 수치, 동물성 단백질 감소, 질산염 함유 식물의 집중 섭취로 구성된 식단이 당뇨병을 크게 감소시킬 수 있다고 보고했습니다. 혈청학적 염증 매개변수와 치은연하 미생물은 영향을 받지 않는 것처럼 보이지만 치주 및 치은 염증에 영향을 미칩니다. 최근 한 연구에서는 서구 식습관 패턴(가공육, 붉은 고기, 버터, 고지방 유제품, 계란, 정제 곡물 섭취가 많은 것이 특징)과 신중한 식습관 패턴(가공육, 붉은 고기, 버터, 고지방 유제품, 계란 및 정제 곡물을 많이 섭취하는 것이 특징) 사이에는 전반적인 연관성이 없는 것으로 나타났습니다. 야채, 과일, 콩류, 통곡물, 생선 및 가금류 섭취 증가 및 치주염; 그러나 비만인 개인만 고려했을 때 서양식 식단은 치주염 위험이 더 높았습니다. 식이 염증 지수의 사용을 기반으로 한 또 다른 최근 조사에서는 염증 유발 식이 섭취가 미국 일반 성인 인구의 중등도 및 중증 치주염과 관련이 있는 것으로 나타났습니다. 사람들은 일반적으로 장기간 엄격한 식이요법을 따를 수 없기 때문에 환자의 순응도를 높이기 위해 새로운 단식 방식이 도입되었습니다. 특히 단식모방다이어트(FMD)는 정상 칼로리 섭취량의 30~50%를 4~7일 연속 섭취한 후 한 달에 한 번씩 자유롭게 재섭취하는 방식으로 위험 감소 측면에서 매우 유망한 유익한 효과를 보여주었습니다. 노화, 당뇨병, 자가면역, 심혈관 질환, 신경변성 및 암의 요인. 전반적으로, 치주 임상 및 염증 매개변수에 대한 주기적인 단식의 잠재적인 역할에 대해서는 여전히 불확실성이 있습니다. 우리가 아는 한, 치주염 치료 후 전신 및 치주 반응에 대한 FMD의 잠재적 영향을 조사한 연구는 없습니다.

목표

이 연구의 주요 목적은 단식 모방 다이어트가 비수술적 치주 치료 후 전신 및 치주 반응에 영향을 미칠 수 있는지 테스트하는 것입니다. 귀무 가설은 단식 모방 다이어트가 국소 및 전신 염증 치료 후 반응을 수정하지 않는다는 것입니다.

연구 설계

이는 이중 맹검(결과 평가자 및 통계학자), 다중 센터, 병렬 그룹 및 1:1 할당 비율과 내부 파일럿을 사용한 무작위 임상 연구입니다. 모집된 모든 환자는 치주 치료에 대해 동일한 프로토콜(1단계 및 2단계)을 받게 됩니다. 한 그룹(테스트)은 FMD의 3주기에 제출됩니다. FMD 프로그램은 단식의 부담과 부작용을 최소화하기 위해 다량 영양소와 미량 영양소를 모두 제공하면서 단식과 유사한 효과를 얻을 수 있도록 고안된 식물성 다이어트 프로그램입니다. FMD는 일반적으로 안전한 것으로 간주되는 100% 성분(GRAS)으로 구성되며 독점적인 야채 기반 수프, 에너지 바, 에너지 음료, 크래커 스낵, 올리브, 허브 차 및 보충제로 구성됩니다. 하루에 섭취할 모든 품목은 피험자가 언제 먹을지 선택할 수 있도록 개별 박스에 포장되어 있으며, 다음 날 성분을 실수로 섭취하는 것을 방지할 수 있습니다. FMD는 첫날 약 1,100킬로칼로리를 제공하는 5일 요법으로 구성됩니다. 둘째 날부터 다섯째 날까지 하루에 약 750킬로칼로리를 섭취합니다. 반대로, 다른 그룹(대조군)은 정상적인 식단을 계속 유지합니다.

취재

이것은 다기관 연구입니다. 참가자들은 각 병원에 다니는 치주염 환자 중 카탈루냐 국제대학교(UIC), 마드리드 콤플루텐세 대학교(UCM), 산티아고 데 콤포스텔라 대학교, 무르시아 대학교, 그라나다 대학교 임상 직원/학생들이 검진을 하게 된다. 조사관은 연간 24명의 적격 참가자를 예상하고 이들 중 70%가 초기 관심을 표명한 후 임상시험에 참여하는 데 동의할 것이라고 가정합니다.

연구 절차

과목 모집

카탈루냐 국제 대학교, 콤플루텐세 대학교, 산티아고 데 콤포스텔라 및 그라나다 대학교의 환자들은 캠퍼스 및 치과 교수진 내에서 모집을 위해 개별적으로 접근할 것입니다. 초기 관심을 표현한 후 잠재적 참가자에게는 정보 시트가 제공되며 이메일이나 전화를 통해 연구 팀 구성원에게 질문할 수 있는 기회가 제공됩니다. 참여 의사를 표시하면 상영 방문에 초대됩니다. 각 개인에게는 참여 여부를 결정하는 데 최소 24시간에서 최대 일주일의 시간이 주어집니다. 개인은 연구가 완료되면 지불한 시간에 대해 상환받을 것입니다.

심사 절차

스크리닝 방문 시 훈련된 지원자 또는 연구 치과의사가 동의를 구할 것이며, 이는 전체 임상시험 절차와 각 데이터 수집 방법에 대한 동의 체크리스트를 자세히 설명하는 서면 참가자 동의서를 통해 기록됩니다. 동의가 이루어지면 등록된 각 참가자가 참가자 로그 양식에 기록됩니다. 초기 심사는 각 개인이 명시된 포함 및 제외 기준을 준수하는지 확인하는 것입니다. 이는 구술 기록을 통해 평가되며 하드카피 선별 로그 양식에 기록됩니다. 참가자는 적합성을 확인하기 위해 연구 치과 의사로부터 치주 검사를 받아야 합니다.

무작위화 절차 및 할당 은폐

초기 중앙 무작위화는 Guy's Hospital에서 연구에 직접 참여하지 않은 직원에 의해 "봉인된 봉투" 방법을 사용하여 수행됩니다. 중요한 영향을 미치는 요인('중심')에 대해서는 권장된 대로 계층화된 무작위화가 수행됩니다. 표본 크기가 작을 경우 계층화는 하나 또는 극소수의 요인으로 제한되어야 하며 연령의 영향은 연구 설계에 의해 제한되고 통계 분석에서 조정되기 때문에 연령별 계층화는 수행되지 않습니다. 각 센터에 대해 환자는 연구 통계학자가 이전에 작성한 무작위 목록을 사용하여 두 치료 그룹 중 하나에 할당됩니다. 목록은 차단된 무작위화에 의해 생성됩니다. 할당 은닉을 보장하기 위해 각 센터에서는 봉인된 봉투가 사용됩니다. 참가자는 -7/-10일과 0일 사이에 테스트 또는 대조 치료를 위해 배정됩니다. 치료사는 치료 예약 시작 시 봉투를 열어 치료 할당에 대한 정보를 받게 됩니다.

각 방문 일정

대면 토론이나 광고 반응을 통해 어느 정도 참여 의사를 표현한 참가자는 스크리닝 방문에 초대됩니다. 이는 모든 연구 방문과 마찬가지로 카탈루냐 종합 병원(바르셀로나)과 마드리드, 산티아고 데 콤포스텔라, 무르시아 및 그라나다의 치과구강학 부서(Clinica de Odontologia)에서 이루어지며 약 45분 정도 소요됩니다. 이는 임상 공간 가용성의 범위 내에서 잠재적 참가자와 연구 치과의사가 상호 편리한 시간과 날짜에 진행됩니다. 여기서는 먼저 개인 정보/병력에 대해 질문하고 치과 검진을 받게 됩니다. 자격이 있는 경우 연구의 다음 단계가 시작될 때 통보를 받고 조사를 시작하기 위한 약속이 주어집니다. 치료는 각 센터의 치주학 석사 대학원생이 제공합니다.

1-2주 후 -7/-10일(기준선 약속 또는 방문 1)에 사전 동의가 제공되고 서명됩니다. 혈액, GCF, 플라크 및 대변 샘플을 수집합니다. 병력, 부작용 및 병용 약물을 확인하고 치아 수 기록, 프로빙 깊이, 후퇴(mm) 및 프로빙 후 출혈당 치아당 6개 부위의 구강 검사를 실시합니다. 매우 피상적인 예방, 동기 부여 및 구강 위생 지침이 제공됩니다.

0일차(오전)(방문 2)에 테스트 그룹에 배정된 환자는 연속 5일 동안 FMD를 시작합니다. 모든 환자에게 PMPR(전구치은연하기구) 시술을 시행하고, 보다 자세한 위생 교육을 강화할 예정이다. 병력, 부작용 및 병용 약물을 확인하고 합병증을 선별하기 위해 구강 검사를 실시합니다. 교육을 받은 등록 영양사(센터 중 한 곳)가 환자와 구제역에 대해 논의하고 설문조사를 배포하여 먹지 않은 항목과 추가로 섭취한 음식을 보고합니다.

1일차(v3)에 혈액 및 GCF 샘플을 채취합니다. 병력, 부작용 및 병용 약물을 확인하고, 합병증을 선별하기 위해 구강 검사를 실시합니다.

7일(v4)에 혈액 및 GCF 샘플을 채취합니다. 병력, 부작용 및 병용 약물을 확인하고, 합병증을 선별하기 위해 구강 검사를 실시합니다.

45±5일(v5)에 혈액 및 GCF 샘플을 채취합니다. 구강 위생 지침이 강화되고 연마와 함께 치은연상 스케일링 세션이 제공됩니다. FMD의 두 번째주기는 테스트 그룹의 환자에서 시작됩니다. 병력, 부작용 및 병용 약물을 확인하고, 합병증을 선별하기 위해 구강 검사를 실시합니다.

85±5일(v6)에 FMD의 세 번째 주기가 테스트 그룹의 환자에서 시작됩니다. 병력, 부작용 및 병용 약물을 확인하고 구강 위생 지침을 강화하며 연마를 통한 치은연상 스케일링 세션이 제공됩니다.

90±5일(v7)에 전체 구강 치주 차트 측정이 기록됩니다. 혈액 샘플과 GCF 샘플을 채취합니다. 구강 위생 지침이 강화되고 필요한 경우 지지적 치주 치료 세션이 제공됩니다. 병력, 부작용 및 병용 약물을 확인하고, 합병증을 선별하기 위해 구강 검사를 실시합니다.

180±10일(v8)에 치아당 6개 부위(프로빙 깊이, 후퇴(mm) 및 프로빙 후 출혈)에서 전체 구강 치주 차트 측정을 기록합니다. 혈액, GCF, 플라크 및 대변 샘플을 채취합니다. 구강 위생 지침이 강화됩니다. 병력, 부작용 및 병용 약물을 확인하고, 합병증을 선별하기 위해 구강 검사를 실시합니다.

*모든 FMD 주기 동안 환자에게 한두 번 전화를 걸어 모든 것이 제대로 진행되고 있는지 확인하고 발생할 수 있는 문제나 우려 사항을 해결합니다.

후속 조치 절차

참가자가 여러 번(2/3) 방문을 놓친 경우 탈락으로 간주될 수 있습니다. 그러나 이는 치료 의도 분석에 포함됩니다.

연구 정의 종료

모든 참가자가 임상 기간의 모든 단계를 완료하고 생물학적 물질 및 임상 점수에 대한 처리/분석이 수행되면 연구가 완료됩니다.

샘플 수집/라벨링/로깅

샘플은 연구 방문 중에 이 연구에 참여할 카탈루냐 국제 대학, 마드리드 콤플루텐세 대학, 산티아고 데 콤포스텔라 대학, 무르시아 대학 및 그라나다 대학의 자격을 갖춘 치과 의사가 환자로부터 수집할 것입니다. 모든 유형의 샘플을 수집하는 동안 수집된 샘플의 무결성과 검사관 및 참가자의 안전을 보장하기 위해 적절한 손 위생, 꼭 맞는 장갑 및 멸균된 일회용 검사 항목을 사용합니다. 가짜 익명 라벨이 붙은 튜브는 방문할 때마다 미리 준비되며, 라벨은 참가자 번호 앞에 샘플 유형 지정이 붙은 라벨로 구성됩니다. G는 GCF, B는 혈액, S는 타액, SubP는 치은연하 플라그 등입니다. 물리적 조작으로 인해 샘플링 부위가 교란되거나 약간의 치은 손상이 발생하는 것을 방지하기 위해 임상 검사 전 매 방문마다 샘플 수집이 이루어집니다. 수집 중인 샘플을 오염시킬 수 있는 출혈. GCF Periopaper® 스트립(Pro-flow Inc., Amityville, New York, USA)은 각 사분면에서 가장 깊은 포켓 부위(협측 측면)가 있는 치아의 치은 틈새에 배치됩니다. 그런 다음 수집된 GCF의 양을 정량화하는 보정된 Periotron 8000(Pro-Flow Inc., Amityville, New York, USA) 전자 변환기에서 즉시 측정됩니다. 일단 측정되면 해당 방문에 대한 GCF 스트립은 모두 단일 2ml 튜브에 -80°C에 저장되고 추가 분석을 위해 모아집니다. 4ml의 정맥혈을 참가자의 팔에서 튜브 내부 표면에 스프레이 코팅된 항응고제 EDTA(에틸렌 디아민 테트라 아세트산)의 K2 칼륨염이 들어 있는 Hemogard 안전 폐쇄 캡이 있는 진공 멸균 진공채혈기로 수집합니다. 경험이 풍부하고 훈련된 채혈학자가 샘플을 채취합니다. 실신 위험을 줄이기 위해 참가자는 샘플링 기간 내내 그리고 샘플링 후 5분 동안 반쯤 기대어 있는 받침대에 있어야 합니다. 기절하는 경우에는 넘어지거나 부상을 입지 않도록 연구원이 항상 참가자와 함께 있을 것입니다. 사용한 바늘은 안전한 날카로운 물건 보관함에 폐기됩니다. 혈청 샘플은 11,000RPM에서 10분간 원심분리한 후 즉시 0.2ml~0.5ml씩 나누어 분석에 필요할 때까지 -80°C의 냉동고에 보관합니다. 치은연하 플라크 샘플은 연구 치과의사가 멸균 큐렛을 사용하여 치아의 협측 표면에서 각각 치은연 아래부터 수집합니다. 플라크는 각 연구 방문 시 가장 깊은 포켓 부위(협측 표면)를 가진 치아에서 수집됩니다. 이 치아는 어금니와 앞니가 잘 혼합되어 있는 것으로 선택되었습니다. 이 4개 치아에서 수집된 플라크는 멸균된 0.1x Tris-EDTA 1ml에 모아 -80°C에 보관됩니다. 참가자에게는 보존액 내 대변 샘플링을 위한 가정용 수집 키트가 제공됩니다([http://www.microbiome-standards.org)] http://www.microbiome- 표준.org) 이 샘플은 수집 후 7일 이내에 지역 실험실에 게시됩니다. 실험실에서 대변 샘플을 받으면 샘플은 -80C에 보관됩니다. 생물학적으로 오염된 모든 일회용품은 처리 및 제거를 위해 올바른 생물학적 위험물 용기에 폐기됩니다. 채취한 모든 샘플은 해당 연구 방문에 대한 참가자의 하드카피 CRF에 기록되며 수집 날짜 및 시간과 수집 연구 치과 의사의 이니셜이 기록됩니다. 이는 연구 Excel 스프레드시트에도 기록됩니다. 방문 시 특정 샘플을 채취할 수 없는 경우, 그 이유는 CRF의 해당 '추가 참고 사항' 섹션에 명시됩니다.

샘플 분석 절차

모든 실험은 Guy's Hospital의 Microbiome 및 Salivary 실험실에서 수행됩니다. GCF 샘플을 해동하고 Curtis et al.에 설명된 대로 Easypack Protease Inhibitor Cocktail(Roche)이 보충된 PBS(pH 7.2±0.2)에서 용출합니다. 1988. 간단히 말해서, 페리오페이퍼 스트립은 1.5ml 튜브 내부에 고정될 천공된 0.5ml 미세원심분리 튜브에 배치됩니다. 용출 완충액(50μL)을 스트립에 추가하고 2분 동안 vortex shaker에 넣은 후 11,000rpm 및 4°C에서 15분간 원심분리합니다. 원심분리는 스트립에 추가로 50μL의 용출 완충액을 추가하여 반복하여 약 90μL의 총 용출된 GCF를 생성합니다. 단백질 농도는 Bovine Serum Albumin(Sigma)으로 보정된 LVis 플레이트(BMG Labtech CLARIOstar)를 사용하여 정량화됩니다. 선택한 분석물질에 대한 GCF 분석은 Luminex에서 수행됩니다. 샘플은 Guys Tower Wing 17층에 있는 KCL 호스트-미생물 상호작용 센터에서 처리됩니다. 플라크 및 대변 샘플은 우리 연구실의 표준 절차에 따라 DNA 추출을 거치며 차세대 DNA 시퀀싱을 사용하여 치은 연하 미생물의 특성을 분석하여 주요 치주 세균 병원체 수준과 치료 부위의 미생물 공동체 전체 변화를 식별하고 결정합니다. 테스트 및 제어 프로토콜을 모두 사용합니다. 혈액 샘플에서는 웨스턴 블롯이나 ELISA(효소 결합 면역흡착 분석)와 같은 다양한 기술을 사용하여 사이토카인, 급성기 단백질 및 염증 표지자에 대해 테스트하여 혈액 내 이러한 물질의 존재와 양을 결정합니다. 잇몸 열개액의 염증 매개체, 항체, 펩타이드 및 사이토카인을 다시 ELISA와 같은 기술을 사용하여 분석합니다. IGF-1의 순환 수준, 공복 혈당 수준, 혈액 β-하이드록시부티레이트 수준을 평가하여 FMD 준수 여부를 모니터링합니다.

ELISA(고감도 2부위 효소 결합 면역흡착 분석): IL-6 검출.

Cobas Integra 700(자동 면역 탁도 고감도 분석): HsCRP 검출.

이러한 실험에서 생성된 데이터는 Salivary 및 Microbiome 실험실의 컴퓨터와 King's가 제공한 연구용 노트북을 포함하여 비밀번호로 보호된 안전한 King's 컴퓨터에 저장됩니다.

샘플 보관 절차

혈액, 타액, 플라크 및 GCF 샘플은 카탈루냐 국제 대학, 마드리드 콤플루텐세 대학, 산티아고 데 콤포스텔라 대학 및 그라나다 대학의 실험실에 있는 안전하고 잠긴 HTA 냉동고에 -80°C로 보관됩니다. 이렇게 하면 시료 처리 준비에 있어서 장기적인 안정성이 보장됩니다. 수집 후 대변 샘플은 사전 우표가 찍힌 봉투에 밀봉되어 환자가 각 참여 센터로 발송합니다. 모든 샘플을 보관할 때 물리적 무결성이 검사되고 냉동될 샘플은 비밀번호로 보호되는 보안 컴퓨터 데이터베이스에 기록됩니다. 이 데이터베이스에는 냉동고 내 위치와 보관된 시간/날짜가 기록됩니다. 저장되는 샘플을 기록한 실제 하드카피도 CRF에 표시됩니다. 제공된 샘플의 보관, 운송, 사용 및 최종 폐기는 영국 인체 조직법 2004 및 EU 조직 및 세포 지침에 따라 수행됩니다. 샘플이 즉시 처리되지 않으면 나중에 추가 분석을 위해 유사 익명으로 저장됩니다. 검체는 가이스병원 타액검사실로 이송되며, 완료 후 10년간 보관됩니다. 연구에 대한 윤리적 승인이 만료된 후 혈액, 타액 및 GCF 샘플은 인간 조직법 2004 및 그에 대한 모든 개정 사항에 따라 폐기되거나 조직 은행으로 이전됩니다.

스페인에서 영국으로 샘플 배송

샘플은 예상 여행 시간보다 오랫동안 올바른 온도를 유지할 수 있도록 충분한 얼음/드라이아이스가 들어 있는 이글루에 보관됩니다. 그런 다음 폴리스티렌 이글루의 일부가 얼음/드라이아이스로 채워져 샘플과 추가 얼음을 위한 공간이 확보됩니다. 카탈로그 작성을 돕기 위해 샘플을 밀봉된 플라스틱 백에 넣을 수도 있습니다. 그런 다음 이글루를 드라이아이스로 채워 샘플과 발송 양식을 덮고, 추가로 밀봉된 플라스틱 샘플 백에 주소 라벨 사본이 포함됩니다. 이글루에 뚜껑을 덮고 포장 테이프로 고정합니다. 그 후 이글루를 튼튼한 갈색 포장지로 포장하고 주소 라벨과 극저온 위험 라벨을 모두 부착한 후 배송됩니다. 최대한 빠른 배송을 완료하기 위해 가장 빠른 운송 수단(예: 비행기)을 선택합니다.

안전성 평가

조사관은 혈액 샘플을 포함한 샘플 수집과 관련된 참가자에게 심각한 위험이 있을 것으로 예상하지 않습니다. 이는 잘 확립된 절차이기 때문입니다. 이전 문헌에 따르면, 가능한 위험은 피로, 허약 및 두통을 포함하여 FMD 식이요법으로 인한 일부 경미/중등도의 전신 부작용과 관련될 수 있습니다. 또한 혈액 채취 중이나 채취 후에 약간의 실신 위험이 있습니다. 이러한 위험을 줄이기 위해 참가자는 샘플링 기간 동안과 샘플링 후 5분 동안 반 기대어 있는 받침대에 있어야 합니다. 기절하는 경우에는 넘어지거나 부상을 입지 않도록 연구원이 항상 참가자와 함께 있을 것입니다. 혈액 시료 채취 중 검사관에게 바늘 찔림 부상이 발생하거나 긁힘 부상이 발생한 경우 해당 사건에 대응하기 위한 현지 절차가 시행됩니다. 연구 과정 동안 심각한 부작용이 발생할 것으로 예상되지 않습니다.

윤리보고

부작용은 연구와 관련된 바람직하지 않은 의도하지 않은 징후, 증상 또는 질병입니다. 혈액 채취 중 실신과 같은 부작용이 발생하면 조사관은 연구 파일 CRF에 포함되도록 수석 조사관에게 알립니다. 심각한 부작용(SAE)은 사망을 초래하거나 참가자의 입원이 필요하거나 지속적인 장애를 유발하거나 선천적 결함을 유발하는 사례입니다. 이러한 일이 발생하는 경우, 사건을 인지한 후 24시간 이내에 보고서가 기록되고, 사건을 인지한 후 15일 이내에 윤리 위원회에 보고됩니다. 양식은 타이프스크립트로 작성되어야 하며 수석 조사관의 서명이 있어야 합니다. 주 REC는 30일 이내에 안전 보고서 수신을 승인합니다.

준수 및 철회

주제 준수

참가자의 준수 여부는 각 연구 방문 시 평가됩니다. 자가 보고된 병력은 참가자가 어떠한 조치도 취하지 않았는지(예: 다른 임상 시험에 참여하기 시작했는지), 상태가 발생하지 않았는지, 약물 복용을 시작했는지(예: 전신 항생제 복용)은 제외 기준에 의해 금지됩니다. 또한 IGF-1 순환 수준의 감소를 고려한 혈액 검사를 기반으로 순응도를 평가합니다. 이는 CRF의 체크리스트에 기록됩니다. 각 환자는 시험 환자의 FMD 주기를 포함하여 연구 전반에 걸쳐 다이어트 일기를 작성해야 합니다. 식이 일기를 작성하지 못한 경우에도 연구 타당성에 있어서 식이 요법이 매우 중요하기 때문에 중도 탈락으로 기록됩니다. 마지막으로, 참가자가 예기치 않게 연구 방문에 참석하지 못한 경우, 가능한 다음 기회에 진료소에 참석하도록 요청받게 됩니다.

과목 자퇴/탈락

참가자는 언제든지 연구에서 탈퇴할 수 있습니다. 이는 참가자와 연구 팀 간의 구두 토론을 통해 이루어지며, 그들의 결정은 서면 철회 양식에 기록됩니다. 예를 들어, 탈퇴 이유는 신체적 불편함이나 너무 많은 시간 투자 때문일 수 있습니다. 모든 익명화된 데이터가 대조되는 데이터 분석이 완료되면 참가자는 더 이상 연구에서 데이터를 철회할 수 없으며 이는 초기 모집 단계에서 명확해집니다. 이에 대한 가장 늦은 날짜는 연구가 끝날 때입니다. 특정 상황에서는 프로토콜에 대한 중대한 비준수(예: 여러 번의 연구 방문 누락 또는 제외 기준을 충족하는 기타 사건)와 같이 연구 팀이 참가자를 시험에서 제외하기로 결정해야 할 수 있습니다. 여기에는 참가자에게 결정을 알리고 설명하기 위한 대화와 서면 철회 양식에 기록된 결정이 포함됩니다. 연구 방문에서 비준수 사항이 밝혀지면 CRF의 '추가 메모' 섹션에도 기록됩니다. 개인이 탈퇴하더라도 피험자는 교체되지 않습니다.

통계적 고려사항

표본 크기 계산

치주염 환자에게 FMD를 사용한 연구는 발표되지 않았습니다. 따라서 타당성 및 필요한 표본 크기에 대한 데이터는 문헌에서 확인할 수 없습니다. 올바른 연구 표본 크기가 어느 정도인지 추정하는 것은 매우 어렵습니다. 따라서 이 연구는 내부 파일럿으로 설계되었습니다. Browne과 동료(1995)는 표본 크기에 대해 경험적으로 30명의 환자가 필요하다고 제안한 반면, Kieser & Wassmer(1996)는 20에서 40 사이의 파일럿 표본 크기가 대규모 연구의 전체 표본 크기를 최소화할 것임을 발견했습니다. Julious 2009의 제안에 따라 연구 부문당 12명의 환자가 이 연구를 위해 모집됩니다.

중간분석 및 타당성/진행기준

더 큰 규모의 임상시험(및 상대 표본 크기)을 진행하기로 한 결정은 아래의 타당성/진행 기준에 따라 달라집니다.

타당성 측면 충족해야 할 진행 기준

무작위 배정에 대한 의향 접근한 환자의 ≥ 50%가 동의함 식이 요법에 대한 자가 보고 준수 ≥ 테스트 그룹 환자의 자가 보고 준수(식이 요법을 따르지 않은 날이 1일 이하로 정의됨) 식이 요법에 대한 테스트된 준수 ≥ 66 테스트 그룹 환자의 %는 혈액 검사를 기반으로 준수를 나타냅니다(IGF-1 순환 수준의 20~30% 감소로 정의됨)(Wei 2017) 혈액 샘플 허용 모집된 환자의 ≥ 66%가 프로토콜에 따라 모든 혈액 샘플을 채취했습니다. 심각한 부작용 사례 테스트 식이요법과 관련될 수 있는 심각한 부작용을 보고한 환자는 없습니다.

위 기준을 모두 만족하면 '내부 파일럿' 환자 24명의 데이터를 활용해 최대 3개월간 기존 데이터 분석을 진행한다. 3개월 후 CRP 값의 평균 및 표준 편차는 대규모 시험에 필요한 표본 크기를 계산하는 데 사용됩니다. 연구 환자에 대한 추적 관찰은 치료 후 최대 6개월까지 계속됩니다. 1차 결과(3개월 후 CRP)에 대한 그룹 간의 차이가 최소화되어 표본 크기가 매우 커지면 더 큰 환자 그룹 모집을 진행하지 않기로 결정할 수 있으며 모집이 중단될 수 있습니다. 그러나 아직 연구에 참여하고 있는 환자는 마지막 연구 후속 조치(180일)까지 추적 관찰됩니다.

통계 분석

연구의 주요 결과는 치료 후 3개월의 순환 CRP 수준입니다(시험 대 대조). 그러나 연구의 내부 파일럿/타당성 부분은 전체 전력 연구 표본 크기를 진행할지 여부를 고려하기 전에 먼저 완료되어야 합니다. 타당성 기준이 충족되면 치료 후 3개월의 그룹 간 CRP 수준 차이를 표본 크기에 사용하고 공식 통계 계획을 수립합니다. 다양한 통계 패키지가 다양한 목적으로 사용됩니다. Stata 14(StataCorp LLC, College Station, Texas, USA)가 기본 패키지이고 R(R-Studio 플러그인 포함)이 추가 분석에 사용되며 둘 다 특정 루틴을 사용합니다. 이 연구를 위해 만들어졌습니다. 분석된 정량변수가 정규분포를 따르는지 확인하기 위해 Shapiro-Wilk 테스트를 적용하고, 정규분포를 따르지 않는 변수에 대해서는 로그변환을 수행합니다. 모집단 및 연구 그룹의 프로필이 설명됩니다. 정성변수의 결과는 비율로 표현되며, 정량변수는 95% 신뢰구간을 포함한 평균과 표준편차로 표현됩니다. 임상적, 생화학적, 미생물학적 매개변수 각각에 대한 인구 분포도 얻을 수 있습니다. 이변량 분석의 경우 카이제곱 검정을 사용하여 두 정성적 변수 사이에 통계적으로 유의미한 연관성이 있는지 확인하고 카이제곱 검정이 타당성 조건을 충족하지 않는 경우 데이터를 분할표로 표시합니다. Fisher의 정확 검정 적용될 것이다.

그룹 간 분석을 위한 두 독립 변수의 평균을 비교하기 위해 그룹 내 분석에서 쌍을 이루는 표본에 대한 스튜던트 T-테스트를 ​​고려하여 스튜던트 T-테스트를 ​​사용합니다. 일반적인 가정이 충족되지 않으면 매개변수 없는 "Mann-Whitney U" 테스트가 적용됩니다. 그룹 내 분석의 경우 반복 측정을 위한 ANOVA 또는 Friedman 테스트가 사용됩니다. 다변량 분석은 다중 선형 회귀 모델과 0.20의 낮은 유의 수준을 갖는 독립 변수를 도입하는 순서형 로지스틱 회귀를 통해 수행됩니다. 이분산성 및 선형성의 잔차 분석을 통해 조건을 확인합니다. 본 연구의 통계적 유의성 수준은 p<0.05입니다.

중지/중단 규칙 및 무작위 코드 위반

조사관은 샘플 수집 및 FMD와 관련된 위험을 예측하지 않습니다. 이는 잘 확립된 절차이기 때문입니다. 따라서 연구자들은 연구의 어떤 부분도 중단할 필요가 없으며 참가자의 안전 문제로 인해 임상시험을 중단할 필요가 없을 것으로 예상합니다. 그러나 FMD는 치주염 환자를 대상으로 테스트되지 않았으므로 심각한 부작용이 발생할 가능성은 희박하지만, 스폰서에 대한 보고서는 이벤트를 인지한 후 24시간 이내에 기록되고 15일 이내에 윤리위원회에 보고됩니다. 이벤트 학습 중입니다. 그런 다음 이들 기관과 관련된 연구를 중단해야 하는지 여부에 대한 결정이 내려질 것입니다.