Faste-lignende diett og periodontitt (FMD) (FMD)

Introduksjon

Periodontitt er en mikrobielt drevet inflammatorisk sykdom i periodontiet. Det er vist at den periodontittassosierte betennelsen ikke er begrenset til periodontiet, men kan ha vidtrekkende konsekvenser i resten av kroppen, og at dette delvis kan være mediert av systemisk spredning av orale mikroorganismer. Trinn 1 og 2 av periodontal terapi er også assosiert med en kortvarig akutt fase inflammatorisk respons, karakterisert ved forhøyelse av sirkulerende akuttfase inflammatoriske markører, som igjen følges, hvis vellykket, av en langsiktig reduksjon i disse molekylene. På mellomlang til lengre sikt er dette ledsaget av endringer i andre markører for perifer vaskulær helse sammen med forbedringer i metabolsk kontroll som varer i minst 12 måneder. Periodontitt er kjent for å ha en toveis sammenheng med metabolske forstyrrelser og dysregulering. Et svært nylig arbeid bekreftet at periodontitt er assosiert med systemisk betennelse målt ved nivåer av C-reaktivt protein (CRP) i serum. Videre er det rapportert at intensiv ikke-kirurgisk periodontittbehandling (trinn 1 og 2) førte til en progressiv reduksjon av CRP etter 90 dager med en moderat økning etter 180 dager. Det antas at forbedringer i metabolsk kontroll også kan forbedre periodontale utfall, men de eksakte mekanismene for dette er ikke helt klare. Det er også publisert flere menneskelige og eksperimentelle undersøkelser om mulige effekter av ernæring på behandling av periodontitt. En studie på aper fant at langvarig diettkalorirestriksjon (diett beriket med vitaminer og mineraler) demper klinisk betennelse og reduserer graden av periodontal nedbrytning sekundært til akutt mikrobiell utfordring. I en annen eksperimentell studie på aper så det imidlertid ut til at langsiktig hypokalorisk diett (30 % mindre av det daglige kaloriinntaket pluss vitaminer og mineraler) reduserte produksjonen av lokale inflammatoriske mediatorer og risikoen for inflammatorisk periodontal sykdom blant menn, men ikke kvinner. I tillegg konkluderte en nylig systematisk gjennomgang av dyremodeller at makronæringsstoffer som har en effekt på oksidativt stress eller immunsystem (dvs. n-3-fettsyre) ser ut til å være viktige for forebygging eller behandling av periodontitt. Når det gjelder menneskelig forskning, observerte en koreansk gruppe, etter en fire ukers vektkontrollintervensjon hos periodontalt friske overvektige mennesker, en reduksjon av matrisemetalloproteinase (MMP)-8, MMP-9 og interleukin-1β (IL-1β) i gingival crevicular fluid (GCF). Et tysk team rapporterte at en diett bestående av lavt karbohydratinntak, rik på Omega 3-fettsyrer og fiber, høyere vitamin C- og D-verdier, reduksjon av animalske proteiner og fokusert inntak av nitratholdige planter kan føre til en betydelig reduksjon i periodontal og gingival betennelse, selv om serologiske inflammatoriske parametere og det subgingivale mikrobiomet ser ut til å være upåvirket. Nylig fant en studie at det ikke var noen generell sammenheng mellom vestlige kostholdsmønstre (preget av et høyere inntak av bearbeidet kjøtt, rødt kjøtt, smør, høyfett meieriprodukter, egg og raffinert korn) eller forsiktige kostholdsmønstre (preget av en høyere inntak av grønnsaker, frukt, belgfrukter, fullkorn, fisk og fjærfe) og periodontitt; Men når kun overvektige individer ble vurdert, var et vestlig kosthold relatert til en høyere risiko for periodontitt. En annen helt fersk undersøkelse, basert på bruk av en diettbetennelsesindeks, viste at inntak av en pro-inflammatorisk diett var assosiert med moderat alvorlig periodontitt i den generelle voksne befolkningen i USA. En ny modus for faste har blitt introdusert for å øke pasientens etterlevelse, på grunn av det faktum at folk vanligvis ikke er i stand til å følge en streng diett over en lengre periode. Spesielt den fastende etterlignende dietten (FMD), bestående av 30-50 % av det normale kaloriinntaket i 4-7 påfølgende dager etterfulgt av en ad libitum-periode en gang i måneden, viste svært lovende gunstige effekter når det gjelder reduksjon av risiko. faktorer for aldring, diabetes, autoimmunitet, hjerte- og karsykdommer, nevrodegenerasjon og kreft. Samlet sett er det fortsatt usikkerhet om en potensiell rolle av periodisk faste på periodontale kliniske og inflammatoriske parametere. Så vidt vi vet har ingen studier undersøkt den potensielle effekten av MKS på systemisk og periodontal respons etter periodontittbehandling.

Mål

Hovedmålet med denne studien er å teste om en fastende etterlignende diett kan påvirke den systemiske og periodontale responsen etter ikke-kirurgisk periodontal terapi. Nullhypotesen er at en fastende etterlignende diett ikke modifiserer den lokale og systemiske inflammatoriske responsen etter behandling.

Studere design

Dette er en dobbeltblind (resultatbedømmer og statistiker), multisenter, randomisert klinisk studie med parallelle grupper og en 1:1 tildelingsrasjon, med intern pilot. Alle rekrutterte pasienter vil få samme protokoll for periodontal terapi (trinn 1 og 2). Én gruppe (test) vil bli underkastet tre sykluser med MKS. MKS-programmet er et plantebasert diettprogram designet for å oppnå faste-lignende effekter samtidig som det gir både makro- og mikronæringsstoffer for å minimere belastningen av faste og bivirkninger. MKS består av 100 % ingredienser som generelt anses som trygge (GRAS) og omfatter proprietære grønnsaksbaserte supper, energibarer, energidrikker, kjeks, oliven, urtete og kosttilskudd. Alle varer som skal konsumeres per dag er individuelt eske for å la forsøkspersonene velge når de skal spise mens de unngår utilsiktet inntak av komponenter fra den påfølgende dagen. MKS består av en 5-dagers diett som gir omtrent 1100 kilokalorier den første dagen; ca. 750 kilokalorier per dag den andre til den femte dagen. Tvert imot vil den andre gruppen (kontrollen) fortsette med sitt vanlige kosthold.

Emnevalg

Dette er en multisenterstudie. Deltakerne vil bli screenet av International University of Catalunya (UIC), Complutense University of Madrid (UCM), University of Santiago de Compostela, University of Murcia og University of Granada klinisk ansatte/studenter blant periodontittpasienter som går på de respektive sykehusene. Etterforskerne forventer at 24 kvalifiserte deltakere er tilgjengelige per år og antar at 70 % av dem vil godta å delta i rettssaken etter å ha uttrykt interesse.

Studieprosedyrer

Fagrekruttering

Pasientene til International University of Catalunya, Complutense University, Santiago de Compostela og Granada Universitys pasienter, vil bli oppsøkt individuelt for rekruttering på campus og innen Dental fakultetet. Etter å ha uttrykt en første interesse, vil potensielle deltakere få et informasjonsark og mulighet til å stille spørsmål til medlemmer av studieteamet via e-post eller telefon. Dersom de da uttrykker ønske om å delta, vil de bli invitert til et visningsbesøk. Hver enkelt vil få minst 24 timer og opptil en uke til å bestemme om de ønsker å delta. Enkeltpersoner vil bli refundert for sin tid med en betaling ved fullført studie.

Screening-prosedyrer

Ved screeningbesøket vil samtykke bli søkt av den trente søkeren eller studietannlegen, som vil bli registrert gjennom et skriftlig deltakersamtykkeskjema som beskriver den fullstendige prøveprosedyren og en avtalesjekkliste for hver datainnsamlingsmetode. Når samtykke er gitt, vil hver registrerte deltaker bli registrert på et deltakerloggskjema. Innledende screening vil være for å sikre at hver enkelt er i samsvar med de skisserte inkluderings- og eksklusjonskriteriene. Dette vil bli vurdert ved å ta en muntlig historie og vil bli registrert på et papirutgave skjema for screeninglogg. Deltakerne må gjennomgå en periodontal undersøkelse fra studietannlegen for å sikre egnethet.

Randomiseringsprosedyrer og tildelingsfortielse

Innledende sentral randomisering vil bli gjort ved hjelp av "Sealed Envelope"-metoden av personell som ikke er direkte involvert i studien, ved Guy's Hospital. For viktige påvirkningsfaktorer ('senter') vil det gjennomføres stratifisert randomisering som anbefalt. Det vil ikke bli utført stratifisering etter alder, fordi for små utvalgsstørrelser bør stratifisering begrenses til én eller svært få faktorer og fordi påvirkning av alder er begrenset av studiedesignet og vil bli justert for i statistiske analyser. For hvert senter vil pasienter bli allokert til en av de to behandlingsgruppene ved hjelp av en randomiseringsliste som tidligere er utarbeidet av studiestatistikeren. Listen genereres av blokkert randomisering. Forseglet konvolutt vil bli brukt i hvert senter for å sikre tildelingsskjul. Deltaker vil bli tildelt test- eller kontrollbehandling ute mellom dag -7/-10 og dag 0. Terapeuten vil bli informert om behandlingstildeling ved å åpne konvolutten i begynnelsen av behandlingstimen.

Tidsplan for hvert besøk

Deltakere som har uttrykt en viss interesse for å delta fra diskusjoner ansikt til ansikt eller fra svar på annonser vil bli invitert til et screeningbesøk. Dette vil finne sted, som alle studiebesøk vil, ved Hospital General de Catalunya (Barcelona) og ved Odontostomatology-enhetene (Clinica de Odontologia) i Madrid, Santiago de Compostela, Murcia og Granada, og dette bør ta ca. 45 minutter. Dette vil finne sted på et gjensidig passende tidspunkt og dato for den potensielle deltakeren og studietannlegen, innenfor rammen av tilgjengelig klinisk plass. Her vil de i første omgang bli spurt om personopplysninger/sykehistorie og gjennomgå en tannundersøkelse. Hvis de er kvalifisert, vil de bli informert når neste fase av studien vil starte og etter en avtale er gitt for å starte med undersøkelsen. Behandling vil bli gitt av postgraduate-studentene ved Master of Periodontology ved hvert senter.

En-to uker senere på dag -7/-10 (grunnlinjeavtale eller besøk 1), vil informert samtykke bli gitt og signert. Blod-, GCF-, plakk- og avføringsprøver vil bli tatt. Sykehistorie, uønskede hendelser og samtidige medisiner vil bli kontrollert og en muntlig undersøkelse vil bli utført inkludert registrering av antall tenner og på 6 steder per tannsonderingsdybde, resesjon (mm) og blødning etter sondering. En svært overfladisk profylakse, motivasjon og munnhygieneinstruksjoner vil bli gitt.

På dag 0 (morgen) (besøk 2) vil pasienter som er tildelt testgruppen starte MKS i 5 påfølgende dager. Alle pasienter vil gjennomgå full-mouth subgingival instrumentation (PMPR) prosedyrer og mer detaljert hygiene instruksjon vil bli forsterket. Sykehistorie, uønskede hendelser og samtidige medisiner vil bli kontrollert, og det vil bli gjennomført en muntlig undersøkelse for å screene for komplikasjoner. En utdannet registrert kostholdsekspert (fra et av sentrene) vil diskutere MKS med pasienter og også distribuere undersøkelse for å rapportere om ting som ikke er spist og ekstra mat som er konsumert.

På dag 1 (v3) vil det bli tatt prøver av blod og GCF. Sykehistorie, uønskede hendelser og samtidige medisiner vil bli kontrollert, det vil bli gjennomført en muntlig undersøkelse for å screene for komplikasjoner.

På dag 7 (v4) vil det bli tatt prøver av blod og GCF. Sykehistorie, uønskede hendelser og samtidige medisiner vil bli kontrollert, det vil bli gjennomført en muntlig undersøkelse for å screene for komplikasjoner.

På dag 45±5 (v5) vil det bli tatt prøver av blod og GCF. Munnhygieneinstruksjoner vil bli forsterket, og en økt med supragingival skalering med polering vil bli gitt. Den andre syklusen av MKS vil bli startet hos pasienter i testgruppen. Sykehistorie, uønskede hendelser og samtidige medisiner vil bli kontrollert, det vil bli gjennomført en muntlig undersøkelse for å screene for komplikasjoner.

På dag 85 ±5 (v6) vil den tredje syklusen av MKS startes hos pasienter i testgruppen. Sykehistorie, uønskede hendelser og samtidige medisiner vil bli kontrollert, munnhygieneinstruksjoner vil bli forsterket og en økt med supragingival skalering med polering vil bli gitt.

På dag 90 ±5 (v7) vil full-munns periodontale kartleggingsmålinger bli registrert. Det vil bli tatt blodprøver og GCF-prøver. Munnhygieneinstruksjoner vil bli forsterket, og om nødvendig vil en økt med støttende periodontal terapi bli gitt. Sykehistorie, uønskede hendelser og samtidige medisiner vil bli kontrollert, det vil bli gjennomført en muntlig undersøkelse for å screene for komplikasjoner.

På dag 180 ±10 (v8), vil full-munn periodontale kartleggingsmålinger bli registrert på 6 steder per tann: sonderingsdybde, resesjon (mm) og blødning etter sondering. Det vil bli tatt blod-, GCF-, plakk- og avføringsprøver. Munnhygieneinstruksjoner vil bli forsterket. Sykehistorie, uønskede hendelser og samtidige medisiner vil bli kontrollert, det vil bli gjennomført en muntlig undersøkelse for å screene for komplikasjoner.

*Pasienter vil bli oppringt en eller to ganger i løpet av hver MKS-syklus for å sjekke at alt går som det skal og for å løse eventuelle problemer eller bekymringer de måtte ha.

Oppfølgingsprosedyrer

Hvis en deltaker går glipp av flere (2/3) besøk, kan de betraktes som et frafall. De vil imidlertid bli inkludert i intensjonsbehandlingsanalysen.

Definisjon av studieslutt

Studien vil være fullført når alle deltakerne har fullført alle fasene i den kliniske perioden, og behandlingen/analysen av det biologiske materialet og kliniske skårer er utført.

Prøvesamling/merking/logging

Prøvene vil bli samlet inn under studiebesøket fra pasienten av kvalifiserte tannleger ved International University of Catalunya, Complutense University of Madrid, University of Santiago de Compostela, University of Murcia og University of Granada som vil delta i denne studien. Under innsamlingen av alle prøvetyper vil riktig håndhygiene, påmonterte hansker og sterile engangsundersøkelsesartikler bli brukt for å sikre integriteten til prøvene som samles inn og sikkerheten til undersøkeren og deltakeren. Pseudo-anonymiserte merkede rør vil bli klargjort i forkant av hvert besøk, med etiketten bestående av deltakernummeret prefiks med prøvetypebetegnelsen, f.eks. G for GCF, B for blod, S for spytt, SubP for sub-gingival plakk etc. Prøvetaking vil foregå ved hvert besøk før klinisk undersøkelse finner sted, for å hindre at den fysiske manipulasjonen forstyrrer prøvetakingsstedet eller forårsaker lett gingival blødning som kan forurense prøven som tas. GCF Periopaper® Strips (Pro-flow Inc., Amityville, New York, USA) vil bli plassert i tannkjøttspalten på tennene med det dypeste lommestedet (bukkale aspekter) i hver kvadrant. De vil deretter umiddelbart bli målt på en kalibrert Periotron 8000 (Pro-Flow Inc., Amityville, New York, USA) elektronisk transduser, som vil kvantifisere mengden GCF som samles inn. Når de er målt, vil alle GCF-strimlene for det besøket lagres ved -80ºC i et enkelt 2 ml rør og samles for videre analyse. 4 ml venøst ​​blod vil samles opp fra deltakerens arm inn i Hemogard sikkerhetslukkede evakuerte sterile vakuumbeholdere, som inneholder antikoagulanten K2 Kaliumsalt av EDTA (Ethylene Diamine Tetra Eddiksyre) som er spraybelagt på den indre overflaten av røret. Prøver vil bli tatt av erfarne og trente phlebotomists. For å redusere denne risikoen for å besvime, vil deltakerne ligge på en semi-tilbakestilt sokkel under hele prøvetakingen og i fem minutter etter prøvetakingen. En forsker vil til enhver tid være til stede sammen med deltakeren for å sikre at det ikke oppstår fall eller skader i tilfelle besvimelse. Brukte nåler vil bli kastet i en sikker søppelbøtte. Prøvene for serum vil bli sentrifugert i 10 minutter ved 11 000 RPM og deretter umiddelbart delt inn i 0,2 ml - 0,5 ml alikvoter og lagret i en fryser ved -80 °C, inntil nødvendig for analyse. Sub-gingival plakkprøver vil bli samlet inn fra tannoverflaten av tannlegen ved hjelp av en steril kyrett, henholdsvis under tannkjøttkanten. Plaketten vil bli samlet fra tenner med det dypeste lommestedet (bukkal overflate) ved hvert studiebesøk. Disse tennene ble valgt for å ha en god blanding av jekslene og fortenner. Den oppsamlede plakk fra disse fire tennene vil bli samlet i 1 ml steril 0,1x Tris-EDTA og lagret ved -80ºC. Deltakerne vil bli utstyrt med hjemmeoppsamlingssett for prøvetaking av avføring i konserveringsløsning ([http://www.microbiome-standards.org)] http://www.microbiome- standards.org) og denne prøven vil bli sendt til det lokale laboratoriet innen 7 dager etter innsamling. Ved mottak av avføringsprøver i laboratoriet vil prøvene lagres ved -80 C. Alle biologisk forurensede engangsartikler vil bli kastet i riktig biologisk farebeholder for behandling og fjerning. Alle prøver som tas vil bli logget på deltakerens papirkopi CRF for det studiebesøket, med dato og klokkeslett for innsamling registrert og initialene til den innsamlende studietannlegen. Dette vil også logges på Excel-regnearket. Hvis en bestemt prøve ikke er i stand til å tas ved det besøket, vil årsaken til dette bli oppgitt i den aktuelle delen "Ytterligere merknader" i CRF.

Prøveanalyseprosedyrer

Alle eksperimenter vil bli utført i mikrobiome- og spyttlaboratoriene, Guy's Hospital. GCF-prøver vil bli tint og eluert i PBS (pH 7,2±0,2) supplert med Easypack Protease Inhibitor Cocktail (Roche) som beskrevet i Curtis et al. 1988. Kort fortalt vil periopapirstrimlene plasseres i et perforert 0,5 ml mikrosentrifugerør som holdes inne i et 1,5 ml rør. Elueringsbufferen (50 μL) tilsettes strimlene og plasseres i en vortex-shaker i 2 minutter før sentrifugering i 15 minutter ved 11 000 rpm og 4 ̊C. Sentrifugeringen vil bli gjentatt med ytterligere 50 μL av elueringsbufferen tilsatt på strimlene, for å gi ~90 μL totalt eluert GCF. Proteinkonsentrasjonen vil bli kvantifisert ved å bruke en LVis-plate (BMG Labtech CLARIOstar) kalibrert med bovint serumalbumin (Sigma). GCF-analyse for utvalgte analytter vil bli utført av Luminex. Prøver vil bli behandlet ved KCL Center for Host-Microbiome Interactions, fl.17 Guys Tower Wing. Plakk- og avføringsprøver vil gjennomgå DNA-ekstraksjon etter standardprosedyrer i laboratoriet vårt og vil bli analysert ved hjelp av neste generasjons DNA-sekvensering for å karakterisere den subgingival mikrobiota for å identifisere og bestemme nivåene av viktige periodontale bakterielle patogener og mikrobielle endringer i hele samfunnet på steder som behandles med både test- og kontrollprotokoller. Blodprøver vil bli testet for cytokiner, akuttfaseproteiner og inflammatoriske markører ved bruk av ulike teknikker som Western blots eller enzym-linked immunosorbent assays (ELISA), som vil bestemme tilstedeværelsen og mengden av disse i blodet. Gingival Crevicular Fluid vil bli analysert for inflammatoriske mediatorer, antistoffer, peptider og cytokiner, igjen ved bruk av teknikker som ELISA. Sirkulerende nivåer av IGF-1, fastende blodsukkernivå, blod-β-hydroksybutyratnivå vil bli vurdert for å overvåke samsvar med MKS.

ELISA (high-sensitivity two-site enzyme-linked immunosorbent assay): IL-6-deteksjon.

Cobas Integra 700 (automatisert immuno-turbidimetrisk høysensitivitetsanalyse): HsCRP-deteksjon.

Dataene som genereres fra disse eksperimentene vil bli lagret på sikre, passordbeskyttede Kings datamaskiner, inkludert de i Salivary- og Microbiome-laboratoriene og studie-laptopen levert av King's.

Eksempel på lagringsprosedyrer

Blod-, spytt-, plakk- og GCF-prøver vil bli lagret ved -80ºC i sikre, låste HTA-frysere i laboratoriene til International University of Catalunya, Complutense University of Madrid, University of Santiago de Compostela og University of Granada. Dette vil sikre langsiktig stabilitet i beredskapen for prøvebehandling. Etter innsamling vil avføringsprøver bli sendt til hvert deltakende senter av pasienter i forseglede forhåndsstemplede konvolutter. Etter hvert som de lagres, vil alle prøver få sin fysiske integritet kontrollert, og prøver som skal fryses vil deretter logges på en passordbeskyttet, sikker datadatabase, som registrerer plasseringen deres i fryseren og klokkeslettet/datoen de ble lagret. En fysisk papirkopi som registrerer prøvene som lagres, vil også bli vist på CRF. Oppbevaring, transport, bruk og endelig avhending av prøven som leveres vil bli utført i samsvar med UK Human Tissue Act 2004 og EUs vevs- og celledirektiver. Hvis noen prøver ikke behandles umiddelbart, vil de bli pseudo-anonymt lagret for videre analyse på et senere tidspunkt. Prøver vil bli overført til spyttlaboratoriet, Guy's Hospital og vil bli arkivert i 10 år etter ferdigstillelse. Etter at etikkgodkjenningen for studien har utløpt, vil blod-, spytt- og GCF-prøvene bli kastet i samsvar med Human Tissue Act 2004, og eventuelle endringer i denne, eller overført til en vevsbank.

Frakt av prøve fra Spania til Storbritannia

Prøver vil bli plassert i en iglo som kan inneholde tilstrekkelig med is/tørris for å sikre at prøvene holdes ved riktig temperatur lenger enn beregnet reisetid. Deretter er isopor-igloen delvis fylt med is/tørris som gir plass til prøver og ekstra is. Prøver kan legges i en forseglet plastpose for å hjelpe til med katalogisering. Igloen fylles deretter med tørris for å dekke prøvene og et forsendelsesskjema, og i tillegg er en kopi av adresseetiketten i en forseglet plastprøvepose inkludert. Et lokk legges på igloen og festes med pakketape. Deretter pakkes igloen inn i sterkt brunt innpakningspapir og både adresseetikett og fareetiketter for svært lav temperatur festes før levering. Det vil bli valgt som det raskeste transportmiddelet (f.eks. fly) for å fullføre frakten så raskt som mulig.

Vurdering av sikkerhet

Etterforskerne forutser ingen vesentlig risiko for deltakeren som er involvert i prøvetakingen, inkludert blodprøver, da dette er veletablerte prosedyrer. Basert på tidligere litteratur kan en mulig risiko dreie seg om noen milde/moderate systemiske bivirkninger forårsaket av MKS-dietten, inkludert tretthet, svakhet og hodepine. Det er også en liten risiko for å besvime under eller etter blodprøvetaking. For å redusere denne risikoen, vil deltakerne være på en delvis tilbakelent sokkel under hele prøvetakingen og i fem minutter etter prøvetakingen. En forsker vil til enhver tid være til stede sammen med deltakeren for å sikre at det ikke oppstår fall eller skader i tilfelle besvimelse. Hvis det oppstår en nålestikkskade på undersøkeren under innsamlingen av blodprøven, eller det oppstår en ripeskade, vil lokale prosedyrer bli implementert for å reagere på en slik hendelse. Det forventes ingen alvorlige bivirkninger i løpet av studien.

Etikkrapportering

En uønsket hendelse er alle ugunstige og utilsiktede tegn, symptomer eller sykdommer forbundet med studien. Skulle det oppstå en uønsket hendelse, som for eksempel besvimelse under inntak av blod, vil utrederen informere sjefsetterforskeren, for inkludering i studiefilen CRF. En alvorlig bivirkning (SAE) er en hendelse som forårsaker død, krever sykehusinnleggelse av deltakeren, forårsaker vedvarende funksjonshemming eller forårsaker en fødselsdefekt. Skulle dette skje, vil en rapport bli loggført innen 24 timer etter kjennskap til hendelsen og en rapport til etikkkomiteen innen 15 dager etter kjennskap til hendelsen. Skjemaet skal fylles ut med maskinskrift og undertegnes av hovedetterforskeren. Hoved-REC vil bekrefte mottak av sikkerhetsrapporter innen 30 dager.

Overholdelse og tilbaketrekking

Emneoverholdelse

Deltakerens etterlevelse vil bli vurdert ved hvert studiebesøk. En egenrapportert sykehistorie vil sikre at deltakeren ikke har gjort noen handling (f.eks. begynt å delta i en annen klinisk studie) eller utviklet en tilstand eller begynt å ta medisiner (f.eks. tar systemiske antibiotika) som er forbudt i henhold til eksklusjonskriteriene. I tillegg vil overholdelse bli evaluert basert på blodprøver som tar hensyn til reduksjoner i sirkulerende nivåer av IGF-1. Dette vil bli registrert på en sjekkliste på CRF. Hver pasient bør fylle ut en diettdagbok gjennom hele studien, inkludert MKS-sykluser for testpasienter. Unnlatelse av å fullføre kostholdsdagboken vil også bli registrert som frafall, på grunn av diettens avgjørende betydning for studiens gyldighet. Til slutt, hvis en deltaker uventet unnlater å delta på et studiebesøk, vil de bli bedt om å delta på klinikken ved aller neste mulige anledning.

Uttak/frafall av fag

Deltakerne kan når som helst trekke seg fra studien. Dette ville være gjennom en muntlig diskusjon mellom deltakeren og et hvilket som helst av studieteamet, og deres beslutning logget på et skriftlig tilbaketrekningsskjema. Årsaker til tilbaketrekning kan for eksempel være på grunn av fysisk ubehag eller for mye tid. Etter fullføring av dataanalysen, hvor alle anonymiserte data ville bli samlet, ville deltakerne ikke lenger kunne trekke dataene sine fra studien, noe som ville bli gjort klart i det første rekrutteringsstadiet. Siste dato for dette er ved slutten av studien. Visse omstendigheter kan kreve at studieteamet bestemmer seg for å trekke deltakere fra studien, for eksempel betydelig manglende overholdelse av protokollen, for eksempel manglende flere studiebesøk, eller andre hendelser som ville oppfylle eksklusjonskriteriene. Dette vil innebære å snakke med deltakeren for å informere og forklare beslutningen for dem, og beslutningen logges på et skriftlig tilbaketrekningsskjema. Hvis manglende overholdelse avsløres ved et studiebesøk, vil det også bli logget i delen "Ytterligere merknader" i CRF. Emner vil ikke bli erstattet når enkeltpersoner trekker seg.

Statistiske betraktninger

Prøvestørrelsesberegning

Det er ikke publisert studier med bruk av MKS hos pasienter med periodontitt. Derfor er ingen data om gjennomførbarhet og nødvendig utvalgsstørrelse tilgjengelig i litteraturen. det er svært vanskelig å estimere hva den riktige utvalgets størrelse vil være, og som en konsekvens er denne studien utformet som en intern pilot. Mens Browne og medarbeidere (1995) antydet at 30 pasienter ville være nødvendig som tommelfingerregel for prøvestørrelse, fant Kieser & Wassmer (1996) at en pilotprøvestørrelse mellom 20 og 40 ville minimere den totale prøvestørrelsen til den større studien. Etter forslag fra Julious 2009, vil 12 pasienter per studiearm bli rekruttert til denne studien.

Interimanalyse og gjennomførbarhets-/progresjonskriterier

Beslutningen om å gå videre med det større forsøket (og den relative prøvestørrelsen) vil avhenge av gjennomførbarhets-/progresjonskriteriene nedenfor.

MULIGHETSASPEKTER PROGRESJONSKRITERIER SOM SKAL OPPFYLLES

Villighet til å bli randomisert ≥ 50 % av henvendte pasienter er enige i Selvrapportert overensstemmelse med diett ≥ 66 % av pasientene i testgruppen selvrapporterer overensstemmelse (definert som ikke mer enn 1 dag hvor dietten ikke ble fulgt) Testet overensstemmelse med diett ≥ 66 % av pasientene i testgruppen viser etterlevelse basert på blodprøve (definert som 20 til 30 % reduksjoner i sirkulerende nivåer av IGF-1) (Wei 2017) Aksept av blodprøver ≥ 66 % av rekrutterte pasienter har alle blodprøver tatt i henhold til protokoll Fravær av alvorlige bivirkninger Ingen pasienter rapporterer om alvorlige bivirkninger som kan være relatert til testdietten

Hvis alle kriteriene ovenfor er oppfylt, vil analyse av eksisterende data i opptil 3 måneder bli utført ved bruk av data fra de 24 'interne pilot'-pasientene. Midler og standardavvik for CRP-verdier etter 3 måneder vil bli brukt for å beregne den nødvendige prøvestørrelsen for den større prøven. Oppfølging av studiepasientene vil fortsette inntil 6 måneder etter behandling. Skulle forskjellen mellom gruppene for det primære utfallet (CRP ved 3 måneder) være minimal, noe som resulterer i en svært stor utvalgsstørrelse, kan det tas en beslutning om ikke å gå videre til å rekruttere en større gruppe pasienter og rekrutteringen vil bli stoppet. Pasientene som fortsatt er med i studien vil imidlertid bli fulgt opp til siste studieoppfølging (180 dager).

Statistisk analyse

Det primære resultatet av studien er sirkulerende CRP-nivåer 3 måneder etter behandling (test vs. kontroll). Imidlertid må den interne pilot-/gjennomførbarhetsdelen av studien fullføres først før man vurderer om man skal fortsette med en fullverdig studieprøvestørrelse. Hvis gjennomførbarhetskriteriene er oppfylt, vil forskjellen i CRP-nivåer 3 måneder etter behandling mellom grupper brukes til prøvestørrelsen, og en formell statistisk plan vil bli formulert. Ulike statistiske pakker vil bli brukt til forskjellige formål, Stata 14 (StataCorp LLC, College Station, Texas, USA) vil være hovedpakke og R (med R-Studio-plugin), vil bli brukt til ytterligere analyser, begge med spesifikke rutiner opprettet for denne studien. Shapiro-Wilk-testen vil bli brukt for å verifisere om de analyserte kvantitative variablene følger en normalfordeling og logaritmisk transformasjon vil bli utført i de som ikke følger den. Profilen til befolkningen og studiegruppene vil bli beskrevet. Resultatene av de kvalitative variablene vil uttrykkes i proporsjoner og de kvantitative variablene vil bli uttrykt som gjennomsnitt og standardavvik, inkludert 95 % konfidensintervaller. Fordelingen av populasjonen for hver av de kliniske, biokjemiske og mikrobiologiske parameterne vil også bli innhentet. For den bivariate analysen vil kjikvadrattest bli brukt for å bestemme om det er en statistisk signifikant assosiasjon mellom to kvalitative variabler, dataene vil bli presentert som beredskapstabeller, når chikvadrattesten ikke oppfyller validitetsbetingelsene Fishers eksakte test vil bli brukt.

For å sammenligne middelverdiene til to uavhengige variabler for intergruppeanalyser, vil Students T-test bli brukt, med tanke på Students T-test for sammenkoblede prøver i interngruppeanalyser. Hvis de normale forutsetningene ikke er oppfylt, vil den ingen parametriske "Mann-Whitney U"-testen bli brukt. For intragruppeanalyser vil ANOVA for repeterende tiltak eller Friedman-test brukes. Multivariat analyse vil bli utført ved hjelp av en multippel lineær regresjonsmodell og ordinal logistisk regresjon som introduserer de uavhengige variablene med et lavere signifikansnivå på 0,20. Forholdene vil bli kontrollert ved restanalyse av heteroskedastisitet og linearitet. Nivået av statistisk signifikans for denne studien vil være p<0,05.

Stoppe-/avbruddsregler og brudd på randomiseringskode

Etterforskerne forutser ingen risiko forbundet med prøvetaking og MKS, da dette er veletablerte prosedyrer. Derfor forutser etterforskerne at ingen del av studien må avbrytes, og at studien ikke bør stoppes på grunn av deltakernes sikkerhetsproblemer. Men siden FMD ikke har blitt testet hos periodontittpasienter, i det usannsynlige tilfellet at det er en alvorlig bivirkning, vil en rapport til sponsoren logges innen 24 timer etter at hendelsen ble kjent og en rapport til den etiske komiteen innen 15 dager å lære av hendelsen. Det vil da bli tatt stilling til om studien skal stoppes eller ikke i samarbeid med disse instansene.