Faste-lignende diæt og paradentose (FMD) (FMD)

Introduktion

Paradentose er en mikrobielt drevet inflammatorisk sygdom i parodontiet. Det har vist sig, at den paradentose-associerede betændelse ikke er begrænset til parodontiet, men kan have vidtrækkende konsekvenser i resten af ​​kroppen, og at dette til dels kan være medieret af systemisk spredning af orale mikroorganismer. Trin 1 og 2 af parodontal terapi er også forbundet med en kortvarig akut fase inflammatorisk respons, karakteriseret ved forhøjelse af cirkulerende akut-fase inflammatoriske markører, som igen følges, hvis det lykkes, af en længerevarende reduktion i disse molekyler. På mellemlang til længere sigt er dette ledsaget af ændringer i andre markører for perifer vaskulær sundhed sammen med forbedringer i metabolisk kontrol, der varer mindst 12 måneder. Paradentose er kendt for at have en tovejs sammenhæng med metabolisk forstyrrelse og dysregulering. Et meget nyligt arbejde bekræftede, at paradentose er forbundet med systemisk inflammation målt ved serumniveauer af C-reaktivt protein (CRP). Endvidere er det blevet rapporteret, at intensiv ikke-kirurgisk parodontitisbehandling (trin 1 og 2) førte til en progressiv reduktion af CRP efter 90 dage med en moderat stigning efter 180 dage. Det menes, at forbedringer i metabolisk kontrol også kan forbedre periodontale resultater, men de nøjagtige mekanismer for dette er ikke helt klare. Der er også publiceret adskillige menneskelige og eksperimentelle undersøgelser vedrørende de mulige virkninger af ernæring på behandlingen af ​​paradentose. En undersøgelse af aber viste, at langvarig kaloriebegrænsning i kosten (diæt beriget med vitaminer og mineraler) dæmper klinisk inflammation og reducerer graden af ​​periodontal nedbrydning sekundært til akut mikrobiel udfordring. Men i en anden eksperimentel undersøgelse på aber, syntes langvarig hypokalorisk diæt (30 % mindre af det daglige kalorieindtag plus vitaminer og mineraler) differentielt at reducere produktionen af ​​lokale inflammatoriske mediatorer og risikoen for inflammatorisk periodontal sygdom blandt mænd, men ikke kvinder. Derudover konkluderede en nylig systematisk gennemgang af dyremodeller, at makronæringsstoffer, der har en effekt på oxidativt stress eller immunsystem (dvs. n-3 fedtsyre) synes at være vigtige for forebyggelse eller behandling af paradentose. Med hensyn til menneskelig forskning observerede en koreansk gruppe, efter en fire ugers vægtkontrolintervention i periodontalt raske overvægtige mennesker, en reduktion af matrix metalloproteinase (MMP)-8, MMP-9 og interleukin-1β (IL-1β) i gingival crevicular fluid (GCF). Et tysk hold rapporterede, at en diæt bestående af lavt kulhydratindtag, rigdom på Omega 3-fedtsyrer og fibre, højere C- og D-vitaminværdier, reduktion af animalske proteiner og fokuseret indtagelse af nitratholdige planter kan føre til en betydelig reduktion af parodontal og tandkødsbetændelse, selvom serologiske inflammatoriske parametre og det subgingivale mikrobiom synes at være upåvirket. For nylig fandt en undersøgelse, at der ikke var nogen overordnet sammenhæng mellem vestlige kostmønstre (kendetegnet ved et højere indtag af forarbejdet kød, rødt kød, smør, mejeriprodukter med højt fedtindhold, æg og raffineret korn) eller forsigtige kostmønstre (kendetegnet ved en højere indtag af grøntsager, frugt, bælgfrugter, fuldkorn, fisk og fjerkræ) og paradentose; Men når kun overvægtige individer blev overvejet, var en vestlig kost relateret til en højere risiko for paradentose. En anden meget nylig undersøgelse, baseret på brugen af ​​et diætbetændelsesindeks, viste, at indtagelse af en pro-inflammatorisk diæt var forbundet med moderat-svær parodontitis i den generelle voksne befolkning i USA. En ny måde at faste på er blevet indført for at øge patientcompliance, på grund af det faktum, at folk normalt ikke er i stand til at følge en streng diæt i en længere periode. Især den fastende efterlignende diæt (FMD), bestående af 30-50 % af det normale kalorieindtag i 4-7 på hinanden følgende dage efterfulgt af en genfodring ad libitum-periode én gang om måneden, viste meget lovende gavnlige effekter i form af reduktion af risiko faktorer for aldring, diabetes, autoimmunitet, hjerte-kar-sygdomme, neurodegeneration og kræft. Samlet set er der stadig usikkerhed om en potentiel rolle af periodisk faste på periodontale kliniske og inflammatoriske parametre. Så vidt vi ved, har ingen undersøgelser undersøgt den potentielle effekt af MKS på systemisk og parodontal respons efter parodontitisbehandling.

Mål

Hovedformålet med denne undersøgelse er at teste, om en fastende efterlignende diæt kan påvirke den systemiske og parodontale respons efter ikke-kirurgisk parodontal terapi. Nulhypotesen er, at en fastende efterlignende diæt ikke ændrer det lokale og systemiske inflammatoriske efterbehandlingsrespons.

Studere design

Dette er et dobbeltblindt (resultatbedømmer og statistiker), multicenter, randomiseret klinisk studie med parallelle grupper og en 1:1 tildelingsration med intern pilot. Alle rekrutterede patienter vil modtage den samme protokol for parodontal terapi (trin 1 og 2). En gruppe (test) vil blive underkastet tre cyklusser af mund- og klovsyge. MKS-programmet er et plantebaseret diætprogram designet til at opnå faste-lignende effekter, samtidig med at det giver både makro- og mikronæringsstoffer for at minimere belastningen af ​​faste og bivirkninger. MKS består af 100% ingredienser, der generelt betragtes som sikre (GRAS) og omfatter proprietære grøntsagsbaserede supper, energibarer, energidrikke, kiks snacks, oliven, urtete og kosttilskud. Alle varer, der skal indtages pr. dag, er individuelt pakket ind for at give forsøgspersonerne mulighed for at vælge, hvornår de skal spise, mens de undgår utilsigtet indtagelse af komponenter fra den følgende dag. MKS består af en 5-dages kur, der giver cirka 1.100 kilokalorier den første dag; cirka 750 kilokalorier om dagen for den anden til den femte dag. Tværtimod vil den anden gruppe (kontrol) fortsætte med deres normale kost.

Emnevalg

Dette er en multicenterundersøgelse. Deltagerne vil blive screenet af International University of Catalunya (UIC), Complutense University of Madrid (UCM), University of Santiago de Compostela, University of Murcia og University of Granada klinisk personale/studerende blandt paradentosepatienter, der går på de respektive hospitaler. Efterforskerne forventer, at der er 24 kvalificerede deltagere til rådighed om året og antager, at 70 % af dem vil acceptere at deltage i retssagen efter at have udtrykt første interesse.

Studieprocedurer

Fagrekruttering

International University of Catalunya's, Complutense University, Santiago de Compostela og Granada Universities' patienter, vil blive individuelt kontaktet for rekruttering på campus og inden for det tandlægefakultet. Efter at have udtrykt en indledende interesse, vil potentielle deltagere blive forsynet med et informationsark og mulighed for at stille spørgsmål til medlemmer af undersøgelsesteamet via e-mail eller telefon. Hvis de så udtrykker ønske om at deltage, vil de blive inviteret til et screeningsbesøg. Hver enkelt person vil få mindst 24 timer og op til en uge til at beslutte, om de ønsker at deltage. Enkeltpersoner vil blive refunderet for deres tid med en betaling ved afslutningen af ​​undersøgelsen.

Screeningsprocedurer

Ved screeningbesøget vil samtykke blive indhentet af den uddannede ansøger eller studietandlæge, som vil blive registreret gennem en skriftlig deltagersamtykkeformular, der beskriver den komplette forsøgsprocedure og en aftaletjekliste for hver dataindsamlingsmetode. Når samtykke er givet, vil hver tilmeldt deltager blive registreret på en deltagerlogformular. Den indledende screening skal sikre, at hver enkelt person overholder de skitserede inklusions- og eksklusionskriterier. Dette vil blive vurderet ved at tage en mundtlig historie og vil blive registreret på en papirkopi af Screening Log-formularen. Deltagerne skal gennemgå en parodontal undersøgelse fra studietandlægen for at sikre egnethed.

Randomiseringsprocedurer og tildelingsskjul

Indledende central randomisering vil blive udført ved hjælp af "Sealed Envelope"-metoden af ​​personale, der ikke er direkte involveret i undersøgelsen, på Guy's Hospital. For vigtige påvirkningsfaktorer ('center') vil der blive udført stratificeret randomisering som anbefalet. Der vil ikke blive udført stratificering efter alder, fordi stratificering for små stikprøvestørrelser bør begrænses til en eller meget få faktorer, og fordi alderens indflydelse er begrænset af undersøgelsens design og vil blive justeret for i statistiske analyser. For hvert center vil patienter blive allokeret til en af ​​de to behandlingsgrupper ved hjælp af en randomiseringsliste, som tidligere er udarbejdet af undersøgelsens statistiker. Listen vil blive genereret ved blokeret randomisering. Forseglet kuvert vil blive brugt i hvert center for at sikre tildelingsskjul. Deltageren vil blive tildelt test- eller kontrolbehandling ude mellem dag -7/-10 og dag 0. Behandleren vil blive informeret om behandlingstildeling ved at åbne kuverten i begyndelsen af ​​behandlingstiden.

Tidsplan for hvert besøg

Deltagere, der har udtrykt en vis interesse for at deltage fra ansigt-til-ansigt diskussioner eller fra svar på annoncer, vil blive inviteret til et screeningsbesøg. Dette vil finde sted, som alle studiebesøg vil, på Hospital General de Catalunya (Barcelona) og på Odontostomatologi-enhederne (Clinica de Odontologia) i Madrid, Santiago de Compostela, Murcia og Granada, og dette bør tage cirka 45 minutter. Dette vil finde sted på et gensidigt passende tidspunkt og dato for den potentielle deltager og undersøgelsestandlægen inden for rammerne af tilgængelighed af klinisk plads. Her vil de i første omgang blive spurgt om deres personlige oplysninger/sygehistorie og gennemgå en tandundersøgelse. Hvis de er berettigede, vil de blive informeret om, hvornår næste fase af undersøgelsen påbegyndes, og efter en aftale er givet for at begynde med undersøgelsen. Behandling vil blive leveret af post-graduate studerende fra Master of Parodontologi på hvert center.

En-to uger senere på dag -7/-10 (basislinjeaftale eller besøg 1), vil informeret samtykke blive givet og underskrevet. Blod-, GCF-, plak- og afføringsprøver vil blive indsamlet. Sygehistorie, uønskede hændelser og samtidig medicin vil blive kontrolleret, og en mundtlig undersøgelse vil blive udført, herunder registrering af antal tænder og på 6 steder pr. tandsonderingsdybde, recession (mm) og blødning efter sondering. Der vil blive givet en meget overfladisk profylakse, motivation og mundhygiejneinstruktioner.

På dag 0 (morgen) (besøg 2) vil patienter, der er tildelt testgruppen, starte MKS i 5 på hinanden følgende dage. Alle patienter vil gennemgå fuldmunds subgingival instrumentation (PMPR) procedurer, og mere detaljeret hygiejneinstruktion vil blive styrket. Sygehistorie, bivirkninger og samtidig medicin vil blive kontrolleret, og der vil blive foretaget en mundtlig undersøgelse for at screene for komplikationer. En uddannet registreret diætist (fra et af centrene) vil diskutere mund- og klovsyge med patienter og også distribuere en undersøgelse for at rapportere om genstande, der ikke er spist og ekstra indtaget mad.

På dag 1 (v3) vil der blive taget prøver af blod og GCF. Sygehistorie, bivirkninger og samtidig medicin vil blive kontrolleret, en mundtlig undersøgelse vil blive gennemført for at screene for komplikationer.

På dag 7 (v4) vil der blive taget prøver af blod og GCF. Sygehistorie, bivirkninger og samtidig medicin vil blive kontrolleret, en mundtlig undersøgelse vil blive gennemført for at screene for komplikationer.

På dag 45±5 (v5) vil der blive taget prøver af blod og GCF. Mundhygiejneinstruktioner vil blive forstærket, og der vil blive givet en session med supragingival afskalning med polering. Den anden cyklus af MKS vil blive startet hos patienter i testgruppen. Sygehistorie, bivirkninger og samtidig medicin vil blive kontrolleret, en mundtlig undersøgelse vil blive gennemført for at screene for komplikationer.

På dag 85 ±5 (v6) vil den tredje cyklus af MKS blive startet hos patienter i testgruppen. Sygehistorie, uønskede hændelser og samtidig medicin vil blive kontrolleret, mundhygiejneinstruktioner vil blive forstærket, og der vil blive givet en session med supragingival afskalning med polering.

På dag 90 ±5 (v7) vil fuldmundsparodontale kortlægningsmålinger blive registreret. Der vil blive taget blodprøver og GCF-prøver. Mundhygiejneinstruktioner vil blive styrket, og om nødvendigt vil der blive givet en session med understøttende parodontal terapi. Sygehistorie, bivirkninger og samtidig medicin vil blive kontrolleret, en mundtlig undersøgelse vil blive gennemført for at screene for komplikationer.

På dag 180 ±10 (v8) vil fuldmundsparodontale kortlægningsmålinger blive registreret på 6 steder pr. tand: sonderingsdybde, recession (mm) og blødning efter sondering. Der vil blive udtaget blod-, GCF-, plak- og afføringsprøver. Mundhygiejneinstruktioner vil blive styrket. Sygehistorie, bivirkninger og samtidig medicin vil blive kontrolleret, en mundtlig undersøgelse vil blive gennemført for at screene for komplikationer.

*Patienter vil blive ringet op en eller to gange under hver MKS-cyklus for at kontrollere, at alt forløber korrekt og for at løse eventuelle problemer eller bekymringer, de måtte have.

Opfølgningsprocedurer

Hvis en deltager går glip af flere (2/3) besøg, kan de betragtes som et frafald. De vil dog indgå i intention-to-treat-analysen.

Definition af studieslut

Undersøgelsen vil være afsluttet, når alle deltagere har afsluttet alle faser af den kliniske periode, og bearbejdningen/analysen af ​​det biologiske materiale og kliniske score er blevet udført.

Prøveindsamling/mærkning/logning

Prøverne vil blive indsamlet under studiebesøget fra patienten af ​​kvalificerede tandlæger fra Catalunya International University, Complutense University of Madrid, University of Santiago de Compostela, University of Murcia og University of Granada, som vil deltage i denne undersøgelse. Under indsamlingen af ​​alle prøvetyper vil der blive brugt korrekt håndhygiejne, monterede handsker og sterile engangsundersøgelsesartikler for at sikre integriteten af ​​de indsamlede prøver og sikkerheden for undersøgeren og deltageren. Pseudo-anonymiserede mærkede rør vil blive klargjort forud for hvert besøg, med etiketten bestående af deltagernummeret præfikset med prøvetypebetegnelsen, f.eks. G for GCF, B for blod, S for spyt, SubP for sub-gingival plak osv. Prøveudtagning vil finde sted ved hvert besøg inden klinisk undersøgelse finder sted, for at forhindre, at den fysiske manipulation forstyrrer prøveudtagningsstedet eller forårsager let gingival blødning, som kan kontaminere prøven, der indsamles. GCF Periopaper® Strips (Pro-flow Inc., Amityville, New York, USA) vil blive placeret i tandkødsspalten på tænderne med det dybeste lommested (bukkale aspekter) i hver kvadrant. De vil derefter straks blive målt på en kalibreret Periotron 8000 (Pro-Flow Inc., Amityville, New York, USA) elektronisk transducer, som vil kvantificere mængden af ​​opsamlet GCF. Når først de er målt, vil GCF-strimlerne til det besøg alle blive opbevaret ved -80ºC i et enkelt 2 ml rør og samlet til yderligere analyse. 4 ml venøst ​​blod vil blive opsamlet fra deltagerens arm i Hemogard sikkerhedslukning evakuerede sterile vacutainere, der indeholder antikoagulanten K2 Kaliumsalt af EDTA (Ethylen Diamine Tetra Eddikesyre), som er blevet spraycoatet på den indvendige overflade af røret. Prøver vil blive taget af erfarne og uddannede phlebotomists. For at reducere denne risiko for besvimelse vil deltagerne være på en semi-tilbagelænet sokkel under hele prøvetagningen og i fem minutter efter prøvetagningen. En forsker vil til enhver tid være til stede sammen med deltageren for at sikre, at der ikke opstår fald eller skader i tilfælde af besvimelse. Brugte nåle kasseres i en sikker skraldespand. Prøverne til serum vil blive centrifugeret i 10 minutter ved 11.000 RPM og derefter straks opdelt i 0,2 ml - 0,5 ml alikvoter og opbevaret i en fryser ved -80 °C, indtil de kræves til analyse. Sub-gingival plakprøver vil blive opsamlet fra tandens bukkale overflade af undersøgelsestandlægen ved hjælp af en steril curette, henholdsvis fra under tandkødsmarginen. Plakken vil blive indsamlet fra tænder med det dybeste lommested (bukkal overflade) ved hvert studiebesøg. Disse tænder blev udvalgt til at have en god blanding af kindtænder og fortænder. Den opsamlede plak fra disse fire tænder samles i 1 ml steril 0,1x Tris-EDTA og opbevares ved -80ºC. Deltagerne vil blive forsynet med hjemmeindsamlingssæt til prøveudtagning af afføring i konserveringsopløsning ([http://www.microbiome-standards.org)] http://www.microbiome- standards.org) og denne prøve vil blive sendt til det lokale laboratorium inden for 7 dage efter afhentning. Ved modtagelse af afføringsprøver i laboratoriet vil prøverne blive opbevaret ved -80 C. Alle biologisk forurenede engangsartikler vil blive kasseret i den korrekte biologiske farebeholder til behandling og fjernelse. Alle prøver, der tages, vil blive logget på deltagerens hardcopy CRF for det pågældende studiebesøg, med dato og tidspunkt for afhentning registreret og initialerne for den indsamlende undersøgelsestandlæge. Dette vil også blive logget på undersøgelsens Excel-regneark. Hvis en bestemt prøve ikke er i stand til at blive taget ved det besøg, vil årsagen hertil blive angivet i det relevante afsnit om "Yderligere bemærkninger" i CRF.

Prøveanalyseprocedurer

Alle eksperimenter vil blive udført i mikrobiome- og spytlaboratorierne, Guy's Hospital. GCF-prøver vil blive optøet og elueret i PBS (pH 7,2±0,2) suppleret med Easypack Protease Inhibitor Cocktail (Roche) som beskrevet i Curtis et al. 1988. Kort fortalt placeres periopaper-strimlerne i et perforeret 0,5 ml mikrocentrifugerør, som vil blive holdt inde i et 1,5 ml rør. Elueringsbufferen (50μL) tilsættes strimlerne og placeres i en vortexryster i 2 minutter før centrifugering i 15 minutter ved 11.000 rpm og 4 ̊C. Centrifugeringen vil blive gentaget med yderligere 50 μL af elueringsbufferen tilføjet til strimlerne for at give ~90 μL totalt elueret GCF. Proteinkoncentrationen vil blive kvantificeret ved hjælp af en LVis-plade (BMG Labtech CLARIOstar) kalibreret med bovint serumalbumin (Sigma). GCF-analyse for udvalgte analytter vil blive udført af Luminex. Prøver vil blive behandlet på KCL Center for Host-Microbiome Interactions, fl.17 Guys Tower Wing. Plak- og afføringsprøver vil gennemgå DNA-ekstraktion efter standardprocedurer i vores laboratorium og vil blive analyseret ved hjælp af næste generations DNA-sekventering for at karakterisere den subgingivale mikrobiota med henblik på at identificere og bestemme niveauerne af vigtige periodontale bakterielle patogener og mikrobielle ændringer i hele samfundet i de behandlede steder med både test- og kontrolprotokoller. Blodprøver vil blive testet for cytokiner, akut fase proteiner og inflammatoriske markører ved hjælp af forskellige teknikker såsom Western blots eller enzym-linked immunosorbent assays (ELISA), som vil bestemme tilstedeværelsen og mængden af ​​disse i blodet. Gingival Crevicular Fluid vil blive analyseret for inflammatoriske mediatorer, antistoffer, peptider og cytokiner, igen ved brug af teknikker som ELISA. Cirkulerende niveauer af IGF-1, fastende blodsukkerniveau, blod-β-Hydroxybutyrat niveau vil blive vurderet for at overvåge overensstemmelsen med MKS.

ELISA (high-sensitivity two-site enzym-linked immunosorbent assay): IL-6 påvisning.

Cobas Integra 700 (automatiseret immuno-turbidimetrisk højfølsomhedsanalyse): HsCRP-detektion.

De data, der genereres fra disse eksperimenter, vil blive lagret på sikre, adgangskodebeskyttede King's computere, inklusive dem i spyt- og mikrobiomelaboratorierne og den bærbare computer til undersøgelse, der leveres af King's.

Prøveopbevaringsprocedurer

Blod-, spyt-, plak- og GCF-prøver vil blive opbevaret ved -80ºC i sikre, aflåste HTA-frysere i laboratorierne på International University of Catalunya, Complutense University of Madrid, University of Santiago de Compostela og University of Granada. Dette vil sikre langsigtet stabilitet i beredskabet til prøvebehandling. Efter indsamling vil afføringsprøver blive sendt til hvert deltagende center af patienter i forseglede præstemplede kuverter. Efterhånden som de opbevares, vil alle prøver få deres fysiske integritet kontrolleret, og prøver, der skal fryses, vil derefter blive logget på en adgangskodebeskyttet, sikker computerdatabase, som registrerer deres placering i fryseren og tidspunktet/datoen, de blev opbevaret. En fysisk papirkopi, der optager de prøver, der gemmes, vil også blive vist på CRF. Opbevaring, transport, brug og endelig bortskaffelse af den leverede prøve vil blive udført i overensstemmelse med UK Human Tissue Act 2004 og EU's vævs- og celledirektiver. Hvis nogen prøver ikke behandles med det samme, vil de blive pseudo-anonymt gemt til yderligere analyse på et senere tidspunkt. Prøver vil blive overført til spytlaboratoriet, Guy's Hospital og vil blive arkiveret i 10 år efter færdiggørelsen. Efter at den etiske godkendelse for undersøgelsen er udløbet, vil blod-, spyt- og GCF-prøverne blive bortskaffet i overensstemmelse med Human Tissue Act 2004 og eventuelle ændringer heraf eller overført til en vævsbank.

Forsendelse af prøve fra Spanien til Storbritannien

Prøver vil blive placeret i en iglo, der kan indeholde tilstrækkeligt med is/tøris til at sikre, at prøverne holdes ved den korrekte temperatur i længere tid end den estimerede rejsetid. Derefter er polystyren-igloen delvist fyldt med is/tøris, hvilket giver plads til prøver og ekstra is. Prøver kan anbringes i en forseglet plastikpose for at hjælpe med katalogisering. Igloen fyldes derefter med tøris for at dække prøverne og en forsendelsesformular og derudover medfølger en kopi af adresseetiketten i en forseglet plastikprøvepose. Et låg sættes på igloen og fastgøres med pakningstape. Herefter pakkes igloen ind i kraftigt brunt indpakningspapir, og både en adresselabel og farelabels med meget lav temperatur påsættes før leveringen. Det vil blive valgt til det hurtigste transportmiddel (f.eks. fly) for at fuldføre forsendelsen så hurtigt som muligt.

Vurdering af sikkerhed

Efterforskerne forudser ikke nogen væsentlige risici for den deltager, der er involveret i prøvetagningen, herunder blodprøver, da disse er veletablerede procedurer. Baseret på tidligere litteratur kan en mulig risiko vedrøre nogle lette/moderate systemiske bivirkninger forårsaget af MKS-diæten, herunder træthed, svaghed og hovedpine. Der er også en lille risiko for at besvime under eller efter blodprøvetagning. For at reducere denne risiko vil deltagerne være på en semi-tilbagelænet sokkel under hele prøvetagningens varighed og i fem minutter efter prøvetagningen. En forsker vil til enhver tid være til stede sammen med deltageren for at sikre, at der ikke opstår fald eller skader i tilfælde af besvimelse. Hvis der opstår en nålestiksskade på undersøgeren under udtagningen af ​​blodprøven, eller der opstår en ridseskade, vil lokale procedurer blive implementeret for at reagere på en sådan hændelse. Der forventes ingen alvorlige bivirkninger i løbet af undersøgelsen.

Etikrapportering

En uønsket hændelse er enhver ugunstig og utilsigtet tegn, symptomer eller sygdom forbundet med undersøgelsen. Skulle der opstå en uønsket hændelse, såsom besvimelse under udtagning af blod, vil investigator informere chefinvestigatoren for medtagelse i undersøgelsesfilen CRF. En alvorlig bivirkning (SAE) er en hændelse, der forårsager død, kræver hospitalsindlæggelse af deltageren, forårsager vedvarende handicap eller forårsager en fødselsdefekt. Skulle dette ske, vil en rapport blive logget inden for 24 timer efter kendskab til hændelsen og en rapport til den etiske komité inden for 15 dage efter kendskab til hændelsen. Skemaet skal udfyldes på maskinskrift og underskrives af forskningschefen. Den primære REC vil bekræfte modtagelsen af ​​sikkerhedsrapporter inden for 30 dage.

Overholdelse og tilbagetrækning

Emneoverholdelse

Deltagerens overholdelse vil blive vurderet ved hvert studiebesøg. En selvrapporteret sygehistorie vil sikre, at deltageren ikke har foretaget sig nogen handling (f.eks. begyndt at deltage i et andet klinisk forsøg) eller udviklet en tilstand eller begyndt at tage medicin (f.eks. tager systemiske antibiotika), som er forbudt i henhold til udelukkelseskriterierne. Derudover vil overholdelse blive evalueret baseret på blodprøver under hensyntagen til reduktionerne i cirkulerende niveauer af IGF-1. Dette vil blive registreret på en tjekliste på CRF. Hver patient skal udfylde en kostdagbog under hele undersøgelsen, herunder MKS-cyklusser for testpatienter. Manglende udfyldelse af kostdagbogen vil også blive registreret som frafald på grund af kostens afgørende betydning for undersøgelsens validitet. Til sidst, hvis en deltager uventet udebliver fra et studiebesøg, vil de blive bedt om at komme i klinikken ved den næste mulige lejlighed.

Udmeldelse/frafald af fag

Deltagerne kan til enhver tid trække sig fra undersøgelsen. Dette ville ske gennem en mundtlig diskussion mellem deltageren og ethvert af undersøgelsesteamet, og deres beslutning logges på en skriftlig tilbagetrækningsformular. Årsager til tilbagetrækning kan f.eks. skyldes fysisk ubehag eller for stort tidsforbrug. Efter afslutningen af ​​dataanalysen, hvor alle anonymiserede data ville blive indsamlet, ville deltagerne ikke længere være i stand til at trække deres data tilbage fra undersøgelsen, hvilket ville blive gjort klart i den indledende rekrutteringsfase. Seneste dato for dette er i slutningen af ​​undersøgelsen. Visse omstændigheder kan kræve, at undersøgelsesteamet beslutter at trække deltagere ud af forsøget, såsom væsentlig manglende overholdelse af protokollen, f.eks. manglende flere undersøgelsesbesøg eller andre begivenheder, som ville opfylde eksklusionskriterierne. Dette ville indebære at tale med deltageren for at informere og forklare beslutningen for dem, og beslutningen logges på en skriftlig tilbagetrækningsformular. Hvis manglende overholdelse afsløres ved et studiebesøg, vil det også blive logget i afsnittet "Yderligere bemærkninger" i CRF. Emner vil ikke blive erstattet, når enkeltpersoner trækker sig.

Statistiske overvejelser

Beregning af prøvestørrelse

Der er ikke publiceret undersøgelser med anvendelse af mund- og klovsyge hos paradentosepatienter. Derfor er der ingen data om gennemførlighed og påkrævet stikprøvestørrelse tilgængelige i litteraturen. det er meget vanskeligt at estimere, hvad den korrekte undersøgelsesstikprøvestørrelse ville være, og som følge heraf er denne undersøgelse designet som en intern pilot. Mens Browne og medarbejdere (1995) foreslog, at 30 patienter ville være påkrævet som tommelfingerregel for stikprøvestørrelse, fandt Kieser & Wassmer (1996), at en pilotprøvestørrelse mellem 20 og 40 ville minimere den samlede stikprøvestørrelse af den større undersøgelse. Efter forslag fra Julious 2009 vil 12 patienter pr. undersøgelsesarm blive rekrutteret til denne undersøgelse.

Midlertidig analyse og gennemførligheds-/progressionskriterier

Beslutningen om at gå videre med det større forsøg (og den relative stikprøvestørrelse) vil afhænge af gennemførligheds-/progressionskriterierne nedenfor.

FASIBILITY ASPEKTER PROGRESSIONSKRITERIER, DER SKAL OPFYLDES

Villighed til at blive randomiseret ≥ 50 % af de henvendte patienter er enige i Selvrapporteret overensstemmelse med diæt ≥ 66 % af testgruppepatienter selvrapporterer overensstemmelse (defineret som ikke mere end 1 dag, hvor diæten ikke blev fulgt) Testet overensstemmelse med diæt ≥ 66 % af testgruppepatienter viser compliance baseret på blodprøve (defineret som 20 til 30 % reduktioner i cirkulerende niveauer af IGF-1) (Wei 2017) Accept af blodprøver ≥ 66 % af rekrutterede patienter får taget alle blodprøver i henhold til protokol. af alvorlige bivirkninger Ingen patienter rapporterer alvorlige bivirkninger, som kan være relateret til testdiæten

Hvis alle ovenstående kriterier er opfyldt, vil der blive udført analyse af eksisterende data i op til 3 måneder ved brug af data fra de 24 'interne pilot' patienter. Middelværdier og standardafvigelser af CRP-værdier efter 3 måneder vil blive brugt til at beregne den nødvendige stikprøvestørrelse for det større forsøg. Opfølgning af undersøgelsens patienter vil fortsætte op til 6 måneder efter behandlingen. Skulle forskellen mellem grupperne for det primære resultat (CRP efter 3 måneder) være minimal, hvilket resulterer i en meget stor stikprøvestørrelse, kan der træffes beslutning om ikke at gå videre til rekruttering af en større gruppe patienter, og rekrutteringen vil blive stoppet. De patienter, der stadig er i undersøgelsen, vil dog blive fulgt op indtil den sidste undersøgelsesopfølgning (180 dage).

Statistisk analyse

Det primære resultat af undersøgelsen er cirkulerende CRP-niveauer 3 måneder efter behandling (test vs. kontrol). Den interne pilot-/gennemførlighedsdel af undersøgelsen skal dog først afsluttes, før det overvejes, om man skal fortsætte med en fuld-powered undersøgelsesstikprøvestørrelse. Hvis gennemførlighedskriterierne er opfyldt, vil forskellen i CRP-niveauer 3 måneder efter behandling mellem grupperne blive brugt til prøvestørrelsen, og en formel statistisk plan vil blive formuleret. Forskellige statistiske pakker vil blive brugt til forskellige formål, Stata 14 (StataCorp LLC, College Station, Texas, USA) vil være hovedpakke og R (med R-Studio plugin), vil blive brugt til yderligere analyser, begge med specifikke rutiner skabt til denne undersøgelse. Shapiro-Wilk-testen vil blive anvendt for at verificere, om de analyserede kvantitative variabler følger en normalfordeling, og logaritmisk transformation vil blive udført i dem, der ikke følger den. Befolkningens og undersøgelsesgruppernes profil vil blive beskrevet. Resultaterne af de kvalitative variable vil blive udtrykt i proportioner, og de kvantitative variable vil blive udtrykt som middelværdier og standardafvigelse, inklusive 95 % konfidensintervaller. Fordelingen af ​​populationen for hver af de kliniske, biokemiske og mikrobiologiske parametre vil også blive opnået. Til den bivariate analyse vil chi-kvadrat-testen blive brugt til at bestemme, om der er en statistisk signifikant sammenhæng mellem to kvalitative variable, dataene vil blive præsenteret som kontingenstabeller, når Chi-kvadrat-testen ikke opfylder validitetsbetingelserne Fishers eksakte test vil blive anvendt.

For at sammenligne middelværdierne af to uafhængige variabler for intergruppeanalyser, vil Elevens T-test blive brugt under hensyntagen til Elevens T-test for parrede prøver i interne gruppeanalyser. Hvis de normale antagelser ikke er opfyldt, vil den ingen parametriske "Mann-Whitney U"-test blive anvendt. Til intragruppe analyser vil ANOVA for gentagne mål eller Friedman test blive brugt. Multivariat analyse vil blive udført ved hjælp af en multipel lineær regressionsmodel og ordinal logistisk regression, der introducerer de uafhængige variable med et lavere signifikansniveau på 0,20. Betingelserne vil blive kontrolleret ved residualanalyse af heteroskedasticitet og linearitet. Niveauet af statistisk signifikans for denne undersøgelse vil være p<0,05.

Stop/ophørsregler og brud af randomiseringskode

Efterforskerne forudser ingen risici forbundet med prøveindsamlingen og MKS, da disse er veletablerede procedurer. Derfor forudser efterforskerne, at ingen del af undersøgelsen skal afbrydes, og at forsøget ikke skal stoppes på grund af deltagernes sikkerhedsproblemer. Men da mund- og klovsyge ikke er blevet testet hos paradentosepatienter, vil der i det usandsynlige tilfælde, at der er en alvorlig bivirkning, en rapport til sponsoren blive logget inden for 24 timer efter kendskab til hændelsen og en rapport til den etiske komité inden for 15 dage læring af begivenheden. Der vil herefter blive taget stilling til, hvorvidt undersøgelsen skal stoppe i samarbejde med disse instanser.