Régime imitant le jeûne et parodontite (FMD) (FMD)

Introduction

La parodontite est une maladie inflammatoire du parodonte d’origine microbienne. Il a été démontré que l'inflammation associée à la parodontite ne se limite pas au parodonte, mais peut avoir des conséquences considérables sur le reste du corps, et que cela peut être en partie dû à la propagation systémique de micro-organismes buccaux. Les étapes 1 et 2 du traitement parodontal sont également associées à une réponse inflammatoire en phase aiguë à court terme, caractérisée par une élévation des marqueurs inflammatoires circulants en phase aiguë, qui à son tour est suivie, en cas de succès, par une réduction à plus long terme de ces molécules. À moyen et long terme, cela s'accompagne de modifications d'autres marqueurs de la santé vasculaire périphérique ainsi que d'améliorations du contrôle métabolique durant au moins 12 mois. On sait que la parodontite a une relation bidirectionnelle avec les perturbations métaboliques et la dérégulation. Un travail très récent a corroboré que la parodontite est associée à une inflammation systémique, mesurée par les taux sériques de protéine C-réactive (CRP). De plus, il a été rapporté qu'un traitement intensif non chirurgical de la parodontite (étapes 1 et 2) entraînait une réduction progressive de la CRP après 90 jours avec une augmentation modérée à 180 jours. On pense que des améliorations du contrôle métabolique pourraient également améliorer les résultats parodontaux, mais les mécanismes exacts à l’origine de cet effet ne sont pas entièrement clairs. Plusieurs recherches humaines et expérimentales ont également été publiées concernant les effets possibles de la nutrition sur la prise en charge de la parodontite. Une étude sur des singes a révélé qu'une restriction calorique alimentaire à long terme (régime enrichi en vitamines et minéraux) atténue l'inflammation clinique et réduit le degré de dégradation parodontale secondaire à une provocation microbienne aiguë. Cependant, dans une autre étude expérimentale sur des singes, un régime hypocalorique à long terme (30 % de moins de l'apport calorique quotidien plus vitamines et minéraux) a semblé réduire de manière différentielle la production de médiateurs inflammatoires locaux et le risque de maladie parodontale inflammatoire chez les hommes mais pas chez les femmes. De plus, une récente revue systématique sur des modèles animaux a conclu que les macronutriments qui ont un effet sur le stress oxydatif ou sur le système immunitaire (c'est-à-dire l'acide gras n-3) semblent être importants pour la prévention ou le traitement de la parodontite. En termes de recherche humaine, un groupe coréen, après une intervention de contrôle du poids de quatre semaines chez des personnes obèses en bonne santé parodontale, a observé une réduction de la métalloprotéinase matricielle (MMP)-8, de la MMP-9 et de l'interleukine-1β (IL-1β) chez liquide creviculaire gingival (GCF). Une équipe allemande a rapporté qu'un régime alimentaire composé d'un faible apport en glucides, d'une richesse en acides gras oméga 3 et en fibres, de valeurs plus élevées en vitamines C et D, d'une réduction des protéines animales et d'un apport ciblé de plantes contenant des nitrates pourrait conduire à une réduction significative de l’inflammation parodontale et gingivale, même si les paramètres sérologiques inflammatoires et le microbiome sous-gingival ne semblent pas affectés. Plus récemment, une étude a révélé qu'il n'y avait pas d'association globale entre les habitudes alimentaires occidentales (caractérisées par une consommation plus élevée de viande transformée, de viande rouge, de beurre, de produits laitiers riches en matières grasses, d'œufs et de céréales raffinées) ou les habitudes alimentaires prudentes (caractérisées par une consommation plus élevée de légumes, de fruits, de légumineuses, de céréales complètes, de poisson et de volaille) et parodontite ; cependant, lorsque l’on considère uniquement les personnes obèses, un régime alimentaire occidental est associé à un risque plus élevé de parodontite. Une autre enquête très récente, basée sur l’utilisation d’un indice inflammatoire alimentaire, a montré que la consommation d’un régime pro-inflammatoire était associée à une parodontite modérée à sévère dans la population adulte générale des États-Unis. Un nouveau mode de jeûne a été introduit afin d'augmenter l'observance du patient, car les gens ne sont généralement pas en mesure de suivre un régime strict pendant une longue période. En particulier, le régime imitant le jeûne (FMD), composé de 30 à 50 % de l'apport calorique normal pendant 4 à 7 jours consécutifs suivi d'une période de réalimentation à volonté une fois par mois, a montré des effets bénéfiques très prometteurs en termes de réduction du risque. facteurs de vieillissement, de diabète, d’auto-immunité, de maladies cardiovasculaires, de neurodégénérescence et de cancer. Dans l’ensemble, il existe encore une incertitude quant au rôle potentiel du jeûne périodique sur les paramètres cliniques et inflammatoires parodontaux. À notre connaissance, aucune étude n'a étudié l'effet potentiel de la fièvre aphteuse sur la réponse systémique et parodontale après un traitement contre la parodontite.

Objectifs

L'objectif principal de cette étude est de tester si un régime imitant le jeûne peut influencer la réponse systémique et parodontale après un traitement parodontal non chirurgical. L'hypothèse nulle est qu'un régime imitant le jeûne ne modifie pas la réponse inflammatoire post-traitement locale et systémique.

Étudier le design

Il s'agit d'une étude clinique randomisée en double aveugle (évaluateur des résultats et statisticien), multicentrique avec des groupes parallèles et une ration d'allocation de 1 : 1, avec pilote interne. Tous les patients recrutés recevront le même protocole de thérapie parodontale (étapes 1 et 2). Un groupe (test) sera soumis à trois cycles de FMD. Le programme FMD est un programme de régime à base de plantes conçu pour obtenir des effets similaires à ceux du jeûne tout en fournissant à la fois des macro et des micronutriments pour minimiser le fardeau du jeûne et des effets indésirables. Le FMD est composé à 100 % d'ingrédients généralement considérés comme sûrs (GRAS) et comprend des soupes exclusives à base de légumes, des barres énergétiques, des boissons énergisantes, des collations aux crackers, des olives, des tisanes et des suppléments. Tous les éléments à consommer quotidiennement sont emballés individuellement pour permettre aux sujets de choisir quand manger tout en évitant de consommer accidentellement les composants du jour suivant. Le FMD consiste en un régime de 5 jours qui fournit environ 1 100 kilocalories pour le premier jour ; environ 750 kilocalories par jour du deuxième au cinquième jour. Au contraire, l'autre groupe (témoin) poursuivra son alimentation normale.

Sélection du sujet

Il s'agit d'une étude multicentrique. Les participants seront sélectionnés par l'Université internationale de Catalogne (UIC), l'Université Complutense de Madrid (UCM), l'Université de Saint-Jacques-de-Compostelle, l'Université de Murcie et le personnel clinique/étudiants de l'Université de Grenade parmi les patients atteints de parodontite fréquentant les hôpitaux respectifs. Les enquêteurs s'attendent à ce que 24 participants éligibles soient disponibles par an et supposent que 70 % d'entre eux accepteront de participer à l'essai après avoir exprimé leur intérêt initial.

Procédures d'étude

Sujet de recrutement

Les patients de l'Université internationale de Catalogne, de l'Université Complutense, de Saint-Jacques-de-Compostelle et des universités de Grenade seront approchés individuellement pour le recrutement sur le campus et au sein de la faculté dentaire. Après avoir exprimé un premier intérêt, les participants potentiels recevront une fiche d'information et la possibilité de poser des questions aux membres de l'équipe d'étude par e-mail ou par téléphone. S'ils expriment ensuite le souhait de participer, ils seront invités à une visite de sélection. Chaque individu disposera d'au moins 24 heures et jusqu'à une semaine pour décider s'il souhaite participer. Les individus seront remboursés pour leur temps avec un paiement à la fin de l'étude.

Procédures de dépistage

Lors de la visite de sélection, le consentement sera demandé par le candidat formé ou le dentiste de l'étude, qui sera enregistré via un formulaire de consentement écrit du participant détaillant la procédure complète de l'essai et une liste de contrôle d'accord pour chaque méthode de collecte de données. Une fois le consentement donné, chaque participant inscrit sera enregistré sur un formulaire de journal des participants. La sélection initiale visera à garantir que chaque individu se conforme aux critères d'inclusion et d'exclusion décrits. Ceci sera évalué en prenant une histoire orale et sera enregistré sur un formulaire papier de journal de dépistage. Les participants devront subir un examen parodontal auprès du dentiste de l'étude pour garantir leur adéquation.

Procédures de randomisation et attribution secrète

La randomisation centrale initiale sera effectuée à l'aide de la méthode « Enveloppe scellée » par du personnel non directement impliqué dans l'étude, à l'hôpital Guy. Pour les facteurs d'influence importants (« centre »), une randomisation stratifiée sera effectuée comme recommandé. Aucune stratification par âge ne sera effectuée, car pour les échantillons de petite taille, la stratification doit être limitée à un ou très peu de facteurs et parce que l'influence de l'âge est limitée par la conception de l'étude et sera ajustée dans les analyses statistiques. Pour chaque centre, les patients seront répartis dans l'un des deux groupes de traitement en utilisant une liste de randomisation préalablement préparée par le statisticien de l'étude. La liste sera générée par randomisation bloquée. Une enveloppe scellée sera utilisée dans chaque centre pour garantir la dissimulation de l'attribution. Le participant sera affecté à un traitement de test ou de contrôle entre les jours -7/-10 et le jour 0. Le thérapeute sera informé de l'attribution du traitement en ouvrant l'enveloppe au début du rendez-vous de traitement.

Programme de chaque visite

Les participants qui ont exprimé un certain intérêt à participer à des discussions en face-à-face ou à des réponses à des publicités seront invités à une visite de sélection. Cela aura lieu, comme toutes les visites d'étude, à l'Hôpital général de Catalogne (Barcelone) et aux unités d'odontostomatologie (Clinica de Odontologia) de Madrid, Saint-Jacques-de-Compostelle, Murcie et Grenade, et cela devrait prendre environ 45 minutes. Cela aura lieu à une heure et une date mutuellement convenables pour le participant potentiel et le dentiste de l'étude, dans les limites de la disponibilité des espaces cliniques. Ici, ils seront d'abord interrogés sur leurs informations personnelles/antécédents médicaux et subiront un examen dentaire. S'ils sont éligibles, ils seront informés du début de la prochaine étape de l'étude et suite à un rendez-vous leur sera donné afin de commencer l'enquête. Le traitement sera assuré par les étudiants de troisième cycle du Master de Parodontologie de chaque centre.

Une à deux semaines plus tard, le jour -7/-10 (rendez-vous de base ou visite 1), le consentement éclairé sera donné et signé. Des échantillons de sang, de GCF, de plaque et de selles seront collectés. Les antécédents médicaux, les événements indésirables et les médicaments concomitants seront vérifiés et un examen oral sera effectué, y compris l'enregistrement du nombre de dents et sur 6 sites par profondeur de sondage dentaire, récession (mm) et saignement après sondage. Une prophylaxie, une motivation et des instructions d'hygiène bucco-dentaire très superficielles seront fournies.

Le jour 0 (matin) (visite 2), les patients affectés au groupe test commenceront la fièvre aphteuse pendant 5 jours consécutifs. Tous les patients subiront des procédures d'instrumentation sous-gingivale sur toute la bouche (PMPR) et des instructions d'hygiène plus détaillées seront renforcées. Les antécédents médicaux, les événements indésirables et les médicaments concomitants seront vérifiés et un examen oral sera effectué afin de dépister les complications. Un diététiste qualifié (de l'un des centres) discutera de la fièvre aphteuse avec les patients et distribuera également une enquête pour signaler les aliments non consommés et les aliments supplémentaires consommés.

Le jour 1 (v3), des échantillons de sang et de GCF seront prélevés. Les antécédents médicaux, les événements indésirables et les médicaments concomitants seront vérifiés, un examen oral sera réalisé afin de dépister les complications.

Au jour 7 (v4), des échantillons de sang et de GCF seront prélevés. Les antécédents médicaux, les événements indésirables et les médicaments concomitants seront vérifiés, un examen oral sera réalisé afin de dépister les complications.

Au jour 45 ± 5 (v5), des échantillons de sang et de GCF seront prélevés. Les consignes d'hygiène bucco-dentaire seront renforcées et une séance de détartrage supragingival avec polissage sera assurée. Le deuxième cycle de fièvre aphteuse sera démarré chez les patients du groupe test. Les antécédents médicaux, les événements indésirables et les médicaments concomitants seront vérifiés, un examen oral sera réalisé afin de dépister les complications.

Au jour 85 ± 5 (v6), le troisième cycle de fièvre aphteuse sera démarré chez les patients du groupe test. Les antécédents médicaux, les événements indésirables et les médicaments concomitants seront vérifiés, les consignes d'hygiène bucco-dentaire seront renforcées et une séance de détartrage supragingival avec polissage sera proposée.

Au jour 90 ± 5 (v7), les mesures de cartographie parodontale sur toute la bouche seront enregistrées. Des échantillons de sang et des échantillons de GCF seront prélevés. Les consignes d'hygiène bucco-dentaire seront renforcées et, si nécessaire, une séance de thérapie parodontale de soutien sera proposée. Les antécédents médicaux, les événements indésirables et les médicaments concomitants seront vérifiés, un examen oral sera réalisé afin de dépister les complications.

Au jour 180 ± 10 (v8), les mesures de cartographie parodontale de toute la bouche seront enregistrées sur 6 sites par dent : profondeur de sondage, récession (mm) et saignement après sondage. Des échantillons de sang, de GCF, de plaque et de selles seront prélevés. Les consignes d’hygiène bucco-dentaire seront renforcées. Les antécédents médicaux, les événements indésirables et les médicaments concomitants seront vérifiés, un examen oral sera réalisé afin de dépister les complications.

*Les patients seront appelés une ou deux fois au cours de chaque cycle de fièvre aphteuse pour vérifier que tout se passe correctement et pour résoudre tout problème ou préoccupation qu'ils pourraient avoir.

Procédures de suivi

Si un participant manque plusieurs (2/3) visites, il peut être considéré comme un abandon. Cependant, ils seront inclus dans l’analyse en intention de traiter.

Définition de fin d’études

L'étude sera terminée une fois que tous les participants auront terminé toutes les phases de la période clinique et que le traitement/analyse du matériel biologique et des scores cliniques aura été effectué.

Collecte d'échantillons/étiquetage/enregistrement

Les échantillons seront collectés lors de la visite d'étude du patient par des dentistes qualifiés de l'Université internationale de Catalogne, de l'Université Complutense de Madrid, de l'Université de Saint-Jacques-de-Compostelle, de l'Université de Murcie et de l'Université de Grenade qui participeront à cette étude. Lors de la collecte de tous les types d'échantillons, une bonne hygiène des mains, des gants ajustés et des articles d'examen stériles à usage unique seront utilisés pour garantir l'intégrité des échantillons collectés et la sécurité de l'examinateur et du participant. Des tubes étiquetés pseudo-anonymisés seront préparés avant chaque visite, l'étiquette étant composée du numéro de participant préfixé par la désignation du type d'échantillon, par ex. G pour GCF, B pour sang, S pour salive, SubP pour plaque sous-gingivale etc. Le prélèvement d'échantillons aura lieu à chaque visite avant l'examen clinique, afin d'éviter que la manipulation physique ne perturbe le site de prélèvement ou ne provoque une légère gingivale. saignements pouvant contaminer l’échantillon prélevé. Les bandes GCF Periopaper® (Pro-flow Inc., Amityville, New York, États-Unis) seront placées dans la crevasse gingivale des dents avec le site de poche le plus profond (aspects buccaux) dans chaque quadrant. Ils seront ensuite immédiatement mesurés sur un transducteur électronique calibré Periotron 8000 (Pro-Flow Inc., Amityville, New York, USA), qui quantifiera la quantité de GCF collectée. Une fois mesurées, les bandelettes GCF pour cette visite seront toutes conservées à -80 °C dans un seul tube de 2 ml et regroupées pour une analyse plus approfondie. 4 ml de sang veineux seront collectés dans le bras du participant dans des vacutainers stériles évacués à fermeture de sécurité Hemogard, contenant l'anticoagulant K2 Sel de potassium d'EDTA (acide éthylène diamine tétra acétique) qui a été pulvérisé sur la surface intérieure du tube. Les échantillons seront prélevés par des phlébotomistes expérimentés et formés. Pour réduire ce risque d'évanouissement, les participants seront sur un socle semi-incliné pendant toute la durée du prélèvement et pendant cinq minutes après le prélèvement. Un chercheur sera présent avec le participant à tout moment pour s'assurer qu'aucune chute ou blessure ne soit subie en cas d'évanouissement. Les aiguilles usagées seront jetées dans un bac sécurisé pour objets tranchants. Les échantillons de sérum seront centrifugés pendant 10 minutes à 11 000 tr/min puis immédiatement divisés en aliquotes de 0,2 ml à 0,5 ml et conservés au congélateur à -80 °C, jusqu'à ce qu'ils soient nécessaires à l'analyse. Des échantillons de plaque sous-gingivale seront prélevés sur la surface buccale de la dent par le dentiste de l'étude à l'aide d'une curette stérile, respectivement sous le bord gingival. La plaque sera collectée sur les dents présentant le site de poche le plus profond (surface buccale) à chaque visite d'étude. Ces dents ont été sélectionnées pour avoir un bon mélange de molaires et d'incisives. La plaque collectée sur ces quatre dents sera regroupée dans 1 ml de Tris-EDTA 0,1x stérile et conservée à -80 ° C. Les participants recevront des kits de prélèvement à domicile pour l'échantillonnage des selles dans une solution de conservation ([http://www.microbiome-standards.org)] http://www.microbiome- standards.org) et cet échantillon sera envoyé au laboratoire local dans les 7 jours suivant le prélèvement. Dès réception des échantillons de selles au laboratoire, les échantillons seront conservés à -80 °C. Tous les articles jetables biologiquement contaminés seront jetés dans le bac approprié pour les risques biologiques pour traitement et élimination. Tous les échantillons prélevés seront enregistrés sur le CRF papier du participant pour cette visite d'étude, avec la date et l'heure du prélèvement enregistrées et les initiales du dentiste de l'étude collectrice. Ceci sera également enregistré sur la feuille de calcul Excel de l'étude. Si un échantillon particulier ne peut pas être prélevé lors de cette visite, la raison en sera indiquée dans la section appropriée « Notes supplémentaires » du CRF.

Procédures d'analyse des échantillons

Toutes les expériences seront menées dans les laboratoires Microbiome et Salivaire de Guy's Hospital. Les échantillons de GCF seront décongelés et élués dans du PBS (pH 7,2 ± 0,2) complété par le cocktail d'inhibiteurs de protéase Easypack (Roche) comme décrit dans Curtis et al. 1988. En bref, les bandes de périopapier seront placées dans un tube de microcentrifugeuse perforé de 0,5 ml qui sera maintenu à l'intérieur d'un tube de 1,5 ml. Le tampon d'élution (50μL) sera ajouté sur les bandelettes et placé dans un agitateur vortex pendant 2 minutes avant centrifugation pendant 15 minutes à 11 000 tr/min et 4 ̊C. La centrifugation sera répétée avec 50 μL supplémentaires de tampon d’élution ajoutés aux bandelettes, pour produire environ 90 μL de GCF élué total. La concentration en protéines sera quantifiée à l'aide d'une plaque LVis (BMG Labtech CLARIOstar) calibrée avec de l'albumine sérique bovine (Sigma). L'analyse GCF pour les analytes sélectionnés sera effectuée par Luminex. Les échantillons seront traités au KCL Center for Host-Microbiome Interactions, fl.17 Guys Tower Wing. Les échantillons de plaque et de selles subiront une extraction d'ADN selon les procédures standard de notre laboratoire et seront analysés à l'aide du séquençage d'ADN de nouvelle génération pour caractériser le microbiote sous-gingival afin d'identifier et de déterminer les niveaux d'agents pathogènes bactériens parodontaux clés et les changements à l'échelle de la communauté microbienne dans les sites traités. avec des protocoles de test et de contrôle. Les échantillons de sang seront testés pour les cytokines, les protéines de la phase aiguë et les marqueurs inflammatoires à l'aide de diverses techniques telles que les Western blots ou les tests immuno-enzymatiques (ELISA), qui détermineront la présence et la quantité de ceux-ci dans le sang. Le liquide gingival créviculaire sera analysé à la recherche de médiateurs inflammatoires, d'anticorps, de peptides et de cytokines, toujours en utilisant des techniques telles que l'ELISA. Les taux circulants d'IGF-1, la glycémie à jeun et le taux sanguin de β-hydroxybutyrate seront évalués pour surveiller l'observance de la fièvre aphteuse.

ELISA (dosage immuno-enzymatique à deux sites haute sensibilité) : détection de l'IL-6.

Cobas Integra 700 (dosage immuno-turbidimétrique automatisé à haute sensibilité) : détection de HsCRP.

Les données générées par ces expériences seront stockées sur les ordinateurs King sécurisés et protégés par mot de passe, y compris ceux des laboratoires Salivary et Microbiome et l'ordinateur portable d'étude fourni par King's.

Procédures de stockage des échantillons

Les échantillons de sang, de salive, de plaque et de GCF seront conservés à -80 °C dans des congélateurs HTA sécurisés et verrouillés dans les laboratoires de l'Université internationale de Catalogne, de l'Université Complutense de Madrid, de l'Université de Saint-Jacques-de-Compostelle et de l'Université de Grenade. Cela garantira une stabilité à long terme dans la préparation au traitement des échantillons. Après le prélèvement, des échantillons de selles seront envoyés à chaque centre participant par les patients dans des enveloppes scellées et préaffranchies. Au fur et à mesure de leur stockage, l'intégrité physique de tous les échantillons sera vérifiée et les échantillons à congeler seront ensuite enregistrés dans une base de données informatique sécurisée, protégée par mot de passe, qui enregistre leur emplacement dans le congélateur ainsi que l'heure et la date où ils ont été stockés. Une copie physique sur papier enregistrant les échantillons stockés sera également présentée sur le CRF. Le stockage, le transport, l'utilisation et l'élimination finale de l'échantillon fourni seront effectués conformément à la loi britannique sur les tissus humains de 2004 et aux directives européennes sur les tissus et cellules. Si des échantillons ne sont pas immédiatement traités, ils seront stockés de manière pseudo-anonyme pour une analyse plus approfondie à une date ultérieure. Les échantillons seront transférés au laboratoire salivaire de l'hôpital Guy et seront archivés pendant 10 ans après leur achèvement. Une fois l'approbation éthique de l'étude expirée, les échantillons de sang, de salive et de GCF seront éliminés conformément à la loi de 2004 sur les tissus humains et à ses modifications, ou transférés à une banque de tissus.

Expédition d'échantillon de l'Espagne au Royaume-Uni

Les échantillons seront placés dans un igloo contenant suffisamment de glace/neige carbonique pour garantir que les échantillons sont conservés à la bonne température pendant plus longtemps que la durée de trajet estimée. Ensuite, l'igloo en polystyrène est partiellement rempli de glace/neige carbonique, laissant ainsi de la place aux échantillons et à la glace supplémentaire. Les échantillons peuvent être placés dans un sac en plastique scellé pour faciliter le catalogage. L'igloo est ensuite rempli de neige carbonique pour recouvrir les échantillons et un formulaire d'expédition. En outre, une copie de l'étiquette d'adresse dans un sac d'échantillons en plastique scellé est incluse. Un couvercle sera placé sur l'igloo et fixé avec du ruban adhésif d'emballage. Ensuite, l'igloo est emballé dans du papier d'emballage marron résistant et une étiquette d'adresse ainsi que des étiquettes de danger de très basse température sont apposées avant la livraison. Le moyen de transport le plus rapide (par exemple avion) ​​sera sélectionné afin de réaliser l'expédition le plus rapidement possible.

Évaluation de la sécurité

Les enquêteurs ne prévoient aucun risque significatif pour le participant impliqué dans le prélèvement d'échantillons, y compris les échantillons de sang, car il s'agit de procédures bien établies. Sur la base de la littérature antérieure, un risque possible pourrait concerner certains événements indésirables systémiques légers à modérés provoqués par le régime alimentaire contre la fièvre aphteuse, notamment la fatigue, la faiblesse et les maux de tête. Il existe également un léger risque d’évanouissement pendant ou après un prélèvement sanguin. Pour réduire ce risque, les participants seront sur un socle semi-incliné pendant toute la durée de l'échantillonnage et pendant cinq minutes après l'échantillonnage. Un chercheur sera présent avec le participant à tout moment pour s'assurer qu'aucune chute ou blessure ne soit subie en cas d'évanouissement. Si l'examinateur se blesse par piqûre d'aiguille lors du prélèvement de l'échantillon de sang, ou si une blessure par égratignure survient, des procédures locales seront mises en œuvre pour répondre à un tel incident. Aucun événement indésirable grave n'est attendu au cours de l'étude.

Rapports éthiques

Un événement indésirable désigne tout signe, symptôme ou maladie défavorable et involontaire associé à l'étude. En cas d'événement indésirable, tel qu'un évanouissement lors d'une prise de sang, l'investigateur en informera l'enquêteur en chef, pour inclusion dans le dossier d'étude CRF. Un événement indésirable grave (EIG) est un événement qui entraîne le décès, nécessite l'hospitalisation du participant, provoque un handicap persistant ou provoque une anomalie congénitale. Si cela se produit, un rapport sera enregistré dans les 24 heures suivant la connaissance de l'événement et un rapport au comité d'éthique dans les 15 jours suivant la connaissance de l'événement. Le formulaire doit être rempli à la machine et signé par l’enquêteur en chef. Le REC principal accusera réception des rapports de sécurité dans un délai de 30 jours.

Conformité et retrait

Conformité du sujet

La conformité des participants sera évaluée à chaque visite d'étude. Les antécédents médicaux autodéclarés garantiront que le participant n'a pris aucune mesure (par exemple, a commencé à participer à un autre essai clinique), n'a développé aucune maladie ou n'a commencé à prendre des médicaments (par ex. prise d'antibiotiques systémiques) ce qui est interdit par les critères d'exclusion. De plus, l'observance sera évaluée sur la base d'une prise de sang prenant en compte les réductions des taux circulants d'IGF-1. Ceci sera enregistré sur une liste de contrôle sur le CRF. Chaque patient doit remplir un journal alimentaire tout au long de l'étude, y compris les cycles de fièvre aphteuse pour les patients testés. Le fait de ne pas remplir le journal alimentaire serait également enregistré comme un abandon, en raison de l'importance cruciale du régime alimentaire pour la validité de l'étude. Enfin, si un participant ne parvient pas à assister à une visite d'étude de manière inattendue, il lui sera demandé de se rendre à la clinique dès que possible.

Retrait / abandon de matières

Les participants peuvent se retirer de l'étude à tout moment. Cela se ferait par le biais d'une discussion verbale entre le participant et l'un des membres de l'équipe d'étude, et leur décision serait consignée sur un formulaire de retrait écrit. Les raisons du sevrage peuvent être dues à un inconfort physique ou à un engagement de temps trop important par exemple. Une fois l’analyse des données terminée, au cours de laquelle toutes les données anonymisées seraient rassemblées, les participants ne pourraient plus retirer leurs données de l’étude, ce qui serait précisé dès la phase de recrutement initiale. La date limite pour cela est à la fin de l'étude. Certaines circonstances peuvent obliger l'équipe d'étude à décider de retirer les participants de l'essai, comme un non-respect important du protocole, par exemple l'absence de plusieurs visites d'étude, ou d'autres événements qui rempliraient les critères d'exclusion. Cela impliquerait de parler avec le participant pour l'informer et lui expliquer la décision, et la décision enregistrée sur un formulaire de retrait écrit. Si une non-conformité est révélée lors d'une visite d'étude, elle sera également enregistrée dans la section « Notes supplémentaires » du CRF. Les sujets ne seront pas remplacés lorsque les individus se retireront.

Considérations statistiques

Calcul de la taille de l'échantillon

Aucune étude n'a été publiée sur la fièvre aphteuse chez des patients atteints de parodontite. Par conséquent, aucune donnée sur la faisabilité et la taille de l’échantillon requise n’est disponible dans la littérature. il est très difficile d'estimer quelle serait la taille correcte de l'échantillon d'étude et, par conséquent, cette étude est conçue comme un projet pilote interne. Alors que Browne et ses collaborateurs (1995) suggéraient que 30 patients seraient nécessaires en règle générale pour la taille de l'échantillon, Kieser et Wassmer (1996) ont constaté qu'un échantillon pilote compris entre 20 et 40 minimiserait la taille globale de l'échantillon de l'étude plus vaste. Suite à la suggestion de Julious 2009, 12 patients par bras d'étude seront recrutés pour cette étude.

Analyse intermédiaire et critères de faisabilité/progression

La décision de progresser dans un essai plus large (et la taille relative de l'échantillon) dépendra des critères de faisabilité/progression ci-dessous.

ASPECTS DE FAISABILITÉ CRITÈRES D’ÉVOLUTION À SATISFAIRE

Volonté d'être randomisés ≥ 50 % des patients approchés sont d'accord. Observance auto-déclarée du régime alimentaire ≥ 66 % des patients du groupe test déclarent eux-mêmes l'observance (définie comme pas plus d'un jour pendant lequel le régime n'a pas été suivi) Observance testée du régime ≥ 66 % des patients du groupe test montrent une observance basée sur un test sanguin (défini comme une réduction de 20 à 30 % des taux circulants d'IGF-1) (Wei 2017) Acceptation des échantillons de sang ≥ 66 % des patients recrutés font prélever tous les échantillons de sang conformément au protocole Absence d’événements indésirables graves Aucun patient n’a signalé d’événements indésirables graves pouvant être liés au régime testé

Si tous les critères ci-dessus sont remplis, une analyse des données existantes jusqu'à 3 mois sera effectuée, en utilisant les données des 24 patients du « pilote interne ». Les moyennes et les écarts types des valeurs de CRP à 3 mois seront utilisés pour calculer la taille d'échantillon requise pour l'essai plus large. Le suivi des patients de l'étude se poursuivra jusqu'à 6 mois après le traitement. Si la différence entre les groupes pour le résultat principal (CRP à 3 mois) est minime, ce qui entraîne une très grande taille d'échantillon, une décision peut être prise de ne pas progresser vers le recrutement d'un plus grand groupe de patients et le recrutement sera arrêté. Cependant, les patients encore dans l'étude seront suivis jusqu'au dernier suivi de l'étude (180 jours).

analyses statistiques

Le principal résultat de l'étude est la circulation des taux de CRP 3 mois après le traitement (test vs contrôle). Cependant, la partie pilote interne/faisabilité de l'étude devra d'abord être terminée avant d'envisager de procéder à une taille d'échantillon d'étude pleinement alimentée. Si les critères de faisabilité sont remplis, la différence des niveaux de CRP à 3 mois après le traitement entre les groupes sera utilisée pour la taille de l'échantillon et un plan statistique formel sera formulé. Différents packages statistiques seront utilisés à des fins différentes, Stata 14 (StataCorp LLC, College Station, Texas, USA) sera le package principal et R (avec le plugin R-Studio) sera utilisé pour des analyses supplémentaires, tous deux avec des routines spécifiques. créé pour cette étude. Le test Shapiro-Wilk sera appliqué pour vérifier si les variables quantitatives analysées suivent une distribution normale et une transformation logarithmique sera effectuée dans ceux qui ne la suivent pas. Le profil de la population et des groupes d'étude sera décrit. Les résultats des variables qualitatives seront exprimés en proportions et les variables quantitatives seront exprimées en moyenne et écart type, y compris les intervalles de confiance à 95 %. La répartition de la population pour chacun des paramètres cliniques, biochimiques et microbiologiques sera également obtenue. Pour l'analyse bivariée, le test du Chi carré sera utilisé pour déterminer s'il existe une association statistiquement significative entre deux variables qualitatives, les données seront présentées sous forme de tableaux de contingence, lorsque le test du Chi carré ne remplit pas les conditions de validité Test exact de Fisher sera appliqué.

Pour comparer les moyennes de deux variables indépendantes pour les analyses intergroupes, le test T de Student sera utilisé, en considérant le test T de Student pour les échantillons appariés dans les analyses intra-groupe. Si les hypothèses normales ne sont pas remplies, le test non paramétrique « Mann-Whitney U » sera appliqué. Pour les analyses intragroupes, l'ANOVA pour les mesures répétitives ou le test de Friedman sera utilisé. L'analyse multivariée sera réalisée au moyen d'un modèle de régression linéaire multiple et d'une régression logistique ordinale en y introduisant les variables indépendantes avec un niveau de signification inférieur de 0,20. Les conditions seront vérifiées par analyse résiduelle d'hétéroscédasticité et de linéarité. Le niveau de signification statistique pour cette étude sera p <0,05.

Règles d'arrêt/arrêt et rupture du code de randomisation

Les enquêteurs ne prévoient aucun risque lié au prélèvement d'échantillons et à la fièvre aphteuse, car il s'agit de procédures bien établies. Par conséquent, les enquêteurs prévoient qu'aucune partie de l'étude ne devrait être interrompue et que l'essai ne devrait pas être interrompu en raison de problèmes de sécurité des participants. Cependant, étant donné que la fièvre aphteuse n'a pas été testée chez des patients atteints de parodontite, dans le cas peu probable où il y aurait un événement indésirable grave, un rapport au sponsor sera enregistré dans les 24 heures suivant la connaissance de l'événement et un rapport au comité d'éthique dans les 15 jours. d'apprentissage de l'événement. L'arrêt ou non de l'étude sera alors décidé en concertation avec ces instances.