Диета, имитирующая голодание, и пародонтит (Ящур) (FMD)

Введение

Пародонтит – это воспалительное заболевание пародонта, вызванное микробами. Было показано, что воспаление, связанное с пародонтитом, не ограничивается пародонтом, но может иметь далеко идущие последствия для остальных частей тела и что это может быть частично опосредовано системным распространением микроорганизмов полости рта. Этапы 1 и 2 пародонтальной терапии также связаны с кратковременной острой фазовой воспалительной реакцией, характеризующейся повышением циркулирующих маркеров острой фазы воспаления, что, в свою очередь, сопровождается, в случае успеха, долгосрочным снижением количества этих молекул. В среднесрочной и долгосрочной перспективе это сопровождается изменениями других маркеров здоровья периферических сосудов наряду с улучшением метаболического контроля, продолжающимся не менее 12 месяцев. Известно, что пародонтит имеет двустороннюю связь с метаболическими нарушениями и дисрегуляцией. Совсем недавняя работа подтвердила, что пародонтит связан с системным воспалением, что измеряется уровнем С-реактивного белка (СРБ) в сыворотке. Кроме того, сообщалось, что интенсивное нехирургическое лечение пародонтита (этапы 1 и 2) приводило к прогрессивному снижению уровня СРБ через 90 дней с умеренным увеличением через 180 дней. Считается, что улучшение метаболического контроля может также улучшить состояние пародонта, однако точные механизмы этого не до конца ясны. Также было опубликовано несколько исследований на людях и экспериментальных исследований, касающихся возможного влияния питания на лечение пародонтита. Исследование на обезьянах показало, что долгосрочное ограничение калорийности рациона (диета, обогащенная витаминами и минералами) ослабляет клиническое воспаление и снижает степень разрушения пародонта вследствие острого микробного заражения. Однако в другом экспериментальном исследовании на обезьянах длительная гипокалорийная диета (на 30 % меньше ежедневного потребления калорий плюс витамины и минералы) по-разному снижает выработку местных медиаторов воспаления и риск воспалительных заболеваний пародонта у самцов, но не у самок. Кроме того, недавний систематический обзор моделей на животных показал, что макронутриенты, влияющие на окислительный стресс или иммунную систему (т.е. жирные кислоты n-3), по-видимому, важны для профилактики или лечения пародонтита. Что касается исследований на людях, корейская группа после четырехнедельного вмешательства по контролю веса у пародонтально здоровых людей, страдающих ожирением, наблюдала снижение уровня матриксной металлопротеиназы (ММП)-8, ММП-9 и интерлейкина-1β (IL-1β) у пациентов с ожирением. десневая десневая жидкость (GCF). Немецкая команда сообщила, что диета, состоящая из низкого потребления углеводов, богатая омега-3-жирными кислотами и клетчаткой, более высоким содержанием витаминов C и D, сокращением количества животных белков и целенаправленным потреблением нитратсодержащих растений, может привести к значительному снижению воспаление пародонта и десен, хотя серологические параметры воспаления и поддесневой микробиом кажутся не затронутыми. Совсем недавно исследование показало, что не существует общей связи между западными моделями питания (характеризующимися более высоким потреблением обработанного мяса, красного мяса, сливочного масла, молочных продуктов с высоким содержанием жиров, яиц и рафинированных зерновых) или разумными моделями питания (характеризующимися повышенное потребление овощей, фруктов, бобовых, цельнозерновых продуктов, рыбы и птицы) и пародонтит; однако, когда рассматривались только люди с ожирением, западная диета была связана с более высоким риском пародонтита. Другое недавнее исследование, основанное на использовании диетического воспалительного индекса, показало, что употребление провоспалительной диеты было связано с пародонтитом средней и тяжелой степени у взрослого населения США. Новый режим голодания был введен для того, чтобы повысить приверженность пациентов к лечению, поскольку люди обычно не могут соблюдать строгую диету в течение длительного периода. В частности, диета, имитирующая голодание (FMD), состоящая из 30-50% нормального потребления калорий в течение 4-7 дней подряд с последующим периодом возобновления кормления вволю один раз в месяц, показала очень многообещающие благоприятные эффекты с точки зрения снижения риска факторы старения, диабета, аутоиммунитета, сердечно-сосудистых заболеваний, нейродегенерации и рака. В целом, все еще существует неопределенность относительно потенциальной роли периодического голодания в отношении клинических и воспалительных параметров пародонта. Насколько нам известно, ни в одном исследовании не изучалось потенциальное влияние ящура на системный и пародонтальный ответ после лечения пародонтита.

Цели

Основная цель этого исследования — проверить, может ли диета, имитирующая голодание, повлиять на системный и пародонтальный ответ после нехирургического пародонтального лечения. Нулевая гипотеза заключается в том, что диета, имитирующая голодание, не изменяет местную и системную воспалительную реакцию после лечения.

Дизайн исследования

Это двойное слепое (специалист по оценке результатов и статистик) многоцентровое рандомизированное клиническое исследование с параллельными группами и соотношением распределения 1:1, с внутренним пилотным исследованием. Все набранные пациенты будут получать одинаковый протокол пародонтальной терапии (этапы 1 и 2). Одна группа (испытательная) будет подвергнута трем циклам ящура. Программа FMD — это программа диеты на растительной основе, разработанная для достижения эффекта, подобного голоданию, при одновременном обеспечении макро- и микроэлементами для минимизации бремени голодания и побочных эффектов. FMD состоит на 100% из ингредиентов, которые обычно считаются безопасными (GRAS), и включает фирменные супы на овощной основе, энергетические батончики, энергетические напитки, крекерные закуски, оливки, травяные чаи и добавки. Все продукты, которые необходимо употреблять в день, упакованы в индивидуальную коробку, чтобы участники могли выбирать, когда им есть, избегая при этом случайного употребления продуктов, приготовленных на следующий день. Лечение ящура состоит из 5-дневного режима, обеспечивающего потребление примерно 1100 килокалорий в первый день; примерно 750 килокалорий в день со второго по пятый день. Напротив, другая группа (контрольная) продолжит свою обычную диету.

Выбор темы

Это многоцентровое исследование. Участники будут проверены клиническим персоналом/студентами Международного университета Каталонии (UIC), Мадридского университета Комплутенсе (UCM), Университета Сантьяго-де-Компостела, Университета Мурсии и Университета Гранады среди пациентов с пародонтитом, посещающих соответствующие больницы. Исследователи ожидают, что в год будет доступно 24 подходящих участника, и предполагают, что 70% из них согласятся принять участие в исследовании после того, как проявят первоначальный интерес.

Процедуры исследования

Набор субъектов

К пациентам Международного университета Каталонии, Университета Комплутенсе, университетов Сантьяго-де-Компостела и Гранады будут индивидуально обращаться при приеме на работу на территории кампуса и на стоматологический факультет. После выражения первоначального интереса потенциальным участникам будет предоставлен информационный лист и возможность задать вопросы членам исследовательской группы по электронной почте или телефону. Если они затем изъявят желание принять участие, их пригласят на просмотр. Каждому человеку будет предоставлено от 24 часов до недели, чтобы решить, хотят ли они принять участие. Людям будет возмещено затраченное время с оплатой по завершении исследования.

Процедуры проверки

Во время скринингового визита обученный заявитель или стоматолог-исследователь будет запрашивать согласие, которое будет зафиксировано в письменной форме согласия участника с подробным описанием всей процедуры исследования и контрольным списком соглашений для каждого метода сбора данных. После получения согласия каждый зарегистрированный участник будет записан в форме журнала участника. Первоначальный скрининг будет направлен на то, чтобы убедиться, что каждый человек соответствует изложенным критериям включения и исключения. Это будет оцениваться путем сбора устного анамнеза и будет записано в печатной форме журнала скрининга. Участникам необходимо будет пройти пародонтологическое обследование у стоматолога-исследователя, чтобы убедиться в их пригодности.

Процедуры рандомизации и сокрытие распределения

Первоначальная центральная рандомизация будет проведена с использованием метода «Запечатанного конверта» персоналом, не участвующим непосредственно в исследовании, в больнице Гая. Для важных влияющих факторов («центр») будет проведена стратифицированная рандомизация в соответствии с рекомендациями. Стратификация по возрасту проводиться не будет, поскольку при небольших размерах выборки стратификация должна быть ограничена одним или очень немногими факторами, а также поскольку влияние возраста ограничено дизайном исследования и будет корректироваться при статистическом анализе. В каждом центре пациенты будут распределены в одну из двух групп лечения с использованием списка рандомизации, который был предварительно подготовлен статистиком исследования. Список будет сгенерирован путем заблокированной рандомизации. В каждом центре будет использоваться запечатанный конверт для обеспечения сокрытия распределения средств. Участнику будет назначено тестовое или контрольное лечение в период с -7/-10 до дня 0. Терапевт будет проинформирован о распределении лечения, открыв конверт в начале приема.

График каждого посещения

Участники, выразившие определенную заинтересованность в участии в ходе личных обсуждений или в результате ответов на рекламу, будут приглашены на ознакомительный визит. Это будет происходить, как и все учебные визиты, в Главной больнице Каталонии (Барселона) и в отделениях одонтостоматологии (Clinica de Odontologia) в Мадриде, Сантьяго-де-Компостела, Мурсии и Гранаде, и это займет около 45 минут. Это будет происходить в удобное для потенциального участника и стоматолога-исследователя время и дату в пределах наличия клинического пространства. Здесь их первоначально спросят об их личной информации/истории болезни и пройдут стоматологический осмотр. Если они имеют право на участие, их проинформируют, когда начнется следующий этап исследования, и после этого будет назначена встреча для начала расследования. Лечение будут проводить аспиранты магистратуры пародонтологии каждого центра.

Через одну-две недели, в день -7/-10 (базовый прием или визит 1), будет дано и подписано информированное согласие. Будут собраны образцы крови, GCF, зубного налета и стула. Будет проверена история болезни, нежелательные явления и сопутствующие лекарства, а также проведен осмотр полости рта, включая регистрацию количества зубов и глубины зондирования в 6 местах на каждый зуб, рецессии (мм) и кровотечения после зондирования. Будут предоставлены очень поверхностные инструкции по профилактике, мотивации и гигиене полости рта.

В день 0 (утро) (визит 2) пациенты, отнесенные к тестовой группе, начнут лечение ящура в течение 5 дней подряд. Всем пациентам будут проведены процедуры поддесневого инструментария (PMPR), а также будут усилены более подробные инструкции по гигиене. Будет проверена история болезни, нежелательные явления и сопутствующие лекарства, а также будет проведен осмотр полости рта для выявления осложнений. Обученный дипломированный диетолог (из одного из центров) обсудит с пациентами ящур, а также распространит опросник, чтобы сообщить о несъеденных продуктах и ​​потреблении дополнительной пищи.

В день 1 (v3) будут взяты образцы крови и GCF. Будет проверена история болезни, нежелательные явления и сопутствующие лекарства, будет проведен осмотр полости рта с целью выявления осложнений.

На 7-й день (v4) будут взяты образцы крови и GCF. Будет проверена история болезни, нежелательные явления и сопутствующие лекарства, будет проведен осмотр полости рта с целью выявления осложнений.

На 45±5 день (v5) будут взяты образцы крови и GCF. Будут усилены инструкции по гигиене полости рта и проведен сеанс наддесневого удаления зубного камня с полировкой. У пациентов тестовой группы будет начат второй цикл лечения ящура. Будет проверена история болезни, нежелательные явления и сопутствующие лекарства, будет проведен осмотр полости рта с целью выявления осложнений.

На 85±5 день (v6) у пациентов тестовой группы будет начат третий цикл Ящура. Будет проверена история болезни, нежелательные явления и сопутствующие лекарства, будут усилены инструкции по гигиене полости рта и проведен сеанс наддесневого удаления зубного камня с полировкой.

На 90-й день ±5 (v7) будут записаны измерения периодонтальной карты всего рта. Будут взяты пробы крови и ЗКФ. Будут усилены инструкции по гигиене полости рта и, при необходимости, проведен сеанс поддерживающей пародонтальной терапии. Будет проверена история болезни, нежелательные явления и сопутствующие лекарства, будет проведен осмотр полости рта с целью выявления осложнений.

На 180-й день ±10 (v8) данные периодонтальной карты всей полости рта будут записываться в 6 местах на каждый зуб: глубина зондирования, рецессия (мм) и кровотечение после зондирования. Будут взяты образцы крови, GCF, зубного налета и стула. Инструкции по гигиене полости рта будут усилены. Будет проверена история болезни, нежелательные явления и сопутствующие лекарства, будет проведен осмотр полости рта с целью выявления осложнений.

*Пациентам будут звонить один или два раза в течение каждого цикла ящура, чтобы проверить, все ли идет правильно, и решить любые проблемы или проблемы, которые могут у них возникнуть.

Последующие процедуры

Если участник пропускает несколько (2/3) посещений, его можно считать выбывшим из участия. Однако они будут включены в анализ намерения лечить.

Определение окончания исследования

Исследование будет завершено после того, как все участники завершат все этапы клинического периода и будут выполнены обработка/анализ биологического материала и клинические оценки.

Сбор проб/маркировка/регистрация

Образцы будут собраны во время исследовательского визита у пациента квалифицированными стоматологами Международного университета Каталонии, Мадридского университета Комплутенсе, Университета Сантьяго-де-Компостела, Университета Мурсии и Университета Гранады, которые примут участие в этом исследовании. Во время сбора всех типов проб будут использоваться надлежащая гигиена рук, подходящие перчатки и стерильные одноразовые предметы для исследования, чтобы гарантировать целостность собранных образцов и безопасность исследователя и участника. Пробирки с псевдоанонимной маркировкой будут готовиться перед каждым посещением, на этикетке будет указан номер участника с префиксом обозначения типа образца, например: G для GCF, B для крови, S для слюны, SubP для поддесневого налета и т. д. Сбор образцов будет проводиться при каждом посещении перед проведением клинического обследования, чтобы физические манипуляции не повредили место отбора проб или не вызвали легкость десен. кровотечение, которое может загрязнить собираемый образец. Полоски GCF Periopaper® (Pro-flow Inc., Амитивилль, Нью-Йорк, США) помещают в десневую щель зубов с самым глубоким карманом (щечная сторона) в каждом квадранте. Затем они будут немедленно измерены с помощью калиброванного электронного преобразователя Periotron 8000 (Pro-Flow Inc., Амитивилль, Нью-Йорк, США), который определит количество собранного GCF. После измерения все полоски GCF для этого визита будут храниться при -80°C в одной пробирке емкостью 2 мл и объединяться для дальнейшего анализа. 4 мл венозной крови будут собраны из руки участника в эвакуированные стерильные вакутейнеры с безопасными крышками Hemogard, содержащие антикоагулянт K2, калиевую соль ЭДТА (этилен-диамин-тетрауксусная кислота), который был нанесен распылением на внутреннюю поверхность пробирки. Пробы будут брать опытные и обученные флеботомисты. Чтобы снизить риск обморока, участники будут находиться на полуоткинутом постаменте на протяжении всего периода отбора проб и в течение пяти минут после отбора проб. Исследователь будет постоянно присутствовать с участником, чтобы гарантировать, что в случае обморока он не упадет и не получит травм. Использованные иглы будут выброшены в безопасный контейнер для острых предметов. Образцы сыворотки центрифугируют в течение 10 минут при 11 000 об/мин, затем сразу разделяют на аликвоты по 0,2–0,5 мл и хранят в морозильной камере при -80°C до тех пор, пока они не потребуются для анализа. Образцы поддесневого налета будут взяты с щечной поверхности зуба стоматологом-исследователем с помощью стерильной кюретки соответственно из-под края десны. Налет будет собираться с зубов с самым глубоким карманом (щечная поверхность) при каждом исследовательском визите. Эти зубы были выбраны так, чтобы иметь хорошее сочетание коренных и резцов. Собранный налет с этих четырех зубов помещают в 1 мл стерильного 0,1x трис-ЭДТА и хранят при -80°C. Участникам будут предоставлены наборы для домашнего сбора образцов стула в консервирующем растворе ([http://www.microbiome-standards.org)] http://www.microbiome- стандарты.орг) и этот образец будет отправлен в местную лабораторию в течение 7 дней с момента сбора. При поступлении образцов стула в лабораторию образцы будут храниться при температуре -80 C. Все биологически загрязненные одноразовые предметы будут выброшены в соответствующий контейнер для биологической опасности для обработки и удаления. Все взятые образцы будут внесены в печатную копию CRF участника для этого исследовательского визита с указанием даты и времени сбора, а также инициалов стоматолога-исследователя, проводившего сбор. Это также будет зарегистрировано в электронной таблице Excel исследования. Если конкретный образец не может быть взят во время этого визита, причина этого будет указана в соответствующем разделе «Дополнительные примечания» ИРК.

Процедуры анализа проб

Все эксперименты будут проводиться в лабораториях микробиома и слюны больницы Гая. Образцы GCF размораживают и элюируют в PBS (pH 7,2±0,2) с добавлением коктейля ингибитора протеазы Easypack (Roche), как описано Curtis et al. 1988. Вкратце, полоски периобумаги будут помещены в перфорированную микроцентрифужную пробирку емкостью 0,5 мл, которая будет храниться внутри пробирки емкостью 1,5 мл. Буфер для элюирования (50 мкл) добавляется к полоскам и помещается в вихревой шейкер на 2 минуты, а затем центрифугируется в течение 15 минут при 11 000 об/мин и 4°C. Центрифугирование повторяется с добавлением к полоскам еще 50 мкл буфера для элюирования, чтобы получить ~90 мкл общего элюированного GCF. Концентрацию белка будут количественно определять с использованием планшета LVis (BMG Labtech CLARIOstar), откалиброванного по бычьему сывороточному альбумину (Sigma). Анализ GCF для выбранных аналитов будет выполнен Luminex. Образцы будут обрабатываться в Центре взаимодействия хозяина и микробиома KCL, крыло Guys Tower, этаж 17. Образцы зубного налета и стула будут подвергнуты экстракции ДНК в соответствии со стандартными процедурами в нашей лаборатории и проанализированы с использованием секвенирования ДНК нового поколения для характеристики поддесневой микробиоты, чтобы идентифицировать и определить уровни ключевых пародонтальных бактериальных патогенов и микробных изменений в масштабах сообщества на обработанных участках. с протоколами испытаний и контроля. Образцы крови будут проверены на наличие цитокинов, белков острой фазы и маркеров воспаления с использованием различных методов, таких как вестерн-блоттинг или твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА), который определит их наличие и количество в крови. Десневую десневую жидкость будут анализировать на наличие медиаторов воспаления, антител, пептидов и цитокинов, опять же с использованием таких методов, как ELISA. Для мониторинга соблюдения требований по ящуру будут оцениваться уровни циркулирующего IGF-1, уровень глюкозы в крови натощак, уровень β-гидроксибутирата в крови.

ИФА (высокочувствительный двухсайтовый иммуноферментный анализ): выявление IL-6.

Cobas Integra 700 (автоматический иммунотурбидиметрический высокочувствительный анализ): обнаружение HsCRP.

Данные, полученные в результате этих экспериментов, будут храниться на безопасных, защищенных паролем компьютерах King's, в том числе в лабораториях слюны и микробиома, а также на учебном ноутбуке, предоставленном King's.

Образцы процедур хранения

Образцы крови, слюны, зубного налета и GCF будут храниться при температуре -80°C в безопасных, запираемых морозильных камерах HTA в лабораториях Международного университета Каталонии, Мадридского университета Комплутенсе, Университета Сантьяго-де-Компостела и Университета Гранады. Это обеспечит долгосрочную стабильность готовности к обработке проб. После сбора образцы стула будут отправлены в каждый участвующий центр пациентами в запечатанных конвертах с предварительно проштампованными марками. По мере хранения все образцы проверяются на физическую целостность, а затем образцы, подлежащие замораживанию, вносятся в защищенную паролем безопасную компьютерную базу данных, в которой фиксируется их местоположение в морозильной камере и время/дата их хранения. Физическая печатная копия хранящихся образцов также будет представлена ​​в CRF. Хранение, транспортировка, использование и окончательная утилизация предоставленных образцов будут осуществляться в соответствии с Законом Великобритании о человеческих тканях 2004 года и Директивами ЕС о тканях и клетках. Если какие-либо образцы не будут немедленно обработаны, они будут псевдоанонимно сохранены для дальнейшего анализа позднее. Образцы будут переданы в лабораторию слюны больницы Гая и будут храниться в архиве в течение 10 лет после завершения. По истечении срока этического одобрения исследования образцы крови, слюны и GCF будут утилизированы в соответствии с Законом о человеческих тканях 2004 года и всеми поправками к нему или переданы в банк тканей.

Доставка образца из Испании в Великобританию

Пробы будут помещены в иглу, содержащее достаточное количество льда/сухого льда, чтобы обеспечить хранение образцов при правильной температуре дольше расчетного времени в пути. Затем полистироловое иглу частично заполняется льдом/сухим льдом, оставляя место для образцов и дополнительного льда. Образцы можно поместить в запечатанный пластиковый пакет для облегчения каталогизации. Затем иглу наполняют сухим льдом, чтобы покрыть образцы и форму отправки, а также копию адресной этикетки в запечатанном пластиковом пакете для образцов. На иглу будет помещена крышка и закреплена упаковочной лентой. После этого иглу упаковывается в прочную коричневую упаковочную бумагу, и перед доставкой к нему прикрепляются адресная этикетка и этикетки с указанием опасности очень низких температур. Будет выбран самый быстрый вид транспорта (например, самолет), чтобы завершить доставку как можно быстрее.

Оценка безопасности

Следователи не предвидят каких-либо существенных рисков для участника, участвующего в сборе образцов, включая образцы крови, поскольку это хорошо отработанные процедуры. Согласно предыдущей литературе, возможный риск может касаться некоторых легких/умеренных системных нежелательных явлений, вызванных диетой по ящуру, включая усталость, слабость и головные боли. Существует также небольшой риск обморока во время или после забора крови. Чтобы снизить этот риск, участники будут находиться на полуоткинутом постаменте на протяжении всего периода отбора проб и в течение пяти минут после отбора проб. Исследователь будет постоянно присутствовать с участником, чтобы гарантировать, что в случае обморока он не упадет и не получит травм. Если во время взятия образца крови экзаменатор получит травму от укола иглой или царапину, для реагирования на такой инцидент будут приняты местные меры. В ходе исследования не ожидается возникновения серьезных нежелательных явлений.

Отчетность по этике

Нежелательное явление – это любые неблагоприятные и непреднамеренные признаки, симптомы или заболевание, связанные с исследованием. В случае возникновения нежелательного явления, например обморока во время взятия крови, исследователь сообщает об этом главному исследователю для включения в файл исследования CRF. Серьезное нежелательное явление (СНЯ) — это событие, которое приводит к смерти, требует госпитализации участника, вызывает стойкую инвалидность или вызывает врожденный дефект. Если это произойдет, отчет будет зарегистрирован в течение 24 часов после получения информации о событии, а отчет будет передан в комитет по этике в течение 15 дней после получения информации о событии. Форма должна быть заполнена машинописным текстом и подписана главным следователем. Главный РЭЦ подтвердит получение отчетов о безопасности в течение 30 дней.

Соблюдение и отзыв

Тема соответствия

Соблюдение требований участниками будет оцениваться при каждом учебном визите. Самостоятельный сбор анамнеза гарантирует, что участник не предпринял никаких действий (например, не начал участвовать в другом клиническом исследовании), не развил какое-либо заболевание или не начал принимать лекарства (например, прием системных антибиотиков), что запрещено критериями исключения. Кроме того, соблюдение режима лечения будет оцениваться на основании анализа крови с учетом снижения уровня циркулирующего IGF-1. Это будет записано в контрольном списке CRF. Каждый пациент должен вести дневник диеты на протяжении всего исследования, включая циклы ящура для подопытных пациентов. Незаполнение дневника питания также будет зарегистрировано как выбывание из исследования из-за решающей важности диеты для достоверности исследования. Наконец, если участник неожиданно не сможет присутствовать на ознакомительном визите, ему будет предложено посетить клинику при первой возможности.

Снятие/отсев предметов

Участники могут выйти из исследования в любое время. Это будет происходить посредством устного обсуждения между участником и любым из членов исследовательской группы, и их решение будет зафиксировано в письменной форме отказа. Причинами отказа могут быть, например, физический дискомфорт или слишком большие временные затраты. По завершении анализа данных, в ходе которого будут сопоставлены все анонимизированные данные, участники больше не смогут отозвать свои данные из исследования, что будет ясно указано на начальном этапе набора участников. Последняя дата для этого указана в конце исследования. Определенные обстоятельства могут потребовать от исследовательской группы принятия решения об исключении участников из исследования, например, существенное несоблюдение протокола, например, пропуск нескольких учебных визитов, или другие события, которые соответствуют критериям исключения. Это потребует разговора с участником, чтобы проинформировать его и объяснить ему свое решение, а решение будет зафиксировано в письменной форме отказа. Если несоответствие будет выявлено во время ознакомительного визита, оно также будет зарегистрировано в разделе «Дополнительные примечания» ИРК. Субъекты не будут заменены, когда люди уйдут.

Статистические соображения

Расчет размера выборки

Никаких исследований по использованию ящура у пациентов с пародонтитом опубликовано не было. Поэтому в литературе отсутствуют данные о осуществимости и необходимом размере выборки. очень сложно оценить правильный размер выборки исследования, и, как следствие, данное исследование задумано как внутреннее пилотное исследование. В то время как Браун и его коллеги (1995) предположили, что в качестве эмпирического правила для размера выборки потребуется 30 пациентов, Кизер и Вассмер (1996) обнаружили, что размер пилотной выборки от 20 до 40 минимизирует общий размер выборки более крупного исследования. По предложению Julious 2009 для этого исследования будет привлечено по 12 пациентов из каждой группы исследования.

Промежуточный анализ и критерии осуществимости/прогресса

Решение о продолжении более крупного исследования (и относительного размера выборки) будет зависеть от приведенных ниже критериев осуществимости/прогресса.

АСПЕКТЫ технико-экономического обоснования КРИТЕРИИ ПРОГРЕССИИ, КОТОРЫЕ НЕОБХОДИМО Удовлетворять

Готовность к рандомизации ≥ 50% обратившихся пациентов согласны Самооценка соблюдения диеты ≥ 66% пациентов тестовой группы самостоятельно сообщают о соблюдении диеты (определяется как не более 1 дня, в течение которого диета не соблюдалась) Протестированная приверженность диете ≥ 66 % пациентов тестовой группы демонстрируют соответствие на основании анализа крови (определяется как снижение уровня циркулирующего IGF-1 на 20–30%) (Wei 2017) Принятие образцов крови ≥ 66% набранных пациентов имеют все образцы крови, взятые в соответствии с протоколом Отсутствие серьезных нежелательных явлений Ни один пациент не сообщил о серьезных нежелательных явлениях, которые могли бы быть связаны с исследуемой диетой.

Если все вышеуказанные критерии соблюдены, будет проведен анализ существующих данных за период до 3 месяцев с использованием данных 24 пациентов «внутреннего пилотного проекта». Средние значения и стандартные отклонения значений СРБ через 3 месяца будут использоваться для расчета необходимого размера выборки для более крупного исследования. Наблюдение за пациентами, участвующими в исследовании, будет продолжаться в течение 6 месяцев после лечения. Если разница между группами по основному результату (СРБ через 3 месяца) будет минимальной, что приведет к очень большому размеру выборки, может быть принято решение не переходить к набору более крупной группы пациентов, и набор будет остановлен. Однако пациенты, все еще участвующие в исследовании, будут находиться под наблюдением до последнего наблюдения в исследовании (180 дней).

статистический анализ

Первичным результатом исследования были уровни циркулирующего СРБ через 3 месяца после лечения (тест против контроля). Однако сначала необходимо завершить внутреннюю пилотную/технико-экономическую часть исследования, прежде чем принимать решение о том, следует ли приступать к полномасштабному исследованию выборки. Если критерии осуществимости соблюдены, разница в уровнях СРБ через 3 месяца после лечения между группами будет использована для определения размера выборки и будет сформулирован формальный статистический план. Для разных целей будут использоваться разные статистические пакеты: Stata 14 (StataCorp LLC, Колледж-Стейшн, Техас, США) будет основным пакетом, а R (с плагином R-Studio) будет использоваться для дополнительного анализа, оба со специальными процедурами. созданный для этого исследования. Тест Шапиро-Уилка будет применяться для проверки того, соответствуют ли анализируемые количественные переменные нормальному распределению, а логарифмическое преобразование будет выполняться для тех, которые ему не следуют. Будет описан профиль населения и исследовательских групп. Результаты качественных переменных будут выражены в пропорциях, а количественные переменные будут выражены как средние значения и стандартное отклонение, включая 95% доверительные интервалы. Также будет получено распределение популяции по каждому из клинических, биохимических и микробиологических параметров. Для двумерного анализа будет использоваться критерий хи-квадрат, чтобы определить, существует ли статистически значимая связь между двумя качественными переменными. Данные будут представлены в виде таблиц непредвиденных обстоятельств, если критерий хи-квадрат не соответствует условиям достоверности. Точный критерий Фишера. будет применяться.

Для сравнения средних значений двух независимых переменных для межгруппового анализа будет использоваться Т-критерий Стьюдента с учетом Т-критерия Стьюдента для парных выборок во внутригрупповом анализе. Если обычные предположения не выполняются, будет применен безпараметрический критерий «U Манна-Уитни». Для внутригруппового анализа будет использоваться ANOVA для повторяющихся измерений или критерий Фридмана. Многомерный анализ будет проводиться с помощью модели множественной линейной регрессии и порядковой логистической регрессии, вводящей в нее независимые переменные с более низким уровнем значимости 0,20. Условия будут проверены остаточным анализом гетероскедастичности и линейности. Уровень статистической значимости для этого исследования составит p<0,05.

Правила остановки/прекращения и нарушение кода рандомизации.

Следователи не предвидят каких-либо рисков, связанных со сбором проб и ящуром, поскольку это хорошо отработанные процедуры. Таким образом, исследователи предполагают, что никакая часть исследования не должна быть прекращена, и испытание не должно быть прекращено из соображений безопасности участников. Однако, поскольку ящур не тестировался у пациентов с пародонтитом, в маловероятном случае возникновения серьезного нежелательного явления отчет для Спонсора будет зарегистрирован в течение 24 часов после получения информации о событии, а отчет в комитет по этике - в течение 15 дней. изучения события. Затем будет принято решение о том, следует ли прекратить исследование совместно с этими органами.