Dieta que imita el ayuno y periodontitis (FMD) (FMD)

Introducción

La periodontitis es una enfermedad inflamatoria del periodonto provocada por microbios. Se ha demostrado que la inflamación asociada a la periodontitis no se limita al periodonto, sino que puede tener consecuencias de gran alcance en el resto del cuerpo, y que esto puede estar mediado en parte por la diseminación sistémica de microorganismos orales. Los pasos 1 y 2 de la terapia periodontal también se asocian con una respuesta inflamatoria de fase aguda a corto plazo, caracterizada por una elevación de los marcadores inflamatorios circulantes de fase aguda, que a su vez es seguida, si tiene éxito, por una reducción a largo plazo de estas moléculas. A medio y largo plazo, esto se acompaña de cambios en otros marcadores de la salud vascular periférica junto con mejoras en el control metabólico que durarán al menos 12 meses. Se sabe que la periodontitis tiene una relación bidireccional con la alteración y la desregulación metabólica. Un trabajo muy reciente corroboró que la periodontitis se asocia con inflamación sistémica medida por los niveles séricos de proteína C reactiva (PCR). Además, se ha informado que el tratamiento intensivo no quirúrgico de la periodontitis (pasos 1 y 2) condujo a una reducción progresiva de la PCR después de 90 días con un aumento moderado a los 180 días. Se cree que las mejoras en el control metabólico también pueden mejorar los resultados periodontales, aunque los mecanismos exactos para esto no están completamente claros. También se han publicado varias investigaciones experimentales y en humanos sobre los posibles efectos de la nutrición en el tratamiento de la periodontitis. Un estudio en monos encontró que la restricción calórica dietética a largo plazo (dieta enriquecida con vitaminas y minerales) amortigua la inflamación clínica y reduce el grado de degradación periodontal secundaria al desafío microbiano agudo. Sin embargo, en otro estudio experimental en monos, la dieta hipocalórica a largo plazo (30% menos de ingesta diaria de calorías más vitaminas y minerales) pareció reducir de manera diferencial la producción de mediadores inflamatorios locales y el riesgo de enfermedad periodontal inflamatoria entre los machos, pero no entre las hembras. Además, una revisión sistemática reciente en modelos animales concluyó que los macronutrientes que tienen un efecto sobre el estrés oxidativo o el sistema inmunológico (es decir, los ácidos grasos n-3) parecen ser importantes para la prevención o el tratamiento de la periodontitis. En términos de investigación en humanos, un grupo coreano, después de una intervención de control de peso de cuatro semanas en personas obesas periodontalmente sanas, observó una reducción de la metaloproteinasa de la matriz (MMP)-8, MMP-9 y la interleucina-1β (IL-1β) en líquido crevicular gingival (GCF). Un equipo alemán informó que una dieta que consistiera en una ingesta baja de carbohidratos, riqueza en ácidos grasos Omega 3 y fibra, valores más altos de vitamina C y D, reducción de proteínas animales y una ingesta concentrada de plantas que contienen nitratos podría conducir a una reducción significativa de inflamación periodontal y gingival, aunque los parámetros serológicos inflamatorios y el microbioma subgingival parecen no verse afectados. Más recientemente, un estudio encontró que no había una asociación general entre los patrones dietéticos occidentales (caracterizados por una mayor ingesta de carne procesada, carne roja, mantequilla, productos lácteos ricos en grasas, huevos y cereales refinados) o patrones dietéticos prudentes (caracterizados por una mayor ingesta de verduras, frutas, legumbres, cereales integrales, pescado y aves) y periodontitis; sin embargo, cuando se consideraron únicamente los individuos obesos, la dieta occidental se relacionó con un mayor riesgo de periodontitis. Otra investigación muy reciente, basada en el uso de un índice inflamatorio dietético, demostró que consumir una dieta proinflamatoria se asociaba con periodontitis moderada a grave en la población adulta general de EE. UU. Se ha introducido un nuevo modo de ayuno para aumentar el cumplimiento por parte de los pacientes, debido a que las personas normalmente no pueden seguir una dieta estricta durante un período prolongado. En particular, la dieta que imita el ayuno (FMD), que consiste en entre el 30 y el 50 % de la ingesta calórica normal durante 4 a 7 días consecutivos seguido de un período de realimentación ad libitum una vez al mes, mostró efectos beneficiosos muy prometedores en términos de reducción del riesgo. factores de envejecimiento, diabetes, autoinmunidad, enfermedades cardiovasculares, neurodegeneración y cáncer. En general, todavía existe incertidumbre sobre el papel potencial del ayuno periódico en los parámetros clínicos e inflamatorios periodontales. Hasta donde sabemos, ningún estudio ha investigado el efecto potencial de la fiebre aftosa sobre la respuesta sistémica y periodontal después del tratamiento de la periodontitis.

Objetivos

El objetivo principal de este estudio es probar si una dieta que imita el ayuno puede influir en la respuesta sistémica y periodontal después de una terapia periodontal no quirúrgica. La hipótesis nula es que una dieta que imita el ayuno no modifica la respuesta inflamatoria local y sistémica postratamiento.

Diseño del estudio

Se trata de un estudio clínico aleatorizado, multicéntrico, doble ciego (evaluador de resultados y estadístico), con grupos paralelos y una ración de asignación 1:1, con piloto interno. Todos los pacientes reclutados recibirán el mismo protocolo de terapia periodontal (pasos 1 y 2). Un grupo (prueba) se someterá a tres ciclos de fiebre aftosa. El programa FMD es un programa de dieta a base de plantas diseñado para lograr efectos similares al ayuno y al mismo tiempo proporciona macro y micronutrientes para minimizar la carga del ayuno y los efectos adversos. La fiebre aftosa se compone 100% de ingredientes que generalmente se consideran seguros (GRAS) y comprende sopas patentadas a base de vegetales, barras energéticas, bebidas energéticas, galletas saladas, aceitunas, infusiones de hierbas y suplementos. Todos los artículos que se consumirán por día están empaquetados individualmente para permitir a los sujetos elegir cuándo comer y evitar consumir accidentalmente componentes del día siguiente. La fiebre aftosa consiste en un régimen de 5 días que aporta aproximadamente 1.100 kilocalorías para el primer día; aproximadamente 750 kilocalorías por día durante el segundo al quinto día. Por el contrario, el otro grupo (control) seguirá con su dieta habitual.

selección de tema

Este es un estudio multicéntrico. Los participantes serán evaluados por el personal clínico/estudiantes de la Universidad Internacional de Cataluña (UIC), la Universidad Complutense de Madrid (UCM), la Universidad de Santiago de Compostela, la Universidad de Murcia y la Universidad de Granada entre los pacientes con periodontitis que acuden a los respectivos hospitales. Los investigadores esperan que haya 24 participantes elegibles disponibles por año y suponen que el 70% de ellos aceptará participar en el ensayo después de expresar interés inicial.

Procedimientos de estudio

Reclutamiento de sujetos

Los pacientes de la Universidad Internacional de Cataluña, la Universidad Complutense, las Universidades de Santiago de Compostela y Granada serán contactados individualmente para su reclutamiento en el campus y dentro de la facultad de Odontología. Después de expresar un interés inicial, los participantes potenciales recibirán una hoja de información y la oportunidad de hacer preguntas a los miembros del equipo de estudio por correo electrónico o por teléfono. Si luego expresan su deseo de participar, se les invitará a una visita de selección. Cada individuo tendrá al menos 24 horas y hasta una semana para decidir si desea participar. Las personas serán reembolsadas por su tiempo con un pago al finalizar el estudio.

Procedimientos de detección

En la visita de selección, el solicitante capacitado o el dentista del estudio solicitarán el consentimiento, que se registrará mediante un formulario de consentimiento escrito del participante que detalla el procedimiento completo del ensayo y una lista de verificación de acuerdos para cada método de recopilación de datos. Una vez que se brinde el consentimiento, cada participante inscrito se registrará en un formulario de Registro de participantes. La evaluación inicial será para garantizar que cada individuo cumpla con los criterios de inclusión y exclusión descritos. Esto se evaluará tomando una historia oral y se registrará en un formulario impreso de Registro de detección. Los participantes deberán someterse a un examen periodontal por parte del dentista del estudio para garantizar su idoneidad.

Procedimientos de aleatorización y ocultamiento de la asignación

La aleatorización central inicial se realizará mediante el método de "sobre sellado" por personal que no participa directamente en el estudio, en Guy's Hospital. Para los factores que influyen importantes ("centro"), se realizará una aleatorización estratificada según lo recomendado. No se realizará ninguna estratificación por edad, porque para tamaños de muestra pequeños, la estratificación debe limitarse a uno o muy pocos factores y porque la influencia de la edad está limitada por el diseño del estudio y se ajustará en los análisis estadísticos. Para cada centro, los pacientes serán asignados a uno de los dos grupos de tratamiento utilizando una lista de aleatorización preparada previamente por el estadístico del estudio. La lista se generará mediante aleatorización bloqueada. En cada centro se utilizará un sobre cerrado para garantizar el ocultamiento de la asignación. El participante será asignado para un tratamiento de prueba o control entre los días -7/-10 y el día 0. Se informará al terapeuta sobre la asignación del tratamiento abriendo el sobre al comienzo de la cita de tratamiento.

Horario para cada visita

Los participantes que hayan expresado cierto interés en participar mediante debates cara a cara o mediante respuestas a anuncios serán invitados a una visita de selección. Esto se llevará a cabo, como todas las visitas de estudio, en el Hospital General de Catalunya (Barcelona) y en las Unidades de Odontostomatología (Clínica de Odontologia) de Madrid, Santiago de Compostela, Murcia y Granada, y debería durar aproximadamente 45 minutos. Esto se llevará a cabo en una fecha y hora mutuamente convenientes para el participante potencial y el dentista del estudio, dentro de los límites de la disponibilidad de espacio clínico. Aquí se les preguntará inicialmente sobre su información personal/historial médico y se les realizará un examen dental. Si son elegibles, se les informará cuándo comenzará la siguiente etapa del estudio y luego se les dará una cita para comenzar con la investigación. El tratamiento será proporcionado por los estudiantes de posgrado del Máster en Periodoncia de cada centro.

Una o dos semanas después, el día -7/-10 (cita inicial o visita 1), se otorgará y firmará el consentimiento informado. Se recolectarán muestras de sangre, GCF, placa y heces. Se verificarán el historial médico, los eventos adversos y los medicamentos concomitantes y se realizará un examen oral que incluye registrar el número de dientes y en 6 sitios por diente, profundidad de sondaje, recesión (mm) y sangrado después del sondaje. Se proporcionará una profilaxis muy superficial, motivación e instrucciones de higiene bucal.

El día 0 (mañana) (visita 2), los pacientes asignados al grupo de prueba comenzarán la fiebre aftosa durante 5 días consecutivos. Todos los pacientes se someterán a procedimientos de instrumentación subgingival de boca completa (PMPR) y se reforzarán instrucciones de higiene más detalladas. Se verificarán el historial médico, los eventos adversos y los medicamentos concomitantes, y se realizará un examen bucal para detectar complicaciones. Un dietista registrado capacitado (de uno de los centros) discutirá la fiebre aftosa con los pacientes y también distribuirá encuestas para informar sobre los alimentos no consumidos y los alimentos adicionales consumidos.

El día 1 (v3), se tomarán muestras de sangre y GCF. Se verificará el historial médico, los eventos adversos y los medicamentos concomitantes, y se realizará un examen bucal para detectar complicaciones.

El día 7 (v4), se tomarán muestras de sangre y GCF. Se verificará el historial médico, los eventos adversos y los medicamentos concomitantes, y se realizará un examen bucal para detectar complicaciones.

El día 45 ± 5 (v5), se tomarán muestras de sangre y GCF. Se reforzarán las instrucciones de higiene bucal y se proporcionará una sesión de raspado supragingival con pulido. El segundo ciclo de fiebre aftosa se iniciará en pacientes del grupo de prueba. Se verificará el historial médico, los eventos adversos y los medicamentos concomitantes, y se realizará un examen bucal para detectar complicaciones.

El día 85 ±5 (v6), se iniciará el tercer ciclo de fiebre aftosa en pacientes del grupo de prueba. Se revisará el historial médico, eventos adversos y medicamentos concomitantes, se reforzarán las instrucciones de higiene bucal y se brindará una sesión de raspado supragingival con pulido.

El día 90 ±5 (v7), se registrarán las mediciones de los gráficos periodontales de toda la boca. Se tomarán muestras de sangre y muestras de GCF. Se reforzarán las instrucciones de higiene bucal y, si es necesario, se proporcionará una sesión de terapia periodontal de apoyo. Se verificará el historial médico, los eventos adversos y los medicamentos concomitantes, y se realizará un examen bucal para detectar complicaciones.

El día 180 ±10 (v8), se registrarán las mediciones de los gráficos periodontales de toda la boca en 6 sitios por diente: profundidad de sondaje, recesión (mm) y sangrado después del sondaje. Se tomarán muestras de sangre, GCF, placa y heces. Se reforzarán las instrucciones de higiene bucal. Se verificará el historial médico, los eventos adversos y los medicamentos concomitantes, y se realizará un examen bucal para detectar complicaciones.

*Los pacientes serán llamados una o dos veces durante cada ciclo de FMD para comprobar que todo va correctamente y solucionar cualquier problema o inquietud que puedan tener.

Procedimientos de seguimiento

Si un participante falta a varias (2/3) visitas, se le podría considerar un abandono. Sin embargo, se incluirán en el análisis por intención de tratar.

Definición de fin de estudio

El estudio se completará una vez que todos los participantes hayan finalizado todas las fases del período clínico y se haya realizado el procesamiento/análisis del material biológico y las puntuaciones clínicas.

Recolección de muestras/Etiquetado/Registro

Las muestras serán recolectadas durante la visita de estudio del paciente por dentistas titulados de la Universidad Internacional de Cataluña, Universidad Complutense de Madrid, Universidad de Santiago de Compostela, Universidad de Murcia y Universidad de Granada que participarán en este estudio. Durante la recolección de todos los tipos de muestras, se utilizará una higiene de manos adecuada, guantes ajustados y artículos de examen estériles de un solo uso para garantizar la integridad de las muestras recolectadas y la seguridad del examinador y del participante. Se prepararán tubos etiquetados pseudoanonimizados antes de cada visita, con la etiqueta compuesta por el número de participante precedido de la designación del tipo de muestra, p. G para GCF, B para sangre, S para saliva, SubP para placa subgingival, etc. La recolección de muestras se llevará a cabo en cada visita antes de que se realice el examen clínico, para evitar que la manipulación física perturbe el sitio de muestreo o cause una ligera irritación gingival. sangrado que puede contaminar la muestra que se está recolectando. Las tiras GCF Periopaper® (Pro-flow Inc., Amityville, Nueva York, EE. UU.) se colocarán en la hendidura gingival de los dientes con el sitio de la bolsa más profunda (aspectos bucales) en cada cuadrante. Luego se medirán inmediatamente en un transductor electrónico calibrado Periotron 8000 (Pro-Flow Inc., Amityville, Nueva York, EE. UU.), que cuantificará la cantidad de GCF recolectada. Una vez medidas, todas las tiras GCF para esa visita se almacenarán a -80 °C en un solo tubo de 2 ml y se combinarán para su posterior análisis. Se extraerán 4 ml de sangre venosa del brazo del participante en vacutainers evacuados estériles con tapa con cierre de seguridad Hemogard, que contienen el anticoagulante K2 Sal de potasio de EDTA (ácido etilendiaminotetraacético) que se ha recubierto con aerosol sobre la superficie interior del tubo. Las muestras serán tomadas por flebotomistas experimentados y capacitados. Para reducir este riesgo de desmayo, los participantes estarán sobre un pedestal semireclinado durante todo el muestreo y durante los cinco minutos posteriores al muestreo. Un investigador estará presente con el participante en todo momento para garantizar que no se produzcan caídas ni lesiones en caso de desmayo. Las agujas usadas se desecharán en un contenedor seguro para objetos punzantes. Las muestras de suero se centrifugarán durante 10 minutos a 11.000 RPM y luego se dividirán inmediatamente en alícuotas de 0,2 ml a 0,5 ml y se almacenarán en un congelador a -80 °C, hasta que se requieran para el análisis. El dentista del estudio recolectará muestras de placa subgingival de la superficie bucal del diente utilizando una cureta estéril, desde debajo del margen gingival respectivamente. La placa se recolectará de los dientes con el sitio de la bolsa más profunda (superficie bucal) en cada visita del estudio. Estos dientes fueron seleccionados para tener una buena mezcla de molares e incisivos. La placa recolectada de estos cuatro dientes se combinará en 1 ml de Tris-EDTA 0,1x estéril y se almacenará a -80ºC. Los participantes recibirán kits de recolección en el hogar para tomar muestras de heces en solución conservante ([http://www.microbiome-standards.org)] http://www.microbiome- estándares.org) y esta muestra se enviará al laboratorio local dentro de los 7 días posteriores a su recolección. Al recibir muestras de heces en el laboratorio, las muestras se almacenarán a -80 C. Todos los artículos desechables contaminados biológicamente se desecharán en el contenedor de peligro biológico correcto para su procesamiento y eliminación. Todas las muestras tomadas se registrarán en el CRF impreso del participante para esa visita del estudio, con la fecha y hora de recolección registradas y las iniciales del dentista del estudio que las recolectó. Esto también se registrará en la hoja de cálculo de Excel del estudio. Si no se puede tomar una muestra en particular en esa visita, el motivo se indicará en la sección correspondiente de "Notas adicionales" del CRF.

Procedimientos de análisis de muestras

Todos los experimentos se llevarán a cabo en los laboratorios de Microbioma y Salivar del Guy's Hospital. Las muestras de GCF se descongelarán y eluirán en PBS (pH 7,2 ± 0,2) complementado con el cóctel inhibidor de proteasa Easypack (Roche) como se describe en Curtis et al. 1988. Brevemente, las tiras de peripapel se colocarán en un tubo de microcentrífuga perforado de 0,5 ml que se mantendrá dentro de un tubo de 1,5 ml. El tampón de elución (50 μl) se agregará a las tiras y se colocará en un agitador vórtex durante 2 minutos antes de la centrifugación durante 15 minutos a 11 000 rpm y 4 ̊C. La centrifugación se repetirá añadiendo 50 μl adicionales del tampón de elución a las tiras, para producir ~90 μl de GCF eluido total. La concentración de proteínas se cuantificará utilizando una placa LVis (BMG Labtech CLARIOstar) calibrada con albúmina sérica bovina (Sigma). Luminex realizará el análisis GCF para analitos seleccionados. Las muestras se procesarán en el Centro KCL para interacciones huésped-microbioma, fl.17 Guys Tower Wing. Las muestras de placa y heces se someterán a extracción de ADN siguiendo procedimientos estándar en nuestro laboratorio y se analizarán mediante secuenciación de ADN de próxima generación para caracterizar la microbiota subgingival con el fin de identificar y determinar los niveles de patógenos bacterianos periodontales clave y cambios microbianos en toda la comunidad en los sitios tratados. con protocolos de prueba y control. Las muestras de sangre se analizarán en busca de citoquinas, proteínas de fase aguda y marcadores inflamatorios mediante diversas técnicas como Western blots o ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas (ELISA), que determinarán la presencia y cantidad de estos en la sangre. Se analizará el líquido crevicular gingival en busca de mediadores inflamatorios, anticuerpos, péptidos y citocinas, nuevamente utilizando técnicas como ELISA. Los niveles circulantes de IGF-1, el nivel de glucosa en sangre en ayunas y el nivel de β-hidroxibutirato en sangre se evaluarán para controlar el cumplimiento de la fiebre aftosa.

ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas de dos sitios de alta sensibilidad): detección de IL-6.

Cobas Integra 700 (ensayo inmunoturbidimétrico automatizado de alta sensibilidad): detección de HsCRP.

Los datos generados a partir de estos experimentos se almacenarán en las computadoras de King seguras y protegidas con contraseña, incluidas las de los laboratorios de saliva y microbioma y la computadora portátil de estudio proporcionada por King's.

Procedimientos de almacenamiento de muestras

Las muestras de sangre, saliva, placa y GCF se almacenarán a -80ºC en congeladores HTA seguros y cerrados con llave en los laboratorios de la Universidad Internacional de Cataluña, la Universidad Complutense de Madrid, la Universidad de Santiago de Compostela y la Universidad de Granada. Esto garantizará la estabilidad a largo plazo en la preparación para el procesamiento de muestras. Después de la recolección, los pacientes enviarán muestras de heces a cada centro participante en sobres sellados y presellados. A medida que se almacenan, se comprobará la integridad física de todas las muestras y las muestras que se congelarán se registrarán en una base de datos informática segura y protegida con contraseña, que registra su ubicación en el congelador y la hora y fecha en que se almacenaron. En el CRF también se incluirá una copia física impresa que registre las muestras que se almacenan. El almacenamiento, transporte, uso y eliminación final de la muestra proporcionada se llevarán a cabo de conformidad con la Ley de Tejidos Humanos del Reino Unido de 2004 y con las Directivas de Células y Tejidos de la UE. Si alguna muestra no se procesa inmediatamente, se almacenará de forma pseudoanónima para su posterior análisis en una fecha posterior. Las muestras se transferirán al laboratorio salival del Guy's Hospital y se archivarán durante 10 años una vez finalizadas. Una vez que haya expirado la aprobación ética para el estudio, las muestras de sangre, saliva y GCF se eliminarán de acuerdo con la Ley de Tejidos Humanos de 2004 y sus enmiendas, o se transferirán a un banco de tejidos.

Envío de muestra desde España a Reino Unido

Las muestras se colocarán en un iglú que pueda contener suficiente hielo/hielo seco para garantizar que las muestras se mantengan a la temperatura correcta durante más tiempo que el tiempo estimado del viaje. Luego, el iglú de poliestireno se llena parcialmente con hielo/hielo seco, dejando espacio para muestras y hielo adicional. Las muestras se pueden colocar en una bolsa de plástico sellada para facilitar la catalogación. Luego, el iglú se llena con hielo seco para cubrir las muestras y se incluye un formulario de envío y, además, se incluye una copia de la etiqueta de dirección en una bolsa de plástico sellada para muestras. Se colocará una tapa en el iglú y se asegurará con cinta de embalaje. A continuación, el iglú se envuelve en papel de regalo marrón resistente y antes de la entrega se colocan una etiqueta con la dirección y etiquetas de peligro de temperaturas muy bajas. Se seleccionará el medio de transporte más rápido (por ejemplo, avión) para completar el envío lo más rápido posible.

Evaluación de seguridad

Los investigadores no prevén ningún riesgo significativo para el participante involucrado en la recolección de muestras, incluidas las muestras de sangre, ya que se trata de procedimientos bien establecidos. Según la literatura anterior, un posible riesgo podría referirse a algunos eventos adversos sistémicos leves/moderados causados ​​por el régimen dietético para la fiebre aftosa, como fatiga, debilidad y dolores de cabeza. También existe un ligero riesgo de desmayo durante o después de la extracción de sangre. Para reducir este riesgo, los participantes estarán sobre un pedestal semireclinado durante todo el muestreo y durante los cinco minutos posteriores al muestreo. Un investigador estará presente con el participante en todo momento para garantizar que no se produzcan caídas ni lesiones en caso de desmayo. Si el examinador sufre un pinchazo con una aguja durante la recolección de la muestra de sangre, o se produce un rasguño, se implementarán procedimientos locales para responder a dicho incidente. No se espera que ocurran eventos adversos graves durante el curso del estudio.

Informes de ética

Un evento adverso es cualquier signo, síntoma o enfermedad desfavorable e involuntario asociado con el estudio. Si ocurre un evento adverso, como desmayo durante la extracción de sangre, el investigador informará al investigador jefe para su inclusión en el archivo del estudio CRF. Un evento adverso grave (SAE) es un evento que causa la muerte, requiere la hospitalización del participante, causa una discapacidad persistente o causa un defecto de nacimiento. Si esto ocurre, se registrará un informe dentro de las 24 horas posteriores al conocimiento del evento y un informe al comité de ética dentro de los 15 días posteriores al conocimiento del evento. El formulario debe cumplimentarse a máquina y firmarse por el investigador jefe. El REC principal acusará recibo de los informes de seguridad en un plazo de 30 días.

Cumplimiento y desistimiento

Cumplimiento de la materia

El cumplimiento de los participantes se evaluará en cada visita del estudio. Un historial médico autoinformado garantizará que el participante no haya tomado ninguna medida (p. ej., no haya comenzado a participar en otro ensayo clínico) ni haya desarrollado una afección ni haya comenzado a tomar medicamentos (p. ej. tomando antibióticos sistémicos) que está prohibido por los criterios de exclusión. Además, el cumplimiento se evaluará basándose en análisis de sangre teniendo en cuenta las reducciones en los niveles circulantes de IGF-1. Esto se registrará en una lista de verificación en el CRF. Cada paciente debe completar un diario de dieta durante todo el estudio, incluidos los ciclos de fiebre aftosa para los pacientes de prueba. La no cumplimentación del diario dietético también se registraría como abandono, debido a la importancia crucial de la dieta para la validez del estudio. Por último, si un participante inesperadamente no asiste a una visita del estudio, se le pedirá que asista a la clínica en la próxima oportunidad posible.

Retiro/abandono de materias

Los participantes podrán retirarse del estudio en cualquier momento. Esto se realizaría a través de una discusión verbal entre el participante y cualquiera de los miembros del equipo del estudio, y su decisión se registraría en un formulario de retiro escrito. Los motivos de la retirada podrían deberse a una incomodidad física o a un compromiso de tiempo demasiado grande, por ejemplo. Una vez finalizado el análisis de datos, en el que se recopilarían todos los datos anonimizados, los participantes ya no podrían retirar sus datos del estudio, lo que quedaría claro en la etapa de reclutamiento inicial. La última fecha para esto es al final del estudio. Ciertas circunstancias pueden requerir que el equipo del estudio decida retirar a los participantes del ensayo, como un incumplimiento significativo del protocolo, por ejemplo, faltar a múltiples visitas del estudio u otros eventos que cumplirían los criterios de exclusión. Esto implicaría hablar con el participante para informarle y explicarle la decisión, y registrar la decisión en un formulario de retiro por escrito. Si se revela un incumplimiento durante una visita de estudio, también se registrará en la sección "Notas adicionales" del CRF. Los sujetos no serán reemplazados cuando los individuos se retiren.

Consideraciones estadísticas

Cálculo del tamaño de la muestra

No se han publicado estudios que utilicen la fiebre aftosa en pacientes con periodontitis. Por lo tanto, no hay datos disponibles en la literatura sobre la viabilidad y el tamaño de muestra requerido. Es muy difícil estimar cuál sería el tamaño correcto de la muestra del estudio y, como consecuencia, este estudio está diseñado como un piloto interno. Mientras que Browne y colaboradores (1995) sugirieron que se necesitarían 30 pacientes como regla general para el tamaño de la muestra, Kieser y Wassmer (1996) encontraron que un tamaño de muestra piloto entre 20 y 40 minimizaría el tamaño general de la muestra del estudio más grande. Siguiendo la sugerencia de Julious 2009, se reclutarán para este estudio 12 pacientes por grupo de estudio.

Análisis provisional y criterios de viabilidad/progresión

La decisión de avanzar con el ensayo más grande (y el tamaño relativo de la muestra) dependerá de los criterios de viabilidad/progresión que se detallan a continuación.

ASPECTOS DE VIABILIDAD CRITERIOS DE PROGRESIÓN A CUMPLIR

Disposición a ser aleatorizado ≥ 50% de los pacientes contactados están de acuerdo Cumplimiento de la dieta autoinformado ≥ 66% de los pacientes del grupo de prueba autoinforman el cumplimiento (definido como no más de 1 día en el que no se siguió la dieta) Cumplimiento de la dieta probado ≥ 66 % de pacientes del grupo de prueba muestran cumplimiento según el análisis de sangre (definido como reducciones del 20 al 30 % en los niveles circulantes de IGF-1) (Wei 2017) Aceptación de muestras de sangre ≥ 66 % de los pacientes reclutados se toman todas las muestras de sangre según el protocolo Ausencia de eventos adversos graves Ningún paciente informa eventos adversos graves que puedan estar relacionados con la dieta de prueba

Si se cumplen todos los criterios anteriores, se llevará a cabo un análisis de los datos existentes de hasta 3 meses, utilizando datos de los 24 pacientes del 'piloto interno'. Se utilizarán las medias y las desviaciones estándar de los valores de PCR a los 3 meses para calcular el tamaño de muestra requerido para el ensayo más grande. El seguimiento de los pacientes del estudio continuará hasta 6 meses después del tratamiento. Si la diferencia entre los grupos para el resultado primario (PCR a los 3 meses) fuera mínima, lo que daría como resultado un tamaño de muestra muy grande, se puede tomar la decisión de no avanzar hacia el reclutamiento de un grupo más grande de pacientes y se detendrá el reclutamiento. Sin embargo, los pacientes que aún están en el estudio serán seguidos hasta el último seguimiento del estudio (180 días).

análisis estadístico

El resultado principal del estudio son los niveles circulantes de PCR a los 3 meses después del tratamiento (prueba versus control). Sin embargo, primero será necesario completar la parte piloto interna/viabilidad del estudio antes de considerar si se debe proceder con un tamaño de muestra de estudio totalmente potenciado. Si se cumplen los criterios de viabilidad, la diferencia en los niveles de PCR a los 3 meses después del tratamiento entre los grupos se utilizará para el tamaño de la muestra y se formulará un plan estadístico formal. Se utilizarán diferentes paquetes estadísticos para diferentes propósitos, Stata 14 (StataCorp LLC, College Station, Texas, EE. UU.) será el paquete principal y R (con el complemento R-Studio), se usará para análisis adicionales, ambos con rutinas específicas. creado para este estudio. Se aplicará la Prueba de Shapiro-Wilk para verificar si las variables cuantitativas analizadas siguen una distribución normal y se realizará una transformación logarítmica en aquellas que no la sigan. Se describirá el perfil de la población y de los grupos de estudio. Los resultados de las variables cualitativas se expresarán en proporciones y las variables cuantitativas se expresarán como medias y desviación estándar, incluidos los intervalos de confianza del 95%. También se obtendrá la distribución de la población para cada uno de los parámetros clínicos, bioquímicos y microbiológicos. Para el análisis bivariado se utilizará la prueba de chi-cuadrado para determinar si existe asociación estadísticamente significativa entre dos variables cualitativas, los datos se presentarán como tablas de contingencia, cuando la prueba de chi-cuadrado no cumpla con las condiciones de validez de la prueba exacta de Fisher. sera aplicado.

Para comparar las medias de dos variables independientes para análisis intergrupales se utilizará la prueba T de Student, considerando la prueba T de Student para muestras pareadas en análisis intragrupo. Si no se cumplen los supuestos normales, se aplicará la prueba No Paramétrica "U de Mann-Whitney". Para análisis intragrupos, se utilizará ANOVA para medidas repetitivas o prueba de Friedman. El análisis multivariado se realizará mediante un modelo de regresión lineal múltiple y regresión logística ordinal introduciendo en él las variables independientes con un nivel de significancia inferior a 0,20. Las condiciones se comprobarán mediante análisis residual de heterocedasticidad y linealidad. El nivel de significación estadística para este estudio será p<0,05.

Reglas de suspensión/interrupción y ruptura del código de aleatorización

Los investigadores no prevén ningún riesgo relacionado con la recolección de muestras y la fiebre aftosa, ya que se trata de procedimientos bien establecidos. Por lo tanto, los investigadores prevén que no sea necesario interrumpir ninguna parte del estudio y que no sea necesario interrumpir el ensayo debido a preocupaciones sobre la seguridad de los participantes. Sin embargo, dado que la fiebre aftosa no se ha probado en pacientes con periodontitis, en el improbable caso de que se produzca un evento adverso grave, se registrará un informe al patrocinador dentro de las 24 horas siguientes a conocer el evento y un informe al comité de ética dentro de los 15 días. de conocimiento del evento. A continuación se decidirá si el estudio debe detenerse o no en colaboración con estos organismos.