X-연관 만성 육아종성 질환에 대한 조혈 줄기 및 전구 세포의 돌연변이 복구를 위한 염기 편집

연구 설명:

X-연관 만성 육아종성 질환(X-CGD) 치료를 위한 염기 편집(BE) 자가 조혈 줄기 및 전구 세포(HSPC)의 단일 주입의 안전성과 효능을 확인하기 위한 공개 라벨, 1/2상 시험 . CYBB 미스센스 유전자 돌연변이(예: CYBB c.676C>T)를 복구하기 위해 염기 편집이 수행됩니다. 연구 가설은 1) 염기 편집이 HSPC의 유전자 돌연변이를 효율적으로 복구할 수 있다는 것입니다. 2) BE HSPC는 NADPH(니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 인산염) 산화효소 활성이 회복된 기능적 식세포로 접목되고 분화될 수 있습니다.

초기 개발 단계 동안 각 연구 참가자는 돌연변이 특이적 BE 시스템의 개발 및 검증을 위해 CD34+ HSPC 수집에 대한 성분채집술을 받게 됩니다.

치료 단계 동안 참가자는 부술판(총 12mg/kg) 조절 후 BE 자가 HSPC 임상시험용 의약품(IMP)을 1회 주입받게 됩니다.

참가자들은 3개월, 6개월, 12개월, 18개월, 24개월에 후속 평가를 받게 되며, 그 이후에는 치료 후 5년까지 매년 후속 평가를 받게 됩니다. 주요 연구 평가에는 부작용(AE) 평가, 표적 유전자(CYBB, gp91^phox를 암호화함)에서 만들어진 기능성 단백질의 혈액 실험실 평가, 유전자 복구 및 표적 외 돌연변이 비율을 확인하기 위한 디옥시리보핵산(DNA) 서열 분석이 포함됩니다. .

이 프로토콜에 따른 최종 연구 추적은 5년이지만 별도의 NIH 프로토콜에 따른 장기 추적은 치료 후 15년까지 매년 계속됩니다.

목표:

주요 목표:

• BE 자가 CD34+ 세포의 안전성을 평가합니다.
• BE 자가 CD34+ 세포의 효능을 평가합니다.

보조 목표:

-평가하려면:

• 염기 편집 효율성(표적 뉴클레오티드 전환율).
• BE HSPC의 접목 기능.
• gp91^phox 발현 복원의 효율성
• NADPH 산화효소 기능 회복의 효율성.
• 임상적 효능.
• 유전자 교정의 안정성.

탐구 목표:

-평가하려면:

• 상위 예측 사이트에서 목표를 벗어난 편집 비율을 평가하여 기본 편집의 특이성.
• 전체 게놈 시퀀싱(WGS)을 통한 무작위 비표적 편집.

엔드포인트:

기본 엔드포인트:

• 치료 후 2년 동안 연구 물질 관련 AE 및 심각한 AE(SAE)로 측정된 BE 자가 HSPC를 사용한 유전자 치료의 안전성.
• 유전자 치료의 유효성은 주입 후 12개월에 10% 이상의 산화효소 양성 과립구를 보유한 피험자의 백분율로 결정됩니다.

2차 종점:

• 변환된 표적 뉴클레오티드 대립유전자의 빈도를 결정합니다.
• 12개월에 말초 혈액에서 주입 제품과 비교하여 유전자 변형 대립유전자의 빈도를 평가합니다.
• gp91^phox 발현 회복의 효능을 평가합니다.
• 치료 후 12개월(>=10% 산화효소 양성 호중구)에 디히드로로다민(DHR) 유동 세포 계측법 산화효소 분석법으로 측정하거나 페리시토크롬 C를 사용하여 반응성 산소종(ROS)을 정량적으로 측정하여 NADPH 산화효소 기능 복원의 효능을 평가합니다. 말초 혈액 과립구에 대한 분석.
• 재발성 감염, 성장 장애, 영양실조, 염증성 장 질환 또는 항생제 사용과 같은 기본 임상 문제의 개선을 통해 임상적 이점을 평가합니다.
• 뉴클레오티드로 변환된 대립유전자의 백분율을 연속적으로 측정하여 유전자 교정의 안정성을 평가합니다.

탐색 종점:

• 포괄적인 시험관 내 스크린, 시퀀싱에 의한 뉴클레아제 게놈 전체 효과의 고처리량 분석을 위한 순환화( CHANGE-seq), 말초 혈액 세포.
• 무작위로 목표를 벗어난 편집 WGS의 비율을 결정합니다.