Basisredigering til mutationsreparation i hæmatopoietiske stam- og stamceller til X-forbundet kronisk granulomatøs sygdom

Studiebeskrivelse:

Åbent, fase 1/2-forsøg for at bestemme sikkerheden og effektiviteten af ​​en enkelt infusion af base-redigerede (BE) autologe hæmatopoietiske stam- og progenitorceller (HSPC'er) til behandling af X-bundet kronisk granulomatøs sygdom (X-CGD) . Basisredigering udføres for at reparere CYBB missense-genmutationer (f.eks. CYBB c.676C>T). Studiehypoteserne er, at 1) baseredigering effektivt kan reparere genmutationer i HSPC'er; og 2) BE HSPC'er kan indpode og differentiere til funktionelle fagocytter med genoprettet nikotinamidadenindinukleotidphosphat (NADPH) oxidaseaktivitet.

I løbet af den indledende udviklingsfase vil hver undersøgelsesdeltager gennemgå aferese til CD34+ HSPC-indsamling til udvikling og validering af et mutationsspecifikt BE-system.

Under behandlingsfasen vil deltagerne modtage en engangsinfusion af BE autolog HSPC Investigational Medicinal Product (IMP) efter konditionering med busulfan (i alt 12 mg/kg).

Deltagerne vil have opfølgende evalueringer i måned 3, 6, 12, 18 og 24 og derefter årligt indtil 5 år efter behandlingen. Nøgleundersøgelsesvurderinger omfatter vurdering af uønskede hændelser (AE), blodlaboratorieevalueringer af funktionelt protein lavet ud fra målgenet (CYBB, koder for gp91^phox) og deoxyribonukleinsyre (DNA) sekventering for at identificere hastigheder for genreparation og mutation uden for målet .

Den endelige undersøgelsesopfølgning under denne protokol vil være efter 5 år, men langtidsopfølgning under en separat NIH-protokol vil fortsætte årligt til 15 år efter behandling.

Mål:

Primære mål:

• For at evaluere sikkerheden af ​​BE autologe CD34+ celler.
• For at evaluere effektiviteten af ​​BE autologe CD34+ celler.

Sekundære mål:

-At vurdere:

• Effektivitet af basisredigering (procenter af målnukleotidkonvertering).
• Engraftment-evne af BE HSPC'er.
• Effektivitet til at genoprette gp91^phox-ekspression
• Effektivitet til at genoprette NADPH-oxidasefunktionen.
• Klinisk effekt.
• Stabilitet af genkorrektion.

Udforskende mål:

-At vurdere:

• Specificitet af basisredigering ved at vurdere hastigheder for redigeringer uden for målet på de mest forventede websteder.
• Tilfældige redigeringer uden for mål ved helgenomsekventering (WGS).

Slutpunkter:

Primære endepunkter:

• Sikkerhed ved genterapi ved brug af BE autologe HSPC'er målt ved undersøgelsesmiddel-relaterede AE'er og alvorlige AE'er (SAE'er) gennem 2 år efter behandling.
• Effekten af ​​genterapi bestemt som procentdel af forsøgspersoner, der har >= 10 % oxidase-positive granulocytter 12 måneder efter infusion.

Sekundære endepunkter:

• Bestem hyppigheden af ​​konverterede målnukleotidalleler.
• Vurder hyppigheden af ​​genmodificerede alleler sammenlignet med infusionsprodukt i perifert blod efter 12 måneder.
• Evaluer effektiviteten af ​​at genoprette gp91^phox-ekspression.
• Evaluer effektiviteten af ​​NADPH oxidase funktionel restaurering som målt ved dihydrorhodamin (DHR) flowcytometri oxidase assay 12 måneder efter behandling (>=10 % oxidase-positive neutrofiler) eller ved kvantitativ måling af reaktive oxygenarter (ROS) ved hjælp af ferricytochrome C assay på perifere blodgranulocytter.
• Evaluer den kliniske fordel ved at forbedre baseline kliniske problemer såsom tilbagevendende infektioner, vækstsvigt, fejlernæring, inflammatorisk tarmsygdom eller brug af antibiotika.
• Vurder stabiliteten af ​​genkorrektion ved seriel måling af procent nukleotid-konverterede alleler.

Udforskende endepunkter:

• Evaluer specificitet ved at vurdere for off-target redigeringer på forudsagte sites med high-throughput sekventering af de 5 mest almindelige kandidat off-target sites identificeret ved en omfattende in vitro screening, Circularization for High-throughput Analysis of Nuclease Genome-wide Effects by sekventering ( CHANGE-seq), i perifere blodceller.
• Bestem hastigheden af ​​tilfældige redigeringer uden for målet WGS.